Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人惡性黑色素瘤細(xì)胞；A375-Cas9-574培養(yǎng)凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。 
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過(guò)1小時(shí)，以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，也可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。 
迄今為止，公司收錄背景資料清晰，細(xì)胞活力狀態(tài)良好的細(xì)胞株1420株，其中絕大部分是近年來(lái)從美國(guó)ATCC和NIH分批引進(jìn)的細(xì)胞種子，少部分來(lái)自全國(guó)各地細(xì)胞研究所，細(xì)胞來(lái)源可靠，背景資料清晰，代數(shù)年輕，活力好。凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽*儲(chǔ)存。

細(xì)胞名稱(chēng)  Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人惡性黑色素瘤細(xì)胞；A375-Cas9-574培養(yǎng)
形態(tài)特性   上皮樣
生長(zhǎng)特性  　貼壁生長(zhǎng)
特征特性    該細(xì)胞是采用慢病毒感染的方式使A375細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)Cas9-Flag-Neo，經(jīng)400ug/mlG418篩選得到的單克隆，經(jīng)Western Blotting驗(yàn)證該克隆可以表達(dá)Cas9蛋白，可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。
培養(yǎng)條件  　DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS；1mM丙酮酸鈉+4mML-Glutamine；400ug/ml G418
傳代方法   1:3~1:8傳代；2~3天換液1次。
傳代情況  C3
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS　
支原體檢測(cè)  培養(yǎng)法（-）　
STR   Amelogenin：x,x；CSF1PO：11,12；D12S391：18,21；D13S317：11,11；D16S539：9,9；D18S51：12,17；D19S433：13,14.2；D21S11：29,30；D2S1338：16,24；D3S1358：15,17；D5S818：12,12；D6S1043：11,14；D7S820：9,9；D8S1179：11,14；FGA：23,23；Penta E：10,12；TH01：8,8；TPOX：8,10；vWA：16,17；
同工酶

染色體

使用權(quán)限 A類(lèi) 
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人惡性黑色素瘤細(xì)胞；A375-Cas9-574培養(yǎng)復(fù)蘇操作要點(diǎn)：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人惡性黑色素瘤細(xì)胞；A375-Cas9-574培養(yǎng)操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量*，使*的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去*，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止*作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
SELL Others Cynomolgus 食蟹猴 CD62L / L-Selectin / SELL 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

CL-0148MADB106(大鼠癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

人前列腺上皮細(xì)胞裂解物HPEpiCL

1590細(xì)胞，人癌細(xì)胞系 小鼠淋巴瘤,EL-4細(xì)胞 腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

Beta-TC-6(小鼠胰島素瘤胰島β細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

HMC Pellet 人冠狀動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞團(tuán)塊 > 1 mio.cells 人心臟成纖維細(xì)胞-心室裂解物HCF-av L
MN-c, 小鼠皮質(zhì)神經(jīng)元 Mouse

CM-R072大鼠腎管狀上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

18. 卵巢細(xì)胞系統(tǒng)

小鼠B淋巴細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞;SH2 小鼠腸粘膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

人急性T淋巴細(xì)胞性白血病細(xì)胞;I 2.1(CRL-2572)

KIT Others Mouse 小鼠 c-kit / CD117 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人皮膚成纖維細(xì)胞;CCC-HSF-1

人肺成纖維細(xì)胞 (HPF)( 5×105 )

CL-0277HCC94(人子宮鱗癌細(xì)胞(高分化))5×106cells/瓶×2

人肺粘液上皮樣癌細(xì)胞;NCI-H292 大鼠表皮黑色素細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

MFC 小鼠胃癌細(xì)胞

TFRC Others Human 人 TFRC / CD71 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
沙門(mén)氏志賀氏增菌液250g用于志賀氏菌和沙門(mén)氏菌增菌培養(yǎng)

Nitrogen-fixingRhizobiummedium

產(chǎn)毒培養(yǎng)基 Toxin-Producing Medium 250 用于青霉、曲霉的產(chǎn)毒培養(yǎng)

TGC培養(yǎng)基250g/瓶用于無(wú)菌檢驗(yàn)(日本)incubationmediaTGC培養(yǎng)基250g/瓶用于無(wú)菌檢驗(yàn)(日本)

MFCAgar
半固體瓊脂26050250g供細(xì)菌動(dòng)力觀察、菌種保存等用(GB4789.4-20/T4789.8-2008)。

3號(hào)抗生素培養(yǎng)基(Assay 肉湯) (CM0287) Oxoid incubation media 3號(hào)抗生素培養(yǎng)基(Assay 肉湯) (CM0287) Oxoid

扇形平菇、扁形平菇 殺蚊子 支/瓶

NutrientAgar

肉湯培養(yǎng)基G 250g 用于大腸桿菌、大腸菌群的檢測(cè)
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人惡性黑色素瘤細(xì)胞；A375-Cas9-574培養(yǎng)氧化酶試劑細(xì)菌氧化酶試驗(yàn)

亮綠瓊脂 250(g) incubation media 亮綠瓊脂 250(g)

三苯四唑*吐溫80營(yíng)養(yǎng)瓊脂 TTC Lecithin Tween 80 Nutrient Agar 250克 用于化妝品中細(xì)菌總數(shù)測(cè)定

膽硫乳瓊脂(DHL)250腸道菌選擇性培養(yǎng)基，特別是沙門(mén)氏菌的選擇性分離(GB、SN標(biāo)準(zhǔn))incubationmedia膽硫乳瓊脂(DHL)250腸道菌選擇性培養(yǎng)基，特別是沙門(mén)氏菌的選擇性分離(GB、SN標(biāo)準(zhǔn))

BrilliantGreenAgar

Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人惡性黑色素瘤細(xì)胞；A375-Cas9-574培養(yǎng)現(xiàn)貨直銷(xiāo)，免費(fèi)快遞送貨上門(mén)。公司供應(yīng)各種細(xì)胞株，細(xì)胞系，種類(lèi)齊全，現(xiàn)貨，質(zhì)量保證，公司所有產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于醫(yī)學(xué)診斷。使用前仔細(xì)閱讀本說(shuō)明書(shū)。