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酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)操作技巧匯總

來源:上海撫生實業(yè)有限公司   2025年05月19日 16:21  

酶聯(lián)免疫吸附試驗(Enzyme-Linked ImmunosorbentAssays,ELISA)以來,由于ELISA具有快速、敏感、簡便、易于標(biāo)準(zhǔn)化等優(yōu)點,使其得到迅速的發(fā)展和廣泛應(yīng)用。


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  1、操作前應(yīng)對實驗的物理參數(shù)有充分的了解,如環(huán)境溫度(保持在18 C~25℃)、反應(yīng)孵育溫度和孵育時間、洗滌的次數(shù)等,要先查看水育箱溫度,是否符合要求。
 
  2、正確使用加樣器加樣器應(yīng)垂直加入標(biāo)本或試劑,避免刮擦包被板底部。加樣過程中避免液體外濺,血清殘留在反應(yīng)孔壁上,加樣器吸頭要清洗干凈,避免污染,加樣次序要與說明書一致,否則可導(dǎo)致結(jié)果錯誤,實驗重復(fù)性差。
 
  3、手工洗板加洗液時沖擊力不要太大,洗滌次數(shù)不要超過說明書推薦的洗滌次數(shù),洗液在反應(yīng)孔內(nèi)滯留的時間不宜太長。不要使洗液在孔間竄流,造成孔問污染,導(dǎo)致假陰性或假陽性。
 
  4、要保證加液量一致 我們在使用時感覺滴瓶加液不如加樣器好,滴瓶不易控制加液量不準(zhǔn),造成顯色不統(tǒng)一,判斷錯誤。
 
  5、顯色液量不可過多 加樣的工作環(huán)境不能處于陽光直射的環(huán)境下,加顯色系統(tǒng)后要避光反應(yīng),顯色液量不能過多,以免顯色過強。


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