稀釋水的質(zhì)量對BOD5測定結(jié)果的準確性具有重要意義。因此，要求稀釋水空白5天的耗氧量必須小于0.2mg/L，小于0.1mg/L，接種后的稀釋水5日耗氧量應(yīng)在0.3～1.0mg/L之間。

保證稀釋水水質(zhì)的關(guān)鍵是控制有機物的含量和抑制微生物繁殖的物質(zhì)的含量，因此，用蒸餾水作為稀釋水，不宜用離子交換樹脂制成的純水作為稀釋水，因為去離子水往往含有從樹脂中分離出來的有機物。如果制備蒸餾水的自來水中含有一些揮發(fā)性有機化合物，為防止它們殘留在蒸餾水中，蒸餾前應(yīng)進行預(yù)處理以去除有機化合物。在金屬蒸餾器制備的蒸餾水中，應(yīng)注意檢查其中金屬離子的含量，以免發(fā)生抑制微生物的繁殖和代謝的情況，影響B(tài)OD5測定結(jié)果的準確性。

如果使用的稀釋水因有機物不符合要求，可加入適量曝氣池接種液后，在室溫或20℃條件下保存一定時間，即可消除。接種量以5d耗氧量0.1mg/L左右為原則。為了防止藻類繁殖，必須在暗室中進行儲存。如果儲存后的稀釋水中有沉淀物，只能使用上清液，過濾去除沉淀物。

為保證稀釋水中的溶解氧接近飽和，必要時可用真空泵或水射器吸入凈化空氣，也可用微型空壓機注入凈化空氣， 并且可以用氧氣瓶引入純氧，然后將充氧的稀釋水放入20℃的培養(yǎng)箱中一定時間，讓溶解氧達到平衡。冬季放置在較低室溫的稀釋水可能含有過多的溶解氧，夏季高溫季節(jié)則相反。因此，當室溫與20℃有明顯差異時，必須在培養(yǎng)箱中放置一段穩(wěn)定的時間，使其與培養(yǎng)環(huán)境中的氧分壓平衡。