凝膠過(guò)濾層析（SEC）的蛋白純化方法是怎樣的呢？

凝膠過(guò)濾層析又稱(chēng)為分子篩或排阻層析，是利用蛋白分子大小和形狀的不同進(jìn)行分離。以惰性細(xì)顆?；|(zhì)作為層析柱填料，由于液體的擠壓，大分子物質(zhì)因無(wú)法進(jìn)入細(xì)顆粒的微孔中而隨著液體從細(xì)顆粒間的縫隙流出，而小分子因進(jìn)入細(xì)顆?；|(zhì)內(nèi)微孔運(yùn)動(dòng)速度慢，保留時(shí)間長(zhǎng)，比大分子物質(zhì)流出緩慢而分離。凝膠過(guò)濾的層析樣品不與層析柱料結(jié)合，因此，緩沖液成分不直接影響分辨率。

凝膠層析的固定相是凝膠。凝膠是一種不帶電荷的具有三維空間多孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的物質(zhì)，凝膠的每個(gè)顆粒內(nèi)部都具有很多細(xì)微的小孔，如同篩子一樣。

特點(diǎn)：

1.通常多用于最后一步純化的有效方法；

2.整個(gè)SEC過(guò)程都只使用一種溶劑；

3.低聚物、去折疊的蛋白分子和缺失蛋白都可以在逐漸置換緩沖液的過(guò)程中與結(jié)構(gòu)完整的天然蛋白質(zhì)分子分離開(kāi)；

4.SEC可使用溶劑種類(lèi)更多，所用的緩沖鹽也更少，比透析的緩沖液置換過(guò)程更快更可靠；

5.介質(zhì)的類(lèi)型和柱子的長(zhǎng)度對(duì)蛋白質(zhì)的SEC分離的分辨率有很大的影響；

6.根據(jù)待分離蛋白質(zhì)分子的分子量和分離條件市場(chǎng)上有很多種排阻范圍的介質(zhì)可選。

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