液相色譜已經(jīng)*改變了生命科學的研究

2017年09月25日 11:34

　　液相色譜色譜柱是色譜系統(tǒng)的核心。在堿性分析物分析方面，制藥業(yè)一直是HPLC色譜柱向高速、高分辨率、更好的峰形發(fā)展的主要驅(qū)動力。此外,QC實驗室已經(jīng)被要求改進色譜柱的批次重現(xiàn)性。從70年代到90年代,在填充材料的標準顆粒尺度(10-3μm)的逐級縮小方面已經(jīng)有穩(wěn)定的改進。80年代后期，高純度B型硅材料(低金屬含量)的引入是一個巨大進步,減少了硅醇的活性，并在批次間的一致性方面有重大改進。現(xiàn)在高純硅的使用是所有現(xiàn)代硅膠基質(zhì)色譜柱的標準。

　　液相色譜仍然是一個高度有活力的領域，在儀器、色譜柱技術、應用等方面有很多創(chuàng)新。醫(yī)藥科學家們zui初將這些新技術應用于研究、開發(fā)和質(zhì)量控制，他們是這項技術的早期采納者，同時也是受益者。UHPLC在研究與開發(fā)領域被快速的接受，并逐漸成為標準的液相色譜平臺，雖然在QC實驗室的應用速度慢一些。新的色譜柱技術可以更快和更有效的分析復雜樣品、手性分子和生物分子。zui后,液相色譜和2-D LC與高分辨率質(zhì)譜聯(lián)用技術的快速進展，已經(jīng)*改變了生命科學的研究，并將會在臨床診斷方面產(chǎn)生更大的影響。這些進展得到了在快速發(fā)展的藥物開發(fā)領域工作的分析化學家的歡迎。

　　液相色譜的另一個重要的好處是其對復雜樣品的分離能力。這方面常常被忽視,在文獻中也很少報道。在合理的時間跨度(~1 h)內(nèi)，400至1000范圍內(nèi)的峰容量(PC)已經(jīng)通過使用液相色譜來證實。峰容量是分辨率為1.0時，色譜圖上可以分辨的色譜峰個數(shù)；通常傳統(tǒng)的HPLC為200左右。有史以來*次,液相色譜可以在單一維度,對復雜的藥品、天然材料、和其他困難樣品基質(zhì)提供更有效的分析。通過兩個應用 (植物提取物和*的消化蛋白質(zhì))來說明Pc>300時，當前液相色譜的高分辨分離能力。

　　液相色譜色譜柱技術的近期進展已經(jīng)被廣泛地綜述(已經(jīng)有很多文獻綜述并討論了HPLC的色譜柱技術的近期進展)?？偨Y了重大行業(yè)使用率較高的，用于提高生產(chǎn)力、穩(wěn)定性、選擇性或保留時間(亞2μm,核殼粒子,混合物,新奇的鍵合反應,HILIC)或?qū)I(yè)應用 (手性化合物或生物分子)的色譜柱。

　　液相色譜的其他優(yōu)勢包括溶劑節(jié)省(5-15倍),增強的質(zhì)量靈敏度(3-10倍)，以及在保留時間(2–3倍)和峰面積(<0.1%RSD)方面的性能。注意，有關液相色譜中UV檢測靈敏度增加的報告往往會產(chǎn)生誤導,因為質(zhì)量敏感度(分析物注入量)主要與柱的空隙體積有關。通常，液相色譜不會增加濃度靈敏度(的一種靈敏度),因為我們不能希望使用小的流通池來增加信噪比，除非延長流通池的路徑長度 (如60毫米)。泵混合而導致的粘性發(fā)熱、基線擾動以及方法轉(zhuǎn)移等潛在問題已經(jīng)有文獻描述，而且這些問題分別也是與特定的儀器相關聯(lián)的。一般來說,這些技術問題已經(jīng)研究得比較清楚了，而且通過選擇合適的系統(tǒng)配置(如混合器體積)能夠很容易地減輕。但是, 由于培訓、與驗證數(shù)據(jù)系統(tǒng)的兼容性和其他方法轉(zhuǎn)移的問題，液相色譜在QC實驗室的應用仍然比較浪費時間。

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