實(shí)驗(yàn)操作步驟：  

a．采用認(rèn)可的方案處死嚙齒動(dòng)物。

b．立即在無(wú)菌超凈臺(tái)內(nèi)用70％乙醇擦洗整個(gè)動(dòng)物。

c．用無(wú)菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用無(wú)菌鑷子將皮膚扯向后腿。

d．用另一無(wú)菌的剪刀和鑷子切開(kāi)腹部，取出含有胚胎的子宮，置于無(wú)菌的培養(yǎng)皿上。

e．剔除胚胎周圍的包膜，將胚胎放于無(wú)菌的含有無(wú)菌PBS的100ml燒杯中。

f．漂洗胚胎，去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品介紹：

名稱    大鼠脂肪細(xì)胞

2.組織來(lái)源：脂肪組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介：

大鼠脂肪細(xì)胞分離自脂肪組織；脂肪組織主要由大量群集的脂肪細(xì)胞構(gòu)成，聚集成團(tuán)的脂肪細(xì)胞由薄層疏松結(jié)締組織分隔成小葉；貯存的脂肪，在需要時(shí)可迅速分解成甘油和脂肪酸，經(jīng)血液輸送到各組織以供利用。它們影響胰島素敏感性、血壓水平、內(nèi)皮功能、纖溶活動(dòng)及炎癥反應(yīng)，參與多種重要病理生理過(guò)程；脂肪組織已由過(guò)去單純作為能量?jī)?chǔ)存的器官而成為一個(gè)極其重要的內(nèi)分泌系統(tǒng)。脂肪細(xì)胞分為白色脂肪細(xì)胞和褐色（棕色）脂肪細(xì)胞，常呈白色，在嬰幼兒期大量增殖，到青春期數(shù)量達(dá)到，此后數(shù)量一般不再增加。細(xì)胞內(nèi)含有大量富含脂肪的小泡，稱為脂質(zhì)泡，富含光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。此外，還有一種褐色脂肪細(xì)胞，在動(dòng)物體內(nèi)主要存在于肩胛骨間、頸背部、腋窩、縱隔及腎臟周圍，含有高度團(tuán)縮的褐色脂肪，作用是將脂質(zhì)分解產(chǎn)熱，調(diào)節(jié)體內(nèi)脂質(zhì)比例。

5.方法簡(jiǎn)介：

()實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠脂肪細(xì)胞采用消化法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè)：

()實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠脂肪細(xì)胞經(jīng)油紅O染色檢測(cè)，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

產(chǎn)品貨號(hào)CM-R199

換液頻率每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性貼壁

細(xì)胞形態(tài)梭形、多角形

傳代特性屬于終末分化細(xì)胞；屬于不增殖細(xì)胞群

消化液0.25%

培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

處理方法：

收到細(xì)胞后，檢查外包裝是否完整，細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好。如有破損漏液等問(wèn)題，請(qǐng)即時(shí)聯(lián)系。并進(jìn)行以下操作：

1. 75%酒精棉球擦拭T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶外部。

2. 將細(xì)胞放入37度培養(yǎng)箱中預(yù)溫3-4小時(shí)后再做處理，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

3. 預(yù)熱培養(yǎng)基（含10%胎牛血清，1%雙抗）。

4. 顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存（40×,100×,200×各一張）。

5. ①若細(xì)胞密度較小，無(wú)菌操作，去掉培養(yǎng)基。每瓶添加第四步中準(zhǔn)備的5-6ml培養(yǎng)基。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細(xì)胞密度達(dá)到80%以上，進(jìn)行傳代。

注意事項(xiàng)：

1. 正式實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)選取幾個(gè)樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)，以優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件，取得最佳實(shí)驗(yàn)效果。

2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，

避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。

3. 禁止與其他品牌的試劑混用，否則會(huì)影響使用效果。

4. 樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。

5. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗

并*清除殘留清潔劑。

6. 實(shí)驗(yàn)后完成后所有樣品及接觸過(guò)的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：

1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞

在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。

3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性

通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。

4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄

采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備

記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。

5.研究的范圍比較廣泛

應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；

適用的對(duì)象范圍廣，從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物，一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。

6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)

可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。

1瓶 U27細(xì)胞株 U27 低溫運(yùn)輸和保存

沙門氏菌顯色培養(yǎng)基(第二代)  1000ml

100mg 遺傳 G-418 Sulfate (Geneticin) 4℃保存

50T 紅薯內(nèi)源基因PCR檢測(cè)試劑盒  低溫運(yùn)輸，-20℃保存

30µL 植物Actin小鼠單抗 Plant Actin Mouse MAb -20℃保存

結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂（VRBA） Violet Red Bile Agar 250g

2mL 巰基磁珠  Magnetic beads,Sulfydryl 4℃密閉、豎直保存

2 ug?嵌?L?

大鼠脂肪細(xì)胞無(wú)菌生理鹽水管（內(nèi)附采樣棉簽） 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：10ml*20支/包 豬基質(zhì)金屬蛋白9(MMP-9)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

Hanks氏病毒保存液（pH7.4-7.6） 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：3ml*36支/盒 豬基質(zhì)金屬蛋白2/明膠A(MMP-2/Gelatinase A)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

半固體運(yùn)送培養(yǎng)基 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：40ml*10 豬肌酸激同工MB(CK-MB)免疫試劑盒*直銷

cary-blair運(yùn)送培養(yǎng)基（液體）（含拭子） 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：3ml*20 豬肌酸激(CK)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

cary-blair運(yùn)送培養(yǎng)基（液體） 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：10ml*20支 豬肌紅蛋白(MB)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

VTM運(yùn)送培養(yǎng)基（） 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：5ml×20支/盒 豬肌U型酸激,線粒體(CKMT1)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

液體菌種保存管（副溶）（不含瓷珠） 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：1.4ml*50支 豬饑餓激素(GHRL)免疫試劑盒*直銷

無(wú)菌水樣采集袋 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：10只/袋*10/箱 豬活性氧(ROS)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

無(wú)菌采樣袋（45cm*55cm） 英文名稱：Sterile Homogeneous Bag 產(chǎn)品規(guī)格：50個(gè)/包 豬活化蛋白C(APC)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

無(wú)菌采樣袋/均質(zhì)袋（32cm*20cm）（帶壓條） 英文名稱：Sterile Homogeneous Bag 產(chǎn)品規(guī)格：100個(gè)/包 豬黃體生成素(LH)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)