公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷！
名稱 | SW480 [SW-480] (人結(jié)腸癌細胞) (STR鑒定正確) |
別稱 | SW-480; SW 480; SW480E |
種屬 | 人類 |
年齡（性別） | 男性，50歲 |
組織來源 | 直腸；結(jié)直腸腺癌 |
生長特性 | 貼壁細胞 |
細胞形態(tài) | 上皮細胞樣 |
背景描述 | SW480 [SW-480]細胞源自原位直腸腺癌，和SW620細胞源自同一病人一年后的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。CSAp和直腸抗體3陰性；角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性。p53基因第273位密碼子的G→A突變引起Arg→His替代，309位密碼子的C→T突變導致Pro→Ser替代。細胞p53蛋白表達水平提高，癌基因c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、myb、sis和fos的表達呈陽性，癌基因N-myc的表達未做檢測。SW480 [SW-480]細胞不表達細胞溶解酶，一種與腫瘤入侵相關(guān)的金屬蛋白酶。有報道稱，SW480 [SW-480]細胞表達GM-CSF。SW480 [SW-480]細胞ras原癌基因的12位密碼子有一個突變，可以用作PCR法檢測該突變的陽性對照。1978年11月，A·Leibovitz將其提交給ATCC時已傳代至第91代。 |
生物安全等級 | 1 |
生長培養(yǎng)基 | Leibovitz's L-15＋10% FBS＋1% P/S |
推薦傳代比例 | 1:2-1:4 |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
倍增時間 | ~30-50小時 |
凍存條件 | 凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 |
培養(yǎng)條件 | 氣相：空氣，100% 溫度：37℃ |
致瘤性 | Yes. Tumors developed within 21 days at 100% frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 1×10^7 cells. |
受體表達情況 | epidermal growth factor (EGF) |
基因表達情況 | carcinoembryonic antigen (CEA) 0.7 ng/10^6 cells/10 days; keratin; transforming growth factor beta, myc+; myb+ ; ras+; fos+; sis+; p53+; abl -; ros -; src -, HLA A2, B8, B17; Blood Type A; Rh+, The cells are positive for keratin by immunoperoxidase staining., The line is positive for expression of c-myc, K-ras, H-ras, N-ras, myb, sis and fos oncogenes. |
保藏機構(gòu) | ATCC; CCL-228 DSMZ; ACC-313 ECACC; 87092801 |
細胞傳代：
1. 試驗準備：200ul/1mlTip 頭各一盒(以上物品均需高壓滅菌)，酒精棉球，廢液缸，試管架，微量移液器，記號筆，培養(yǎng)皿，離心管。
2. 棄掉培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基，用 1ml 的 PBS 溶液洗滌兩次。
3. 用 Tip 頭加入 1ml Trypsin 液，消化 1 分鐘(37℃，5%CO2 )。用手輕拍培養(yǎng)瓶壁，觀察到細胞從壁上脫落下來為止。
4. 加入 1ml 的含血清培養(yǎng)基終止反應。
5. 用 Tip 頭多次吹吸，使細胞分散開。
6. 將培養(yǎng)液裝入離心管中，1000rpm 離心 5min。
7. 用培養(yǎng)液重懸細胞，細胞計數(shù)后選擇 0.8X106 個細胞加入一個 35mm 培養(yǎng)皿。
8. 將合適體積培養(yǎng)液加入離心管中，混勻細胞后輕輕加入培養(yǎng)皿中，使其均勻分布。
