雞蛋營養(yǎng)豐富，含有蛋白質、脂肪、、、維生素、鐵、鈣、鉀等人體需要的礦物質。又稱膽甾醇。一種環(huán)戊烷多氫菲的衍生物。早在18世紀人們已從膽石中發(fā)現(xiàn)了，1816年化學家本歇爾將這種具脂類性質的物質命名為。膽 固醇廣泛存在于動物體內，尤以腦及神經(jīng)組織中zui為豐富，在腎、脾、皮膚、肝和膽汁中含量也高。其溶解性與脂肪類似，不溶于水，易溶于乙mi、氯仿等溶劑。膽 固醇是動物組織細胞所的重要物質，它不僅參與形成細胞膜，而且是合成膽汁酸，維生素D以及甾體激素的原料。然而有研究人員提出，雞蛋含量相對較高，過多攝入雞蛋會導致人體血清增高，引發(fā)心血管疾病。由此我們對雞蛋中含量進行研究，探索快速檢測雞蛋中含量的方法。

實驗部分

1.儀器與試劑

儀器：Waters液相色譜儀waters 2695（配置高壓泵，紫外檢測器），萬分之一梅特勒電子天平，渦旋混合儀，離心機，超聲波清洗器

試劑： 標準品，甲醇（色譜純），異丙醇（分析純），**（分析純），石油醚（分析純），無水乙醇（分析純），市售普通雞蛋

2. 色譜條件

色譜柱：C18色譜柱 150mm×4.6mm×5μm；流動相：甲醇-異丙醇（4:1，v/v）；流速：1.0mL/min；溫度：25℃； 進樣量：20μL；檢測波長：205nm。

3 .標準溶液配制

準確稱取標準品25mg，于25ml容量瓶中，用無水乙醇溶解稀釋至刻度，得儲備液（1.0g/L）。
取儲備液0.0，0.5， 1.0，2.0，4.0，6.0，8.0，1.0ml于10ml容量瓶中，無水乙醇稀釋定容，的濃度為0，0.05 ，0.1，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0g/L 標準溶液。

4 .樣品前處理
取雞蛋稱重，除去蛋清，準確稱取蛋黃重量。取蛋黃樣品2.0g，用20ml高純水溶解稀釋混勻，得蛋黃稀釋液（0.1g/ml）。取蛋黃稀釋液1.0ml于 具塞離心管中，加無水乙醇1.0ml，渦旋混勻，加乙mi3.0ml，石油醚3.0ml，渦旋混合，將混合液離心（4000r/min），使液體分層，取上 層有機相；下層再加入2.0ml**和2.0ml石油醚進行萃取，合并上層萃取液，氮吹儀吹干（溫度<30℃），0.5ml乙醇溶解，經(jīng) 0.45μm有機微孔濾膜過濾后，上機檢測。

5.結果與討論

6.標準工作曲線

配制好的系列標準溶液，在設定好的色譜條件下進行色譜分析，進樣量為20μL，保留時間為6.72min，每個濃度標準溶液重復進樣三次，以峰高H（mAU）為縱坐標，標準溶液濃度C(g/L)為橫坐標，繪制標準工作曲線，線性回歸方程為H=76.45C-0.052，相關系數(shù)r=0.9991。

7.蛋黃中含量

將處理好的蛋黃樣品取樣測試，進樣量20μL，在6.72min被洗脫出來，蛋黃其他組分能與有效分離，不干擾的測定。由標準曲線回歸方程計算含量。（液相圖譜件見圖1，結果見表1）

圖1 蛋黃液相圖譜



表1 蛋黃含量

8.結論

本文建立了利用反相液相色譜法快速測定蛋黃中的方法，樣品無需皂化處理，直接用乙mi和石油醚進行萃取，大大節(jié)約了樣品前處理時間，操作快速簡便， 具有良好的準確度和重現(xiàn)性，可做為測定蛋黃中含量的有效方法。另主要來自人體自身合成，食物中的是次要補充。一般常人每日從食物中攝取 200mg，即可滿足身體需要。專家建議每天攝入50mg-300mg為佳。