原代細胞的取材要求

來源：北京百奧創(chuàng)新科技有限公司 2021年09月15日 10:12

原代細胞取材的基本要求：

　　(1)取材要注意新鮮和保鮮新鮮組織易于培養(yǎng)成功，取材時應盡量在4~6h內(nèi)能制作成細胞，盡快入箱培養(yǎng)，若不能即時培養(yǎng)，應將組織浸泡于培養(yǎng)液內(nèi)，于4℃存放。若組織塊較大，應在清除表面壞死組織、脂肪和結(jié)締組織后，切碎于培養(yǎng)液內(nèi)4℃存放，但時間不能超過24h。對于已切碎的組織或血液、淋巴組織應加入含10%二甲基亞砜的培養(yǎng)基，按細胞凍存方式于液氮中冷凍保存。

　　(2)取材應嚴格無菌所取標本材料應在無菌條件下進行，為了確保無菌，對所取材料若疑有污染的可能，應將所取組織在含高濃度抗菌素(400單位/mL)甚加入適量的兩性霉素B或10%達克寧液的培養(yǎng)液內(nèi)于4℃下存放2小時以上，再用PBS洗2~3次，以確保所取材料無菌。要用無菌包裝的器皿或事先消毒好的帶少許培養(yǎng)液(內(nèi)含400單位/mL抗菌素)的小瓶等便于攜帶的物品來取材，所取材料應避免接觸有毒有害的化學物質(zhì)，如碘、汞等。

　　(3)取材和原代細胞制作時，要用鋒利的器械，如手術(shù)刀或剃須刀片切碎組織，盡可能減少對細胞的機械損傷。

　　(4)要仔細去除所取材料上的血液、脂肪、壞死組織及結(jié)締組織，切碎組織時應避免組織干燥，可在含少量培養(yǎng)液的器皿中進行。

　　(5)取材應注意組織類型、分化程度、年齡等，一般來講，胚胎組織較成熟個體組織容易培養(yǎng)，分化低的較分化高的組織容易生長，腫瘤組織較正常組織容易培養(yǎng)。取材時應盡量選用易培養(yǎng)的組織進行培養(yǎng)。

　　(6)原代細胞取材時要同時留好組織學標本和電鏡標本。對組織的來源、部位、包括供體的一般情況要做詳細的記錄，以備以后查詢。

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