9. 將培養(yǎng)皿轉(zhuǎn)入 CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，第二天轉(zhuǎn)染。
細胞轉(zhuǎn)染：
1. SW48人結(jié)腸腺癌細胞轉(zhuǎn)染試劑的準備
① 將 400ul 去核酸酶水加入管中，震蕩 10 秒鐘，溶解脂狀物。
② 震蕩后將試劑放在－20 攝氏度保存，使用前還需震蕩。
2. 選擇合適的混合比例(1：1－1：2/脂質(zhì)體體積：DNA 質(zhì)量)來轉(zhuǎn)染細胞。在一個轉(zhuǎn)染管中加入合適體積的無血清培養(yǎng)基。加入合適質(zhì)量的 MyoD 或者 EGFP 的 DNA，震蕩后在加入合適體積的轉(zhuǎn)染試劑，再次震蕩。
細胞培養(yǎng)實驗基本操作：
①進無菌室前要洗手，按規(guī)定穿隔離衣。開始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。
②操作者動作要輕，安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應在火焰近處并經(jīng)過燒灼進行。但要注意，金屬器械不能在火焰中長時間燒灼，以防退火；燒過的器械要冷卻后才能使用；已吸過培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼，因殘留在吸管內(nèi)的培養(yǎng)液成分如蛋白質(zhì)等燒焦后會產(chǎn)生有害物質(zhì)，吸管再用時會將其帶到培養(yǎng)液中；膠塞、橡皮乳頭及塑料的細胞培養(yǎng)用品過火焰是也不能時間太長，以免燒焦產(chǎn)生有毒氣體，危害培養(yǎng)細胞，同時塑料細胞培養(yǎng)用品也會產(chǎn)生變形影響使用。
③使用培養(yǎng)液前不宜過早開瓶，開瓶后的培養(yǎng)液應保持斜位，避免直立，以防止下落細菌的污染。不再使用的培養(yǎng)液應立即封閉瓶口，培養(yǎng)的細胞在處理之前勿過早暴露在空氣中。
④操作時盡量不要談話，咳嗽以防止來自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。
⑤吸取培養(yǎng)液、細胞懸液時，應專管專用，一旦發(fā)現(xiàn)吸管口接觸了手和其他污染物品應棄去，以防止污染擴大或造成培養(yǎng)物之間的交叉污染。
⑥操作完畢后應整理好工作臺面，用消毒水浸泡的紗布擦拭臺面；防止細胞交叉污染：所有從別處轉(zhuǎn)來的或是自己所建的細胞系都要早期留有的充足的凍存儲備，一旦懷疑發(fā)生交叉污染，可做細胞遺傳學方面的鑒定，如發(fā)現(xiàn)原有的細胞遺傳物發(fā)生改變，可以復蘇早期凍存的細胞使用。
血藍蛋白偶聯(lián)物 | 腎綜合癥出血熱病毒PCR檢測試劑盒 |
甲型流感（）病毒H9亞型RT-PCR試劑盒 | 糞卟啉原氧化meiELISA試劑盒 |
人補體C1q腫瘤壞死因子相關(guān)蛋白1(C1QTNF1/CTRP1)試劑盒ELISA | 防御suβ125ELISA試劑盒 |
人Ephrin-B2(EFNB2)檢測試劑盒elisa | 角化不良蛋白ELISA試劑盒 |
人血管性血友病因子/瑞斯托霉su輔因子(VWF)ELISA試劑盒 | 芳乙酰胺去乙酰化meiELISA試劑盒 |
人α2-HS糖蛋白(AHSG)抗體試劑盒ELISA | alpha-1能受體ELISA試劑盒 |
腦表達X連鎖蛋白4封閉多肽 | 彎曲桿菌PCR試劑盒 |
p21活化蛋白激meiARHG7封閉多肽 | 腦胞內(nèi)原蟲屬通用·PCR檢測試劑盒 |
DNA甲基轉(zhuǎn)移mei1封閉多肽 | 奮森疏螺旋體PCR試劑盒 |
整合suαX封閉多肽 | 乙型肝炎病毒PCR檢測試劑盒 |
DNA結(jié)合抑制因子1封閉多肽 | 牛肺線蟲PCR試劑盒 |
鋅指蛋白186封閉多肽 | SW48人結(jié)腸腺癌細胞腦膜炎奈瑟菌通用型PCR檢測試劑盒 |
6號染色體開放閱讀框72封閉多肽 | 耐青霉su肺炎鏈球菌PCR試劑盒 |
鈣/鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激mei4封閉多肽 | 牛赤羽病毒RT-PCR試劑盒 |
泌乳升高蛋白1封閉多肽 | 牛附紅細胞體（牛嗜血支原體）PCR試劑盒 |
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