一、代理介紹

mRNA合成試劑盒代理——北京百奧創(chuàng)新科技有限公司，提供多個(gè)品牌的mRNA合成試劑盒等產(chǎn)品，更多產(chǎn)品咨詢，歡迎聯(lián)系！

二、產(chǎn)品介紹

HiScribe T7 ARCA mRNA合成試劑盒基于T7 RNA聚合酶體外轉(zhuǎn)錄系統(tǒng)，以高產(chǎn)率、高加帽效率及完整修飾體系支持功能性mRNA的標(biāo)準(zhǔn)化制備，適用于疫苗開發(fā)、細(xì)胞治療及基因功能研究。

核心酶學(xué)組件

重組T7 RNA聚合酶經(jīng)高密度發(fā)酵與多步純化，比活性>500 U/μg，37°C反應(yīng)30分鐘可合成>150 μg mRNA（1 μg DNA模板）。酶制劑無DNase與RNase污染，轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物3'端均一性經(jīng)PAGE驗(yàn)證。反應(yīng)緩沖液優(yōu)化NTP比例與鎂離子濃度，減少轉(zhuǎn)錄流產(chǎn)與dsRNA副產(chǎn)物生成，全長轉(zhuǎn)錄本占比>90%。

共轉(zhuǎn)錄加帽技術(shù)

ARCA（Anti-Reverse Cap Analog）以3'-O-Me-m7G(5')ppp(5')G結(jié)構(gòu)摻入轉(zhuǎn)錄起始端，加帽效率>95%，較傳統(tǒng)m7GpppG帽結(jié)構(gòu)提升翻譯效率2-3倍。共轉(zhuǎn)錄加帽避免酶法后修飾步驟，反應(yīng)體系一步完成轉(zhuǎn)錄與加帽，產(chǎn)物5'端帽0結(jié)構(gòu)經(jīng)HPLC-MS確證。帽類似物與GTP濃度比例優(yōu)化至4:1，確保起始效率與鏈延伸平衡。

核苷修飾選項(xiàng)

N1-甲基假尿苷（m1Ψ）或5-甲基胞苷（m5C）修飾NTP套裝可選，修飾核苷wan-quan替代天然對(duì)應(yīng)物，降低先天免疫識(shí)別并延長體內(nèi)半衰期。修飾mRNA在樹突狀細(xì)胞中IL-6、TNF-α誘導(dǎo)水平較未修飾品降低>90%，蛋白表達(dá)持續(xù)時(shí)間延長至72-96小時(shí)。定制混合修飾比例（如m1Ψ+m5C組合）經(jīng)文獻(xiàn)驗(yàn)證可進(jìn)一步優(yōu)化表達(dá)效率與免疫原性平衡。

模板設(shè)計(jì)與兼容性

線性化質(zhì)?；騊CR產(chǎn)物均可作為模板，T7啟動(dòng)子序列為5'-TAATACGACTCACTATAGGG-3'，轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)+1為G時(shí)效率優(yōu)。試劑盒提供陽性對(duì)照模板（EGFP編碼序列），反應(yīng)體系20 μL標(biāo)準(zhǔn)規(guī)模可放大至100 μL或毫升級(jí)別。poly(A)尾添加支持兩種策略：模板編碼120-150 nt A尾，或轉(zhuǎn)錄后E. coli poly(A)聚合酶加尾，尾長分布CV<15%。

純化與質(zhì)量控制

DNase I處理去除模板DNA，磁珠或氯化鋰沉淀純化回收率>80%，A260/A280比值1.9-2.1。完整性經(jīng)毛細(xì)管電泳或生物分析儀評(píng)估，完整峰占比>80%為合格標(biāo)準(zhǔn)。內(nèi)毒素去除方案可選，LAL檢測<0.1 EU/μg mRNA滿足動(dòng)物實(shí)驗(yàn)與細(xì)胞治療原料要求。凍干制劑經(jīng)優(yōu)化保護(hù)劑配方，-20°C保存24個(gè)月完整性無顯著下降。

下游應(yīng)用驗(yàn)證

體外翻譯系統(tǒng)（兔網(wǎng)織紅細(xì)胞裂解物或小麥胚芽提取物）驗(yàn)證蛋白表達(dá)，條帶特異性經(jīng)Western blot確認(rèn)。細(xì)胞水平轉(zhuǎn)染采用脂質(zhì)體或電穿孔遞送，流式細(xì)胞術(shù)定量表達(dá)陽性率。體內(nèi)表達(dá)經(jīng)熒光素酶報(bào)告基因驗(yàn)證，肌肉注射或脂質(zhì)納米顆粒靜脈給藥后6-24小時(shí)達(dá)表達(dá)峰值。

三、代理公司介紹

mRNA合成試劑盒代理——北京百奧創(chuàng)新科技有限公司，提供OriGene蛋白等產(chǎn)品，更多產(chǎn)品咨詢，歡迎聯(lián)系！代理——北京百奧創(chuàng)新科技有限公司，公司產(chǎn)品線涉及細(xì)胞與基因治療、免疫學(xué)、分子生物學(xué)、 細(xì)胞生物學(xué)等多個(gè)方向，專注于生命科學(xué)試劑、耗材、細(xì)胞、儀器等產(chǎn)品銷售，經(jīng)營的品牌主要有：ThermoFisher、Sigma、Qiagen、EZBioscience、ZYMO Research、MedKoo、Abcam、Elabscience、GeneTex、Gentaur、immunostar、Invitrogen、invivogen、Kerafast、Coriell、ATCC、SSI-DIAGNOSTICA、凱杰、RD systems、GoldBio等等。我們提供質(zhì)優(yōu)價(jià)美的產(chǎn)品、及時(shí)到位的服務(wù)，努力成長為生命科學(xué)和生物技術(shù)企業(yè)的優(yōu)質(zhì)供應(yīng)商。