利用上海百蕊生物的大鼠D-乳酸ELISA檢測試劑盒來測量大鼠體內(nèi)糖代謝變化

通過觀察實驗性脾氣虛證大鼠肝臟葡萄糖激酶(GK)基因表達的變化；骨骼肌和腦組織中乳酸(LD)含量和琥珀酸脫氫酶(SDH)活性的變化；血糖和血清D-木糖含量的變化，來探討實驗性脾氣虛證大鼠糖代謝的變化，為揭示中醫(yī)脾氣虛證的實質(zhì)提供現(xiàn)代分子生物學(xué)理論基礎(chǔ)。 方法 本實驗采用番瀉葉瀉下和大黃瀉下的方法制造實驗性脾氣虛證大鼠模型；采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)的方法檢測大鼠肝臟葡萄糖激酶(GK)基因mRNA的表達；采用比色分析法測定骨骼肌和腦組織中乳酸(LD)含量和琥珀酸脫氫酶(SDH)活性的變化；采用葡萄糖氧化酶法測定血糖濃度；采用比色分析法測定血清D-木糖(D-xylose)含量；觀察實驗性脾氣虛證造模過程中大鼠的一般狀況，如：體重增長值、精神狀況、皮毛色澤、飲食量、飲水量、大小便等情況的變化；統(tǒng)計方法采用獨立樣本t檢驗。

結(jié)果 1．體重增長值：番瀉葉瀉下脾氣虛組大鼠體重增長值與生理鹽水對照組比較顯著降低(P＜0.01)，大黃瀉下脾氣虛組大鼠體重增長值與生理鹽水對照組比較顯著降低(P＜0.01)。 2．血糖：番瀉葉瀉下脾氣虛組大鼠血糖與生理鹽水對照組比較顯著降低(P＜0.05)，大黃瀉下脾氣虛組大鼠血糖與生理鹽水對照組比較顯著降低(P＜0.05)。 3．血清D-木糖含量：番瀉葉瀉下脾氣虛組大鼠血清D-木糖含量與生理鹽水對照組比較顯著降低(P＜0.01)，大黃瀉下脾氣虛組大鼠血清D-木糖含量與生理鹽水對照組比較顯著降低(P＜0.01)。 4．骨骼肌中乳酸含量：番瀉葉瀉下脾氣虛組大鼠骨骼肌中乳酸含量與生理鹽水對照組比較顯著升高(尸$lt;$0.05)，大黃瀉下脾氣虛組大鼠骨骼肌中乳酸含量與生理鹽水對照組比較顯若升高 (P$lt;$0 .05)。5.骨骼肌中歡拍酸脫氫酶活性:番瀉葉瀉下脾氣應(yīng)組大鼠骨骼肌中SDH活性與生理鹽水對照組比較顯著降低(尸$lt;$0.05)，大黃瀉下脾氣虛組大鼠骨骼肌中SDH活性與生理鹽水對照組比較顯著降低(尸$lt;$0.05)。6.腦組織中乳酸含量:番瀉葉瀉下脾氣虛組大鼠腦組織中乳酸含量與生理鹽水對照組比較顯著降低(P$lt;$0.05)，大黃瀉下脾氣虛組大鼠腦組織中乳酸含量與生理鹽水對照組比較顯著降低 (P$lt;$0 .05)。7.腦組織中歡拍酸脫氫酶活性:番瀉葉瀉下脾氣虛組大鼠腦組織中SDH活性與生理鹽水對照組比較顯著降低(P$lt;$0.05)，大黃瀉下脾氣虛組大鼠腦組織中SDH活性與生理鹽水對照組比較顯著降低(尸$lt;$0 .05)。8.肝臟中葡萄糖激酶基因表達情況:番瀉葉瀉下脾氣虛組大鼠肝臟中葡萄糖激酶鑫因表達與生理鹽水對照組比較顯著降低(P$lt;$0 .01)。大黃瀉下脾氣虛組大鼠肝臟中葡萄糖激鵝基因表達與生理鹽水對照組比較顯著降低(尸$lt;$0.05)。番瀉葉瀉下脾氣虛組大鼠肝臟中葡萄枯激禽墓因表達與大黃瀉下脾氣虛組大鼠比較顯著降低護$lt;$0.05)。

結(jié)論1.實驗性脾氣虛證大鼠會出現(xiàn)糖的消化、吸收和代謝障礙。2.實驗性脾氣虛證大鼠骨骼肌的糖代謝障礙主要表現(xiàn)為:糖有氧氧化減弱，糖醉解增強，搶醉解終產(chǎn)物乳酸堆積。3.實驗性脾氣虛證大鼠腦組織的糖代謝障礙主要表現(xiàn)為:糖有氧氧化和糖醉解均減弱。4.實驗性脾氣虛證大鼠肝葡萄糖激醉墓因表達下降，肝糖原分解加速，肝糖異生作用加強，肝贓及外周組織對葡萄糖的攝取和利用減少，肝臟輸出葡萄糖增多，進一步從分子生物學(xué)水平證明實驗性脾氣虛證大鼠會出現(xiàn)糖代謝障礙。5.苦寒瀉下中藥番瀉葉和大黃比較，番瀉葉可以作為苦寒瀉下方法制造實驗性脾氣虛誣動梅模型的藥物。