小鼠神經(jīng)干細(xì)胞說明

來源：上海勁馬實驗設(shè)備有限公司 2011年11月23日 17:22

長期以來，中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病一直是困擾人類健康的一大難題。1992年，Reynodls

^【¹^】等從成年小鼠腦紋狀體中分離出能在體外不斷分裂增殖，且具有多種分化潛能的細(xì)胞群，并正式提出了神經(jīng)干細(xì)胞（Neural stem cells, NSCs）的概念，從而打破了認(rèn)為神經(jīng)細(xì)胞不能再生的傳統(tǒng)理論。NSCs的發(fā)現(xiàn)為中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷疾病的治療及其傷后功能重建帶來了曙光。1997年 Mckay將 NSCs的概念總結(jié)為：具有分化為神經(jīng)元、星形膠質(zhì)細(xì)胞及少突膠質(zhì)細(xì)胞的能力，能自我更新并可以提供大量腦組織細(xì)胞^【²^】。隨著 NSCs在醫(yī)學(xué)和研究領(lǐng)域的應(yīng)用逐漸增多，利用穩(wěn)定的 NSCs細(xì)胞株，可以為關(guān)于 NSCs的深入研究包括細(xì)胞的活動、正常與非正常狀態(tài)等，以及體外構(gòu)建神經(jīng)組織代謝性疾病和腦組織損傷的藥物篩選模型，提供可靠的細(xì)胞資源，同時為研究工作節(jié)約寶貴的時間和培養(yǎng)費用。

本公司培養(yǎng)出品的取自 SPF級的孕齡 14天的 ICR小鼠（*軍事醫(yī)學(xué)*實驗動物中心，許可證號：SCXK-（軍）2007-004）胚胎大腦的 SVZ區(qū)，用 DFR03神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)基（貨號： M1024）進(jìn)行原代培養(yǎng)。傳代擴(kuò)增至第二代凍存（DIV15），每支含 1×10⁶個細(xì)胞。細(xì)胞經(jīng)檢測，鏡下成球形生長（如圖 1所示）；單克隆實驗及 Brdu染色證明其具備良好的增殖能力（如圖 2,圖 3所示）；免疫熒光化學(xué)實驗表明，該細(xì)胞能表達(dá) NSCs的標(biāo)志性蛋白 nestin（如圖 4所示）；5%胎牛血清誘導(dǎo)可分化稱為神經(jīng)元（neuron）、星形膠質(zhì)細(xì)胞（astrocyte）（如圖 5所示）。品名：ICR小鼠神經(jīng)干細(xì)胞貨號：C3016規(guī)格：1×10⁶cells/管產(chǎn)品特性：

1. SPF級的孕齡 14天的 ICR小鼠胚胎大腦的 SVZ區(qū)

2. 在特定的已知成分的無血清培養(yǎng)基可自我更新，倍增時間小于 48小時。

3. 在體外具有多分化潛能

4.穩(wěn)定的正常二倍體細(xì)胞。質(zhì)量控制：本產(chǎn)品經(jīng)過了細(xì)菌、真菌、霉菌、支原體檢測。運輸與保存：

本品使用 10%DMSO凍存液冷凍，采用干冰保存運輸，收到細(xì)胞后，如果不立即復(fù)蘇，請將細(xì)胞放入液氮中保存待用。切勿置于室溫下，以免造成 DMSO損傷。細(xì)胞復(fù)蘇方法：

取出凍存管后，投入 37℃水浴中，震蕩解凍，酒精消毒管壁外側(cè)后，將其轉(zhuǎn)入超凈臺中，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至離心管中，加入 5mlDFR03神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)基， 1000轉(zhuǎn)，離心 5分鐘，棄去上清，在加入 5mlDFR03神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)基，轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。產(chǎn)品承諾：

實驗室研究結(jié)果表明，本株 ICR小鼠 SVZ來源的 NSCs體外增殖 10代后，仍能夠保持神經(jīng)干細(xì)胞良好的特性。建議使用本公司配套的培養(yǎng)基和正確的培養(yǎng)方法來解凍、傳代，以此保證細(xì)胞具備良好的增殖和分化能力。使用：

本產(chǎn)品只提供給進(jìn)一步的科研使用，不可應(yīng)用于臨床。附圖（供參考）

圖 1.體外培養(yǎng) 15天（ DIV15），第二代 NSCs在培養(yǎng)基中懸浮成球生長圖 2在 1%膠原水凝膠中 NSCs由單個細(xì)胞形成克隆球

圖 3.BrdU熒光染色

圖 4.原代 NSCs的 nestin染色陽性

圖 5.由 NSCs誘導(dǎo)分化得到的神經(jīng)元（β -tubulin III陽性 ,綠色）和星形膠質(zhì)細(xì)胞（ GFAP陽性，紅色）

參考文獻(xiàn)

【1】 Reynolds BA, Weiss S. Generation of neurons and astrocytes from isolated cells of the adult mammalian central nervous system. Science,1992, 255（5052）:1707-1710.

【2】 McKay R. Stem cells in the central nervous system. Science, 1997,276（5309）:66-71.

上海勁馬實驗設(shè)備有限公司是一家專業(yè)從事免疫學(xué)、細(xì)胞學(xué)、化學(xué)試劑代理商，現(xiàn)在本公司可代理美國ATCC細(xì)胞、美國Sciencell細(xì)胞，美國CHI細(xì)胞，同事我公司也有種類齊全的傳代細(xì)胞，所有細(xì)胞都附有傳代情況及培養(yǎng)說明。我公司現(xiàn)在與美國公司合作，接受客戶原代細(xì)胞定做，只限于人、小鼠、大鼠正常組織及腫瘤組織細(xì)胞，細(xì)胞zui小量100萬個，歡迎有需要的客戶前來咨詢。

本公司長期經(jīng)營科研elisa試劑盒，代理品牌有美國R&D,IBL,bendor等品牌，同時，本公司也自己生產(chǎn)各類分裝elisa試劑盒，均采用進(jìn)口試劑，質(zhì)量保證，價格比原裝優(yōu)惠很多，實驗效果堪比*，本公司也提供為客戶代測服務(wù)，提供技術(shù)指導(dǎo)，歡迎廣大客戶前來咨詢。

本公司：：何

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