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北京百奧創(chuàng)新科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第9年

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關(guān)于血清的這些知識(shí),你了解嗎?

時(shí)間:2022/9/28閱讀:2225
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  • 什么是血清

血清,指血液凝固后,在血漿中除去纖維蛋白原及某些凝血因ZI后分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白原已被除去的血漿。

  • 血清在細(xì)胞培養(yǎng)中的作用

血清的成分多樣,可以給細(xì)胞提供:

1. 基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),如氨基酸、維生素、脂類物質(zhì)、無(wú)機(jī)物、核酸衍生物等細(xì)胞生長(zhǎng)必需的物質(zhì);

2. 激素:胰島素、促生長(zhǎng)激素、類固醇激素如睪酮和孕酮、腎上腺皮質(zhì)激素等。

3. 生長(zhǎng)因子:表皮生長(zhǎng)因子、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、血小板生長(zhǎng)因子、神經(jīng)細(xì)胞生長(zhǎng)因子等;

4. 結(jié)合蛋白:結(jié)合蛋白在細(xì)胞代謝過(guò)程中起著重要作用,它能攜帶重要地低分子量物質(zhì),如轉(zhuǎn)鐵蛋白結(jié)合鐵離子,白蛋白攜帶維生素、激素等;

5. 促接觸和伸展因子使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷;

6. 蛋白酶抑制劑中和某些細(xì)胞(如內(nèi)皮細(xì)胞等)釋放的蛋白酶,從而對(duì)培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護(hù)作用;

7.血清含有的一些微量元素和離子在代謝解毒中起重要作用,如SeO3,硒等;

8.血清蛋白使血清具有一定的粘度,可以保護(hù)細(xì)胞免受機(jī)械損傷,如懸浮培養(yǎng)攪拌時(shí)保護(hù)細(xì)胞。

  • 常用的血清

目前常用的血清有胎牛血清、新生牛血清和小牛血清。


以上三種血清中胎牛血清品質(zhì)ZUI高,因?yàn)樘ヅ_€未接觸外界,血清中所含的抗體、補(bǔ)體等對(duì)細(xì)胞有害的成分,因此價(jià)格也最高。

  • 血清的使用與選擇

血清的使用濃度一般在5%~20%,常用10%。

有些細(xì)胞需要胎牛血清才能生長(zhǎng),而有些細(xì)胞有小牛血清就能生長(zhǎng)。因此,要根據(jù)具體用途與需要選擇合適的血清。

  • 血清的儲(chǔ)存與解凍

1.儲(chǔ)存:建議將血清儲(chǔ)存在-5℃~-20℃(HyClone胎牛血清建議儲(chǔ)存在-10℃)。注意:建議不要將血清儲(chǔ)存在-80℃中!(因?yàn)閮?chǔ)存在-80℃,解凍時(shí)巨大的溫差會(huì)使血清產(chǎn)生更多的沉淀。)

2.解凍:不建議于4℃過(guò)夜解凍,也不建議直接將冷凍的血清放在37℃水浴或者溫箱中解凍,因?yàn)槿粞鍥](méi)有混勻,底部的蛋白會(huì)變性形成沉淀。

血清解凍的方法(三步法)如下:

注:在水浴過(guò)程中,血清要*浸入水中,同時(shí)在融化過(guò)程中要慢慢搖動(dòng)瓶身混勻血清,但在搖動(dòng)中盡量不要產(chǎn)生泡沫。

血清在解凍后,可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求分裝成單次用量,密封好后立即放回-20℃冰箱繼續(xù)儲(chǔ)存以供進(jìn)一步使用,這樣可以有效避免反復(fù)凍融的問(wèn)題。

  • 血清出現(xiàn)沉淀或絮狀物質(zhì)的原因

1. 2-8℃長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存。

2. 解凍過(guò)程中未混勻。

3. γ-輻照:不會(huì)損害血清的理化特性或細(xì)胞培養(yǎng)性能。

4. 反復(fù)凍融:使血清脂蛋白發(fā)生變性造成渾濁。

5. 血清中殘留的纖維蛋白原:殘留的纖維蛋白原在解凍后會(huì)轉(zhuǎn)化為纖維蛋白,過(guò)量的纖維蛋白在血清中表現(xiàn)為可見(jiàn)的絮狀物質(zhì)。

去除方法:400 g離心。不建議直接過(guò)濾血清以去除絮狀物質(zhì),因?yàn)檫^(guò)濾器可能會(huì)堵塞或者截留重要的蛋白質(zhì)。

6. 磷酸鈣:磷酸鈣在血清中通常呈云狀,并且在倒置顯微鏡下觀察會(huì)看到可以自由移動(dòng)的小黑點(diǎn),因此磷酸鈣沉淀通常被誤認(rèn)為是微生物污染物。

檢測(cè)是否污染方法:將1 mL待測(cè)血清直接倒在細(xì)菌瓊脂平板上,在37℃培養(yǎng)之后觀察菌落的生長(zhǎng)情況。在油鏡(放大1000倍)下觀察革蘭氏染色,以確定是否受到污染。不建議用37℃孵育的血清直接檢測(cè)無(wú)菌性,因?yàn)樵?7℃孵育之后,血清中的磷酸鈣沉淀物會(huì)增加。

  • 國(guó)內(nèi)購(gòu)買(mǎi)胎牛血清的現(xiàn)狀

難辨真假,產(chǎn)地不實(shí),有的甚至都不是牛血清。非正規(guī)胎牛血清產(chǎn)品會(huì)直接影響實(shí)驗(yàn)的結(jié)果和穩(wěn)定以及數(shù)據(jù)的真實(shí)性,對(duì)實(shí)驗(yàn)造成很大的影響。因此,購(gòu)買(mǎi)血清產(chǎn)品時(shí)一定要選擇可靠的產(chǎn)品!


北京百奧創(chuàng)新科技有限公司提供來(lái)源可靠,產(chǎn)地可查的HyClone、Omnimabs以及澳申生物的血清產(chǎn)品。


  • HyClone新西蘭源胎牛血清產(chǎn)品優(yōu)勢(shì):

1.真混合」生產(chǎn)工藝,確保批內(nèi)一致性

2.采用一次性生產(chǎn)設(shè)施,*消除了交叉污染的風(fēng)險(xiǎn);

3.最大的批處理能力,降低批間差異造成的影響

4.完整的來(lái)源地可追溯性;

5.低抗體含量,高生長(zhǎng)因子;

6. OritainTM天然品指紋識(shí)別技術(shù)


  • Omnimabs南美胎牛血清產(chǎn)品優(yōu)勢(shì):

1. 合法進(jìn)口于無(wú)瘋牛病疫區(qū),具有合法的進(jìn)口批文、海關(guān)證明以及檢驗(yàn)檢疫證明;

2. 100%原裝血源

3.采血點(diǎn)集中,生產(chǎn)工藝先進(jìn),批次穩(wěn)定;

4.符合GMP車間要求,滿足工業(yè)客戶的需要。


  • 澳申生物新生牛血清產(chǎn)品優(yōu)勢(shì):

1.國(guó)家批準(zhǔn)的血源地,血清均可追溯源頭,一瓶一碼;

2.國(guó)際先JIN生產(chǎn)工藝:3級(jí)0.1 μm過(guò)濾標(biāo)準(zhǔn)凈化車間,萬(wàn)級(jí)環(huán)境下罐裝,全程低溫控制系統(tǒng);

3.國(guó)內(nèi)雙重質(zhì)檢,全面理化、微生物檢測(cè),不含BVD\PI3\IBR\RABV\BAV BRSV\BTV等牛病病毒。




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