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膀胱平滑肌細胞

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  • 型號
  • 品牌其他品牌
  • 所在地上海市
  • 更新時間2022-05-16
  • 廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
  • 入駐年限第11年
  • 實名認證已認證
  • 產(chǎn)品數(shù)量9953
  • 人氣值436113
產(chǎn)品標簽

膀胱平滑肌細胞

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上海谷研實業(yè)有限公司主要從事免疫學(xué)、分子生物學(xué)和常規(guī)生化試劑的銷售,主營產(chǎn)品:生化試劑、試劑盒、ELISA試劑盒、抗體、重組蛋白、生化檢測試劑盒、分光光度法檢測試劑盒、熒光定量PCR檢測試劑盒、細胞株、原代細胞、細胞培養(yǎng)基、標準溶液產(chǎn)品。銷售進口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細胞、BD公司、GE公司產(chǎn)品。    


公司客戶遍布大學(xué)、研究所、醫(yī)院、衛(wèi)生、商品檢驗檢疫、制藥公司、生物技術(shù)公司和食品工業(yè)等單位。


公司主推品牌: (進口、國產(chǎn)) Amresco 、Sigma、 Peprotech 、Corning 、BD Faclon 、Axygen、 Invitrogen、 Qiagen、 Hyclone 、Uscnlife、 Wako 、SantaCruz、sciencell、Gibco、R&D、Linco、Amersham、Millipore。

 

 

 

 

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貨號GOY-01X0936
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52438-12-7異丁酰紫草 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
棗仁對照藥材 規(guī)格: 1g
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76494-51-4川芎嗪
膀胱平滑肌細胞 產(chǎn)品詳情

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:

1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。

2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。

二.細胞處理:

1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

公司細胞現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務(wù),同時提供最新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。

產(chǎn)品名稱

膀胱平滑肌細胞

規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

分類

原代細胞

貨號

GOY-01X0936

商品介紹:

名稱 膀胱平滑肌細胞

2.組織來源:膀胱組織

3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介:

人膀胱平滑肌細胞分離自膀胱組織;膀胱是主要由平滑肌細胞組成的中空器官,膀胱平滑肌的舒張和收縮使得膀胱分別儲存和排出尿液。膀胱平滑肌細胞表型的調(diào)控和可誘導(dǎo)一氧化氮合酶的表達與多種病理狀況有關(guān),包括膀胱功能障礙。研究表明,組織缺氧抑制膀胱平滑肌細胞的增殖,膀胱平滑肌細胞的分化依賴于膀胱上皮細胞釋放的因子。膀胱平滑肌細胞外基質(zhì)的分泌表型可通過細胞所經(jīng)歷的機械變形頻率而改變。平滑肌是許多疾病中的共同路徑,因此,了解在疾病發(fā)生及持續(xù)過程中平滑肌怎樣變化,這是治療方法取得進展的重要一步。膀胱壁由三層組織組成,由內(nèi)而外為黏膜層、肌層和外膜。其中,肌層主要由平滑肌構(gòu)成。膀胱平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數(shù)細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網(wǎng)狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點。體外培養(yǎng)膀胱平滑肌細胞不僅為組織工程膀胱、尿道提供種植細胞的必要手段,也是研究平滑肌瘤的基礎(chǔ)與前提。

5.方法簡介:

()實驗室分離的人膀胱平滑肌細胞采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

()實驗室分離的人膀胱平滑肌細胞經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

產(chǎn)品貨號CM-H069

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態(tài)成纖維細胞樣

傳代特性可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳

消化液0.25%

培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO2,5%

使用方法:

收到細胞后,請按照以下方法進行操作。

1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。

3. 細胞傳代

1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;

2) 添加0.125%消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養(yǎng)液終止消化;

3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代,然后補充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

4) 待細胞*貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。

 

培養(yǎng)操作:

1)復(fù)蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;

1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。

2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。

3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
圖片13.jpg

對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

100mL CAPS Buffer,0.5M,pH10.0  CAPS Buffer,0.5M,pH10.0  常溫保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Occludin

40次 miRNA PAGE膠回收試劑盒 miRNABACK 4℃保存 0.156-10 ng/mL 人細絲增強子1(EF1)ELISA試劑盒

2 ug pGL4.29[Luc2P/CRE/Hygro] pGL4.29[Luc2P/CRE/Hygro] 低溫運輸,-20℃保存 0.156-10 ng

膀胱平滑肌細胞無菌采樣袋(12cm*18cm)(帶壓條) Aseptic Sampling Bag 100個/包

5mL 骨骼肌細胞生長因子 Growth Factor For Cell Culture -20℃保存

100g 甜菜堿鹽酸鹽 Betaine Hydrochloride 室溫保存

GYP白亞瓊脂培養(yǎng)基 GYP Medium 250g

80KU DNA ,Ⅱ型 Deoxyribonuclease Ⅱ(Porcine Spleen) -20℃保存

100mL Bicine Buffer,0.5M,pH8.5   Bicine Buffer,0.5M,pH8.5   常溫保存

1g  B12 Vitamin B12 4℃避光保存

2 ug pYr-AdShuttle- 1 pYr-AdShuttle- 1 低溫運輸,-20℃保存

遠藤氏瓊脂 Endo Agar 250g

500mg 氯化四氮唑蘭 NBT (Nitroblue Tetrazolium Chloride) -20℃保存

500mL Phosphate Buffered Saline Dulbecco’s,10X  Phosphate Buffered Saline Dulbecco’s,10X  常溫保存

ARA24  雄激素受體相關(guān)蛋白24抗體 規(guī)格: 0.2mlRabbit Anti-horse IgM/Cy3  Cy3標記的兔抗馬IgM 規(guī)格: 0.1ml

 


關(guān)鍵詞:培養(yǎng)箱 顯微鏡
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