摘要　　報(bào)道了頭孢克羅分散片中頭孢克羅的反相液相色譜法，采用ODS柱（250 mm×4.6 mm），水—3.86%*溶液—甲醇（1380∶29∶591）為流動(dòng)相，乙酰*為內(nèi)標(biāo)，用紫外檢測器于254 nm波長處檢測。平均回收率為99.83%，RSD＝0.72 %（n=5），線性范圍為0.1～0.5 mg/mL（r＝0.9996）。檢測限為1.6×10-4μg。本法具有快速、簡便、靈敏、準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn)。
關(guān)鍵詞：反相液相色譜法　頭孢克羅
　　頭孢克羅具有抗菌譜廣，抗菌活性強(qiáng)等特點(diǎn)。其原料及制劑在我國已有生產(chǎn)和使用。原料和制劑的含量測定方法已見報(bào)道，有羥胺法［1］、液相色譜法［2，3］、微生物效價(jià)測定法［4］。本文采用RP—液相色譜法，以內(nèi)標(biāo)法測定頭孢克羅分散片的含量，操作簡便快捷，結(jié)果準(zhǔn)確可靠。輔料及雜質(zhì)降解物不干擾測定。
1　儀器和試劑液相色譜儀UV5000型，UV5000檢測器，；頭孢克羅對(duì)照品（含量99.53%）、頭孢克羅分散片均由安徽省新藥研究院提供；乙酰*由中國藥品生物制品檢定所提供；其它試劑均為分析純。
對(duì)照品溶液的制備：取頭孢克羅對(duì)照品約60 mg，精密稱定，置100 mL容量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度。
內(nèi)標(biāo)物溶液的制備：取乙酰*約30 mg，置100 mL容量瓶中，加適量甲醇溶解，用流動(dòng)相稀釋至刻度。
2　色譜條件
色譜柱：Irregular-H C18（10 μm）250mm×4.6 mm，流動(dòng)相：水—3.86 %*溶液—甲醇（1380∶29∶591），流速為0.8 mL/min，檢測波長為254nm，靈敏度為1.0 AUFS，進(jìn)樣10 μL。
3　線性關(guān)系
取頭孢克羅對(duì)照品50 mg，精密稱定，置50 mL容量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，使之成為1.0mg/mL的溶液。精密量取此溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mL分置5只10mL容量瓶中，再分別加入前述內(nèi)標(biāo)物溶液各4.0 mL，加水稀釋至刻度。分別取10μL注入色譜儀。記錄色譜圖。以頭孢克羅對(duì)照品的濃度C（mg/mL）為橫坐標(biāo)，以頭孢克羅對(duì)照品基線構(gòu)成之面積稱峰面積。A＝×σ×h＝2.507σh＝1.064Wh/2h>峰面積與內(nèi)標(biāo)物峰面積的比值A(chǔ)為縱坐標(biāo)，求得回歸方程（n=5）：
A＝3.152C-0.11142　r＝0.9996
表明在0.10～0.50 mg/mL的濃度范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好。
4　精密度試驗(yàn)
分別取前述對(duì)照品溶液5.0 mL和內(nèi)標(biāo)物溶液4.0 mL置10 mL容量瓶中，加水至刻度，使之成為含頭孢克羅0.3mg/mL的溶液。分別在日內(nèi)、日間（5d內(nèi)）連續(xù)進(jìn)樣，以內(nèi)標(biāo)物峰面積與對(duì)照品峰面積之比值計(jì)算RSD（n=5）。日內(nèi)RSD=0.701%；日間RSD=1.09 %。
5　加樣回收試驗(yàn)
精密稱取已知頭孢克羅含量的同一批樣品3份，分別加入精密稱定的頭孢克羅對(duì)照品適量，按相當(dāng)于頭孢克羅60mg取樣，照樣品測定項(xiàng)下方法測定，計(jì)算回收率。
6        方法專屬性試驗(yàn)
6.1　輔料的色譜行為　經(jīng)實(shí)驗(yàn)，輔料無吸收峰，對(duì)頭孢克羅的測定不產(chǎn)生干擾。
6.2　內(nèi)標(biāo)物對(duì)頭孢克羅吸收峰的影響　內(nèi)標(biāo)物的保留時(shí)間約13.3 min，頭孢克羅的保留時(shí)間約5.5min，兩者峰形及分離度良好
對(duì)照品（A）與樣品（B）色譜圖
1.頭孢克羅　2.乙酰*
6.3        雜質(zhì)及降解物對(duì)含量測定的影響　正常的樣品中未見雜質(zhì)吸收峰。把樣品經(jīng)以下處理：將頭孢克羅分別以0.1 mol/L鹽酸溶液、0.1mol/L*溶液和水各制成0.5 mg/mL的溶液，于80 ℃加熱24 h，進(jìn)樣10μL，得其破壞性圖譜（圖2）。各降解產(chǎn)物對(duì)頭孢克羅的定量無影響。
頭孢克羅經(jīng)酸、堿、水處理后的色譜圖
A.0.1 mol/L鹽酸
B.0.1 mol/L*溶液　C.水
7        樣品測定
取頭孢克羅分散片10片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量（相當(dāng)于頭孢克羅60 mg），置100mL容量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度。過濾，精密量取續(xù)濾液5.0 mL至10 mL容量瓶，精密加入內(nèi)標(biāo)溶液4.0mL，加水至刻度。另取頭孢克羅對(duì)照品60 mg，精密稱定，置100 mL容量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度。取對(duì)照液5.0 mL至10mL容量瓶，加入內(nèi)標(biāo)物溶液4.0 mL，加水至刻度。
分別取上述溶液10 μL注入色譜儀，按內(nèi)標(biāo)法計(jì)算含量。
按上述方法對(duì)3批頭孢克羅分散片的含量進(jìn)行了測定。每批樣品測定3次。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表2；樣品色譜圖見圖1—B。