高效液相色譜(HPLC)是一種分離液體混合物中各組分的過(guò)程,它現(xiàn)在是分析化學(xué)中大的工具之一。將液體樣品注入流經(jīng)裝有分離介質(zhì)(固定相)的色譜柱的溶劑流(流動(dòng)相)中。當(dāng)流過(guò)色譜柱時(shí),組分通過(guò)差異遷移而彼此分離。充分發(fā)揮其在中藥樣品分析分離方面的特長(zhǎng),為該領(lǐng)域的進(jìn)步和發(fā)展做出了巨大貢獻(xiàn)。

高效液相色譜是泛使用的色譜分析方法。該系統(tǒng)由流動(dòng)相儲(chǔ)液瓶、、注射器、色譜柱、檢測(cè)器和記錄器組成。其整體組成與氣相色譜相似,但根據(jù)流動(dòng)相為液體的特點(diǎn)做了很多調(diào)整。HPLC的要求輸液量恒定穩(wěn)定;采樣系統(tǒng)要求采樣方便,開(kāi)關(guān)嚴(yán)密;由于液體流動(dòng)相的粘度遠(yuǎn)高于氣體,為了降低柱壓,高效液相色譜的色譜柱一般較粗,長(zhǎng)度也比氣相色譜柱短得多。高效液相色譜廣泛應(yīng)用于定量和定性分析的幾乎每個(gè)領(lǐng)域。
使用高效液相色譜系統(tǒng)時(shí),將待測(cè)液體物質(zhì)注入色譜柱,通過(guò)壓力在固定相中移動(dòng)。由于被檢測(cè)物種的不同物質(zhì)與固定相的相互作用不同,不同的物質(zhì)依次離開(kāi)色譜柱,檢測(cè)器得到不同的峰信號(hào)。最后,通過(guò)分析和比較這些信號(hào)來(lái)判斷待檢測(cè)物質(zhì)中包含的物質(zhì)。高效液相色譜作為一種重要的分析方法,廣泛應(yīng)用于化學(xué)和生化分析中。高效液相色譜系統(tǒng)與經(jīng)典液相色譜在原理上沒(méi)有本質(zhì)區(qū)別。其特點(diǎn)是使用高壓、高靈敏度檢測(cè)器和高效微粒固定相。適用于分析高沸點(diǎn)、高分子量和不同極性的有機(jī)化合物。
高效液相色譜可以分離、鑒定和定量任何樣品中可溶于液體的化合物。今天,痕量濃度低至萬(wàn)億分之一(ppt)的化合物可以很容易地被識(shí)別出來(lái)。HPLC可以并且已經(jīng)應(yīng)用于幾乎任何樣品,例如藥物、食品、保健品、化妝品、環(huán)境基質(zhì)、法醫(yī)樣品和工業(yè)化學(xué)品。