上周五，客戶張老師聯(lián)系我司業(yè)務(wù)員，跟我司業(yè)務(wù)員反應elisa試劑盒相關(guān)問題，張老師在提到實驗中發(fā)現(xiàn)幾個問題，希望我司技術(shù)能給出參考意見。

客戶張老師對于elisa試劑盒在實驗中所遇到的問題，關(guān)于張老師所提出的elisa試劑盒常見問題，我司陳技術(shù)根據(jù)長期Elisa經(jīng)驗這樣作出解答的：

張老師：

1、我看見有的夾心ELISA試劑盒中檢測抗體和捕獲抗體為一種抗體，而不是分別針對待測抗原的不同表位的一對抗體。 

我不理解的地方是：捕獲抗體把抗原上的表位都結(jié)合完了，檢測抗體怎么能與抗原結(jié)合呢？

問題1：正常情況下，雙抗體夾心法中使用的包被抗體和酶標記抗體肯定不是同一個抗體，如果是同一個的話，會有很強的競爭，應該是無法做的。你是怎么知道別人試劑盒中使用的是同一個抗體的呢，這應該是無法了解的呀。

2、在網(wǎng)上可以搜索到有關(guān)夾心ELISA檢測TNF、CEA、IL－2、IL－8等說明書，我發(fā)現(xiàn)它們所用的稀釋液配方都不一樣，差別很大。

TNF-a的稀釋液：PBS 100ml；BSA(牛血清白蛋白) 0.1g。 

IL-6的稀釋液：洗滌液 100ml  BSA(牛血清白蛋白) 0.1g。 

IL-8的稀釋液：洗滌液 100 ml；

PEG(聚乙二醇，MW6000) 3.0g。 

我想知道是根據(jù)什么原則來選擇稀釋液的組成？有沒有可以通用的??？謝謝！

問題2：稀釋液基本上是和所使用的原料有關(guān)，不同的原料組成的檢測相同物質(zhì)的試劑盒所使用的稀釋液就可能不同。

從你提供的數(shù)據(jù)看，IL-6的稀釋液應該只比TNF-a多了個Tween－20而已，差別不是很大。至于選BSA還是PEG那就和原料有很大關(guān)系了。

　　Elisa試劑盒中有任何無法操作及解析的問題均聯(lián)系我司，我們?yōu)槟峁I(yè)的售前，售后意見。