PCR檢測試劑盒基本原理:
通過大量對比某一種細菌或病毒的基因,得到該細菌或病毒共同保守序列,根據該序列設計特異性引物,通過PCR擴增,即可獲得相應大小的片段,以此來檢測該細菌或者病毒的感染/污染狀態(tài)。
PCR檢測試劑盒結構組成:
① 10mM dNTP;
② 5×Taq 聚合酶buffer(包含引物F和R);
③ Taq 聚合酶;
④ 陽性對照DNA;
⑤ 陰性對照DNA;
⑥ 加樣緩沖液;
⑦ 滅菌超純水。
⑧ 常規(guī)PCR檢測試劑盒說明書。
PCR檢測試劑盒操作流程如下:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入pbs 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人aif抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的hrp-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內,孵育60min。
(9)洗板,同(4)?!?/p>
免責聲明
客服熱線: 15267989561(同微信)
加盟熱線: 15267989561(同微信)
媒體合作: 0571-87759945
投訴熱線: 0571-87759942

下載儀表站APP

Ybzhan手機版

Ybzhan公眾號

Ybzhan小程序