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Cas9穩(wěn)定表達的人惡性黑色素瘤細胞;A375-Cas9-575品牌

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更新時間:2017-09-07 11:52:54瀏覽次數(shù):170次

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Cas9穩(wěn)定表達的人惡性黑色素瘤細胞;A375-Cas9-575品牌現(xiàn)貨直銷,免費快遞送貨上門。公司供應各種細胞株,細胞系,種類齊全,現(xiàn)貨,質(zhì)量保證,公司所有產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于醫(yī)學診斷。使用前仔細閱讀本說明書。

Cas9穩(wěn)定表達的人惡性黑色素瘤細胞;A375-Cas9-575品牌現(xiàn)貨直銷,免費快遞送貨上門。公司供應各種細胞株,細胞系,種類齊全,現(xiàn)貨,質(zhì)量保證,公司所有產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于醫(yī)學診斷。使用前仔細閱讀本說明書。

產(chǎn)品名稱

生長特性

貨期

Cas9穩(wěn)定表達的人惡性黑色素瘤細胞;A375-Cas9-575品牌

貼壁生長

3-5天

細胞名稱  Cas9穩(wěn)定表達的人惡性黑色素瘤細胞;A375-Cas9-575品牌
形態(tài)特性   上皮樣
生長特性   貼壁生長
特征特性    該細胞是采用慢病毒感染的方式使A375細胞穩(wěn)定表達Cas9-Flag-Neo,經(jīng)400ug/mlG418篩選得到的單克隆,經(jīng)Western Blotting驗證該克隆可以表達Cas9蛋白,可直接用Crispr技術編輯基因組DNA。
培養(yǎng)條件   DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS;1mM丙酮酸鈉+4mML-Glutamine;400ug/ml G418
傳代方法   1:3~1:8傳代;2~3天換液1次。
傳代情況  C3
凍存條件  基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS 
支原體檢測  培養(yǎng)法(-) 
STR   Amelogenin:x,x;CSF1PO:11,12;D12S391:18,21;D13S317:11,14;D16S539:9,9;D18S51:12,17;D19S433:13,14.2;D21S11:29,30;D2S1338:16,24;D3S1358:15,17;D5S818:12,12;D6S1043:11,14;D7S820:9,9;D8S1179:11,14;FGA:23,23;Penta E:10,12;TH01:8,8;TPOX:8,10;vWA:16,17;
同工酶

染色體

使用權限 A類
Cas9穩(wěn)定表達的人惡性黑色素瘤細胞;A375-Cas9-575品牌凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。 
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。 
迄今為止,公司收錄背景資料清晰,細胞活力狀態(tài)良好的細胞株1420株,其中絕大部分是近年來從美國ATCC和NIH分批引進的細胞種子,少部分來自全國各地細胞研究所,細胞來源可靠,背景資料清晰,代數(shù)年輕,活力好。凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽*儲存。 
Cas9穩(wěn)定表達的人惡性黑色素瘤細胞;A375-Cas9-575品牌復蘇操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。
Cas9穩(wěn)定表達的人惡性黑色素瘤細胞;A375-Cas9-575品牌操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量*,使*的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
IL27 Others Human 人 IL27 / Interleukin-27 CHO細胞裂解液 (陽性對照)

CL-0146LTEP-a-2(人肺腺癌細胞)5×106cells/瓶×2

人尿道上皮細胞裂解物HUCL

長白山豬胚胎皮膚成纖維樣細胞;201184 胰腺癌細胞,CFPAC-1細胞 Ranca細胞,小鼠腎癌細胞

SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細胞;293T

HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/Puerto Rico/8/1934) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照)
mCF, 小鼠心臟成纖維細胞 Mouse

CM-R080大鼠大隱靜脈內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基100mL

人脂肪細胞-皮下(HPA-s)(1×106 )

C3H/An小鼠結締組織細胞(L929-TK-);LTK- 小鼠腸平滑肌細胞*培養(yǎng)基 100mL

人癌細胞;MDA-MB-468

FOLR1 Others Mouse 小鼠 FOLR1 / FR-alpha 人細胞裂解液 (陽性對照)
人羊膜細胞;WISH

人肺動脈成纖維細胞 (HPAF)( 5×105 )

CL-0317AML-193(人急性單核細胞白血病單核細胞)5×106cells/瓶×2

人胃癌細胞;MGC-803 大鼠胎兒表皮角質(zhì)形成層細胞*培養(yǎng)基 100mL

Hepa 1-6 小鼠肝癌細胞

RSV-G Others Respiratory syncytial virus/RSV 人類呼吸道合胞病毒 hRSV (B1) glycoprotein G / RSV-G 人細胞裂解液 (陽性對照)
Iodinesolution

固氮根瘤菌培養(yǎng)基 250g 用于固氮菌的分離培養(yǎng)

腸道菌計數(shù)瓊脂 (VRBDA) Violet Red Bile Dextrose Agar 250 用于腸道菌計數(shù)和腸桿菌科鑒別(MERCK方法)

胰酪胨大豆瓊脂培養(yǎng)基250g/瓶用于細菌培養(yǎng)及抑菌劑效力檢查incubationmedia胰酪胨大豆瓊脂培養(yǎng)基250g/瓶用于細菌培養(yǎng)及抑菌劑效力檢查

MFC瓊脂平板(9cm) 10個/包 用于大腸菌群的濾膜法檢測
鹽蛋白胨水培養(yǎng)基27060250g用于鑒別綠膿桿菌分解鹽產(chǎn)氣試驗

3501-prf SkMCM-prf 骨骼肌細胞培養(yǎng)基 500 ml incubation media 3501-prf SkMCM-prf 骨骼肌細胞培養(yǎng)基 500 ml

RoseBengalAgarMedium

BileAesculinAzideAgar

NTM培養(yǎng)基 250g 用于淋球菌的分離培養(yǎng)(Quelab方法)
Cas9穩(wěn)定表達的人惡性黑色素瘤細胞;A375-Cas9-575品牌氧化酶試紙片于空腸彎曲菌氧化酶試驗

水平板計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基 Water Plate Count Agar 用于飼料中細菌總數(shù)測定

抗生素檢定培養(yǎng)基1號(低PH) Antibiotic Agar 250 用于磺芐*效價測定

DYS耶爾森菌瓊脂250g/瓶用于小腸結腸炎耶爾森氏菌的分離培養(yǎng)incubationmediaDYS耶爾森菌瓊脂250g/瓶用于小腸結腸炎耶爾森氏菌的分離培養(yǎng)

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