細(xì)胞傳代的操作過程

來源：上海邦景實業(yè)有限公司 2020年04月26日 14:22

1、選擇細(xì)胞：鏡檢細(xì)胞，選擇成長狀態(tài)杰出，細(xì)胞界限明晰，具有立體感，形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細(xì)胞。

2、配制細(xì)胞培養(yǎng)液：按以下配比配制MEM-0.2%LH 培養(yǎng)液100ml 內(nèi)，加入滅活小牛血清10m1，慶大霉素溶液0.3m1，7.5%碳酸氫鈉溶液3ml。（僅供一般參考）。

3、消化細(xì)胞：先用PBS 洗液沖洗細(xì)胞外表1-2 次，每次10m1，棄去洗液，向細(xì)胞瓶內(nèi)加入0.25％胰蛋白酶溶液，每瓶1m1，細(xì)胞瓶平放，使消化液*覆蓋細(xì)胞外表。

4、至細(xì)胞*脫落到胰酶中：每瓶加入10m1 細(xì)胞培養(yǎng)液吹打渙散細(xì)胞，按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中，再加入10m1 細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝，然后補(bǔ)加至所需培養(yǎng)量。

5、加塞，置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2～4 天成片(由細(xì)胞接種濃度決定)。

6、填寫傳代記載。

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