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酵母活性檢測試劑盒-AlamarBlue

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  • 型號
  • 品牌其他品牌
  • 所在地上海市
  • 更新時間2022-05-09
  • 廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
  • 入駐年限第9年
  • 實名認證已認證
  • 產(chǎn)品數(shù)量9985
  • 人氣值378148
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貨號FS-X9720
酵母活性檢測試劑盒-AlamarBlue正在熱銷的產(chǎn)品:Caspase-6 (NT) 半胱蛋白蛋白-6抗體(N端)滅草隆
Caspase-6 (NT) 半胱蛋白蛋白-6抗體(N端)滅草隆
Caspase-7 半胱蛋白蛋白-7抗體N-酮 97%
Caspase-8 半胱氨蛋白8抗體一氧化異戊二烯 95%
Caspase-9 白介1-β轉(zhuǎn)化樣凋亡蛋白6抗體異戊 分子生物學級,>99%(GC
酵母活性檢測試劑盒-AlamarBlue 產(chǎn)品詳情

產(chǎn)品介紹:

AlamarBlue 酵母活性檢測試劑盒是應用新型的氧化還原指示劑阿爾瑪藍快速高靈敏度檢測酵母活性的比色檢測產(chǎn)品。

AlamarBlue 是一種氧化還原指示劑,能根據(jù)酵母的代謝活性產(chǎn)生吸光度變化和熒光信號。這種測定是基于具有代謝活性的細胞將試劑轉(zhuǎn)換成熒光和比色指示劑的能力。受損和無活性細胞具有較低的天然代謝活性,因此對應的信號較低。

AlamarBlue 在氧化狀態(tài)下呈現(xiàn)紫藍色無熒光性,而在還原狀態(tài)下,轉(zhuǎn)變?yōu)槌史奂t或紅色熒光的還原產(chǎn)物,其吸收峰為530-560nm,而散射峰為590nm。在酵母細胞增殖過程中,細胞內(nèi)處于還原環(huán)境。進入酵母細胞內(nèi)的活性檢測染料被代謝中間體及細胞色素類還原后釋放到酵母細胞外并溶于培養(yǎng)基中,使培養(yǎng)基從無熒光的靛青藍變成有熒光的粉紅色。后用普通分光光度計或熒光光度計進行檢測,吸光度和熒光強度與活性酵母細胞數(shù)成正比。染料經(jīng)過驗證安全無毒,可以用于酵母細胞活性和酵母細胞增殖的定量分析細胞毒性研究。

AlamarBlue 的無毒特性使酵母細胞可長期暴露于這種染料,因此可隨時間進行測量或進行終點測量。

AlamarBlue 法采用單一試劑,可以連續(xù)、快速地檢測酵母細胞的增生狀態(tài)。由于AlamarBlue對酵母細胞無毒、無害,不影響細胞的蛋白質(zhì)合成與分泌等活性,因此可以對同一批酵母細胞的增生狀態(tài)進行連續(xù)觀察和進一步的實驗觀察,因此有操作簡便和幾乎不干擾酵母細胞正常代謝的特點。

儲存條件:檢測液2-8℃避光保存;

有效期:一年。

中文名稱:酵母活性檢測試劑盒-AlamarBlue

英文名稱:

產(chǎn)品規(guī)格:250T|500T|1000T

貨號:FS-X9720

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

培養(yǎng)操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

大內(nèi)皮(Big ET)英文名:Big ET 溶血磷脂?;D(zhuǎn)移D抗體包裝1g

大動脈平滑肌肌動蛋白α2(Acta2/Actsa/Actvs)英文名:Acta2/Actsa/Actvs 載脂蛋白E3抗體包裝250mg

催乳抑制激(PIH)英文名:PIH ABI基因家族2抗體包裝1g

催乳釋放激(PRH)英文名:PRH 氧化蛋白質(zhì)解包裝5g

催乳(PRL)英文名:PRL 鐵調(diào)節(jié)蛋白2抗體包裝500mg

催產(chǎn)(OT)英文名:OT 乙脫氫1型抗體包裝50mg

促有絲分裂因子(MF/MPF)英文名:MF/MPF AFP4a蛋白抗體包裝1g

促性腺激釋放激(GnRH)英文名:GnRH Rho GTP激活蛋白32抗體包裝250mg

促生長激釋放激(GHRH)英文名:GHRH 能量平衡相關蛋白抗體包裝5g

促腎上腺皮質(zhì)激釋放因子(CRF)英文名:CRF 禽腦脊髓炎病AEV抗體包裝5mg

促腎上腺皮質(zhì)激(ACTH)英文名:ACTH 腺苷環(huán)化7抗體包裝25g

促腎上皮質(zhì)激釋放激(CRH)英文名:CRH 腺苷環(huán)化4抗體包裝5g

促卵泡(FSH)英文名:FSH 腺苷活化蛋白激γ1抗體包裝1g

促狀腺釋放激(TRH)英文名:TRH 芳香N-乙?;D(zhuǎn)移抗體包裝1g

促狀腺(TSH)英文名:TSH 腺苷環(huán)化8抗體包裝1g

三磷腺苷結合轉(zhuǎn)運蛋白G超家族成員2抗體結締組織生長因子(CTGF)AR-A014418 is an ATP-competitive, and selective GSK3β inhibitor with IC50 and Ki
酵母活性檢測試劑盒-AlamarBlue丁香假單胞 4-羥基-6-喹唑啉基質(zhì)金屬蛋白8

異常威克漢姆酵母 6--4-羥基喹唑啉基質(zhì)金屬蛋白9

假交替單胞屬 2-甲氧基-3-硝基-4-基質(zhì)金屬蛋白抑制因子1

棲土曲霉 1-乙酰-4-基質(zhì)金屬蛋白抑制因子2

蜥蜴纖細芽孢桿 2-(1H-吡唑-1-基)乙酸基質(zhì)金屬蛋白抑制因子3

釀酒酵母 5--6-甲基基質(zhì)裂解蛋白;基質(zhì)溶

*櫻桃鏈格孢 1-(3-甲氧基苯基)哌基質(zhì)裂解

金龜子綠僵 N,N-二甲基1,4-丁烷二基質(zhì)衍生因子1

釀酒酵母 4-甲基-2-戊基-1,3-二氧戊環(huán)基質(zhì)衍生因子1α

Sphingobium rhizovicinum 2--5-甲氧基苯并咪唑基質(zhì)衍生因子1β

大腸埃希氏 3,4-二甲氧基甲酯基質(zhì)相互作用分子1

小孢擬盤多毛孢 N-Boc-4-亞甲基激活A

盤長孢狀盤孢 2'-F-Ac-dC亞磷酰單體敏感性脂肪

玫煙色棒束孢 N-乙?;?5'-O-[雙(4-甲氧基苯基)苯基]-2'-脫氧-2'-氟胞苷激肽釋放10

豬鏈球分型血清參考品 血清型 SS3 3-氟-2-激肽釋放11

 


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