乳制品中三聚氰胺的液相色譜檢測法

 

 
  三聚氰胺（Melamine）是一種重要的三嗪類含氮雜環(huán)有機(jī)化工原料，主要用于生產(chǎn)三聚氰胺-甲醛樹脂，廣泛用于木材加工、塑料、涂料、造紙、紡織、皮革等行業(yè)，為白色晶體。三鹿奶粉事件引發(fā)了對三聚氰胺檢測的廣泛關(guān)注，*和*相繼發(fā)布了《原料乳與乳制品中三聚氰胺檢測方法》（GB/T22388-2008）和《原料乳中三聚氰胺快速檢測 液相色譜法》（GB/T22400-2008）的國家標(biāo)準(zhǔn)。本文參考了以上標(biāo)準(zhǔn)并進(jìn)行配制條件優(yōu)化，建立了，前處理簡單，檢測限、精密度、重現(xiàn)性以及回收率均符合國家標(biāo)準(zhǔn)。

  1   實(shí)驗(yàn)部分
  1.1 儀器與試劑
  501-HPLC液相色譜儀（含UV501紫外-可見檢測器1臺，P501高壓恒流泵1臺，杭州賽析科技有限公司）；DT-230A色譜柱溫箱；FA2004分析天平（上海舜宇恒平科學(xué)儀器有限公司）；TGL-16G-A離心機(jī)（上海安亭科學(xué)儀器廠）；三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)品（>99%，上海安譜）；辛烷磺酸鈉（色譜純，北京百靈威）；磷酸（分析純）、乙腈（色譜純，美國Tedia）、純凈水（杭州娃哈哈）。
  1.2 標(biāo)準(zhǔn)品溶液配制
  精密稱取三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)品，溶于50％的甲醇水溶液，配制稱1.422mg/ml的標(biāo)準(zhǔn)儲備液，于4℃避光保存。根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要，用流動相逐級稀釋成適當(dāng)濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作液。
  1.3 樣品前處理
  稱取2g酸奶樣品與50ml具塞離心管中，加入乙腈：水＝50：50混合溶液15ml，充分混勻后超聲提取15min。取提取液250ul，加入0.1mol/l鹽酸750ul，混勻，以12000r/min離心5min，取上清液，0.22um濾膜過濾，作為HPLC測定溶液。
  1.4 色譜條件：
  色譜柱：Globalsil C18 5μm（ID4.6mm×250mm）
  流動相：乙腈/緩沖鹽=15/85（緩沖鹽：10mM辛烷磺酸鈉水溶液，含0.1％磷酸）
  流速：1.0ml/min
  波長：240nm
  溫度：40℃
  進(jìn)樣量：20μl

  2   實(shí)驗(yàn)結(jié)果
  2.1 精密度實(shí)驗(yàn)
  取濃度為0.569μg/ml三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)工作液，按上述色譜條件，連續(xù)進(jìn)樣5次，以各成分峰面積計(jì)算RSD（%），所得結(jié)果如表1所示：保留時(shí)間相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）為0.23％，峰面積RSD為0.57％。
                                                         表1 精密度實(shí)驗(yàn)

                                  圖1 三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)品

                                圖2 空白酸奶樣品

                                   圖3 加酸奶樣品

  相關(guān)資料：飼料中三聚氰胺液相色譜儀