在我們進(jìn)行液相色譜分析時(shí)，有時(shí)會(huì)遇到這樣一個(gè)問題：系統(tǒng)的流路中存在氣泡。

由于氣泡的存在，會(huì)造成色譜圖上出現(xiàn)尖銳的噪聲峰，嚴(yán)重時(shí)會(huì)造成分析靈敏度下降；氣泡變大進(jìn)入流路或色譜柱時(shí)會(huì)使流動(dòng)相的流速變慢或不穩(wěn)定，使基線起伏。

造成上述現(xiàn)象的主要原因有三條：

1.是流動(dòng)相溶液中往往因溶解有氧氣或混入了空氣而形成氣泡；

2.是系統(tǒng)開始工作時(shí)未能將流路中的空氣驅(qū)趕干凈；

3.是在注入樣品時(shí)不注意混入了空氣。

為了避免這類問題的出現(xiàn)，液相色譜實(shí)際分析過程中必須重視：

一、對流動(dòng)相進(jìn)行脫氣處理，常用的脫氣方法有以下幾種：

1.吹氦脫氣法

使用在液體中比空氣溶解度低的氦氣，在0.1Mpa壓力下，以約60ml/min流速通入流動(dòng)相10-15min以驅(qū)除溶解的氣體。此法使用于所有的溶劑，脫氣效果較好，但在國內(nèi)因氦氣價(jià)格較貴，本法使用較少；

2.加熱回流法

此法的脫氣效果較好；

3.抽真空脫氣法

此時(shí)可使用微型真空泵，降壓至0.05-0.07MPa即可除去溶解的氣體。顯然使用水泵連接抽濾瓶和G4微孔玻璃漏斗可一起完成過濾機(jī)械雜質(zhì)和脫氣的雙重任務(wù)。由于抽真空會(huì)引起混合溶劑組成的變化，故此法適用于單一溶劑體系脫氣。對多元溶劑體系應(yīng)預(yù)先脫氣后再進(jìn)行混合，以保證混合后的比例不變。

4.超聲波脫氣法

它是目前實(shí)驗(yàn)室使用泛的脫氣方法，將配制好的流動(dòng)相連同容器一起放入超聲波水漕中脫氣10-20min即可。該方法操作簡便，基本能滿足日常分析的要求。

5.在線真空脫氣法

把真空脫氣裝置串聯(lián)到儲(chǔ)液系統(tǒng)中，并結(jié)合膜過濾器，實(shí)現(xiàn)了流動(dòng)相在進(jìn)入前的連續(xù)真空脫氣。此法的脫氣效果明顯優(yōu)于上述幾種方法，并適用于多元溶劑體系。

二、在液相色譜系統(tǒng)開始工作前，可以用注射器連接恒流泵的排空閥，抽入流動(dòng)相，將流路中的空氣驅(qū)趕干凈。

三、在注入樣品前注意排出樣品注射器中的空氣。