【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。避免給您帶來(lái)不必要的損失,請(qǐng)仔細(xì)閱讀購(gòu)買說(shuō)明!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測(cè)方法 | 貨號(hào) |
100管/96樣 | 微量法 | GOY-01S6667 |
商品介紹
測(cè)定意義 低密度脂蛋白為血清蛋白之一,主要由肝臟合成,與冠心病的發(fā)生和動(dòng)脈粥樣硬化損傷呈正相關(guān),是脂類疾病分類和風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)的一個(gè)重要指標(biāo)。 測(cè)定原理 用沉淀劑分離血清中的低密度脂蛋白,利用酯酶催化酯水解生成游離和游離脂肪酸,從而把酯轉(zhuǎn)化為FC;進(jìn)一步利用氧化酶催化FC氧化,生成△4-膽甾烯酮和H2O2;再利用過(guò)氧化物酶催化H2O2氧化4-氨基林和酚,生成紅色醌類化合物;在500nm有特征吸收峰。 需自備的儀器和用品 離心機(jī),恒溫水浴鍋、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
所需的儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測(cè)定:
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)!
1、樣本制備
① 組織樣本:
取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行
勻漿(或使用各類常見(jiàn)勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測(cè)液。
【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進(jìn)行提取
② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本:
先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL
提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);
12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。
【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10
4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測(cè);若渾濁,離心后取上清檢測(cè)。
注意事項(xiàng):
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。
2、對(duì)照管只需要做一管。
3、若對(duì)照管吸光值大于 1,建議將試劑二用蒸餾水稀釋 7 倍后使用(10μL 試劑二原液+60μL蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管,對(duì)照管數(shù)值在什么范圍?對(duì)照管的范圍是 0.4-1。對(duì)照管吸光值過(guò)低可能是(1)試劑二或試劑四沒(méi)有現(xiàn)配現(xiàn)用;
(2)沒(méi)有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間 30min可以延長(zhǎng)到 40min)。對(duì)照管吸光值過(guò)高可能是試劑二未按操作說(shuō)明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般
將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋 10倍后再測(cè),通??梢允箿y(cè)定正常。
乙酸乙酯 ACS 光譜級(jí), ≥99.5% 98%Anti-OPCML /FITC 熒光素標(biāo)記樣物質(zhì)結(jié)合蛋白/粘附分子樣蛋白抗體IgG
乙酸乙酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.9% (GC)厚樸酚 分析標(biāo)準(zhǔn)品,>98%Anti-mu Opioid receptor/FITC 熒光素標(biāo)記µ-型受體抗體IgG
乙酸乙酯 用于蛋白測(cè)序分析, ≥99.5%厚樸酚 ≥98% (HPLC)Anti-Phospho-delta Opioid Receptor (Ser363) /FITC 熒光素標(biāo)記化D型受體抗體IgG
乙酸乙酯 農(nóng)殘級(jí)蛇床子素 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%Anti-Phospho-mu Opioid Receptor (Ser375) /FITC 熒光素標(biāo)記化µ-型受體抗體IgG
乙酸乙酯 for LC-MS, ≥99.9% (GC)蛇床子素 99%Anti-OPG /FITC 熒光素標(biāo)記骨保護(hù)蛋白/護(hù)骨素抗體IgG
乙酸乙酯 用于生物工程, ≥99.9%鄰酚磺酸 98%Anti-OPGL/RANKL/CD254 /FITC 熒光素標(biāo)記骨保護(hù)蛋白配體抗體IgG
鹽酸 AR,36-38%茜素 97%Anti-RANK/TNFRSF11A/CD265/FITC 熒光素標(biāo)記核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB受體抗體IgG
30%) AR2,6-二氯苯 98%Anti-OPN/FITC 熒光素標(biāo)記骨橋蛋白抗體IgG
血清低密度脂蛋白(LDLC)微量法檢測(cè)試劑盒3,5-二 97%合胞素1抗體
1,4-二 99%結(jié)腸癌抗原16抗體
1,2-二溴丁烷 98%化Src原癌因抗體
代二乙酯 純度 ≥90%STAC2蛋白抗體
N,N-二乙酰 99%轉(zhuǎn)錄因子SOX30抗體
二馬來(lái)酐 98%13號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框32抗體
2,6-二對(duì)醌 98%線粒體相關(guān)富含半胱氨蛋白抗體
1,3-二羥酮,二聚體 97%跨膜接頭蛋白SIT抗體
4,4'-二二 98%SKAP55蛋白抗體
2,5-二 98%沉默調(diào)節(jié)相關(guān)蛋白2抗體
2,4-二磺,水合 98%腫瘤/抗原11.2抗體
二乙二單 GR,99.0%平滑肌蛋白抗體
二十二烷 standard for GC,≥99.0% (GC)SHROOM1蛋白抗體
二十二烷 99%化沉默調(diào)節(jié)蛋白1抗體
三十二烷 standard for GC, ≥98.0% (GC) SCK蛋白抗體
測(cè)定步驟:
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測(cè)定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測(cè)定(在96孔板中依次加入下列試劑)
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測(cè)定。






















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