酵母核糖核酸的提取時的操作方法

來源：上海滬鼎生物科技有限公司 2014年05月05日 14:49

操作方法：
一、酵母RNA的提取
（1）取酵母3克置于研缽中，加入25毫升0.5%*溶液研成勻漿。
（2）將勻漿移入三角瓶中，在沸水浴上加熱水30分鐘。
（3）離心沉淀10-15分鐘。
（4）取上清液用3M醋酸4-5滴酸化至蘭色石蕊試紙變紅色
（5）一面攪拌一面加入含2%HCL的95%酒精溶液10毫升。
（6）離心5分鐘，將沉淀用無水乙醇5毫升洗滌一次，離心5分鐘，沉淀再用3毫升洗滌一次，離心5 分鐘。
（7）用手心握住離心管并不斷攪拌使揮發(fā)而使RNA迅速干燥。
二、水解RNA
取1/2左右的RNA粉末于試管中加入8%硫酸4毫升在沸水浴上水解5分鐘。
三、組成成分鑒定
（1）嘌呤堿基的檢查
取水解液6滴，于試管中加氨水10滴，再加0.1M硝酸銀溶液6滴，在沸水浴上加熱，觀察變化，何故？
（2）磷酸的檢查
取水解液5滴，于試管中加5滴濃硝酸酸化，再加入5滴鉬酸銨溶液在沸水浴上加熱，冷卻靜止有何現(xiàn)象。
（3）核糖的檢查
取水解液6滴，于試管中加10%*，使其成堿性，然后加地衣酚3毫升，在沸水浴上加熱，觀察變化，何故？

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