滬鼎與您一起看免疫組化的實(shí)驗(yàn)步驟及特點(diǎn)

來(lái)源：上海滬鼎生物科技有限公司 2014年04月30日 10:25

免疫組化實(shí)驗(yàn)步驟：
1. 石蠟切片置于67℃烘箱中，烘片2小時(shí)，脫蠟至水，用pH7.4的PBS沖洗三次，每次3分鐘（3×3’）。
2. 取一定量pH=6.0檸檬酸鹽緩沖液，加入微波盒中，微波加熱至沸騰，將脫蠟水化后的組織切片置于耐高溫塑料切片架上，放入已沸騰的緩沖液中，中檔微波處理10分鐘，取出微波盒流水自然泠卻，從緩沖液中取出玻片，先用蒸餾水沖洗兩次，之后用PBS沖洗2×3’。（注：不是所有的抗體都需要微波修復(fù)的，視具體情況而定）
3. 每張切片加1滴3%H2O2，室溫下孵育10分鐘，以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶的活性。PBS沖洗3×3’。
免疫組化特點(diǎn)：
1. 在切片加上一抗后，第二抗體標(biāo)記多聚螯合物酶（HRP）的復(fù)合物與一抗結(jié)合，在多聚螯合物上有大量的HRP分子，使抗原信號(hào)有顯著的放大，其敏感性較SABC、SP法高。
2. 由于多聚物在體內(nèi)不存在，又不使用生物素，從而避免了由于生物素引起的非特異性背景染色，背景比SABC、SP法清晰。

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