產(chǎn)品名稱 | CAL-120人乳腺癌細(xì)胞 | 貨號 | AXB6170 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 英文名 | CAL-120 |
分類 | 人細(xì)胞系 | 用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
公司所有產(chǎn)品均不得用于人類或動(dòng)物之臨床診斷或治療,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。

細(xì)胞凍存注意事項(xiàng):
(1) 細(xì)胞的收獲
用來凍存的細(xì)胞一般選擇在細(xì)胞約鋪滿 90% 的時(shí)候,這時(shí)細(xì)胞生長狀態(tài)好,細(xì)胞數(shù)量也多,并且在收獲細(xì)胞前 24 小時(shí)換一次培養(yǎng)液。收獲用來凍存的細(xì)胞開始時(shí)方法和平時(shí)一樣,用 100xg 離心 5 分鐘收集細(xì)胞再重懸,活細(xì)胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細(xì)胞保存的最終細(xì)胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細(xì)胞 /ml ),加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護(hù)劑混合溶液中輕輕混勻,分裝到凍存管,冷凍保存。
(2) 保護(hù)劑的使用
細(xì)胞凍存中, 一般使用DMSO 作為保護(hù)劑。在細(xì)胞凍存中, DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ,某種具體細(xì)胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細(xì)胞特別是雜交瘤細(xì)胞在凍存時(shí)使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會好些。保護(hù)劑在使用時(shí)先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍,再與等體積的懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細(xì)胞凍存的速率
細(xì)胞的冷凍速率最適控制在讓細(xì)胞有足夠的時(shí)間脫水而又不被過度脫水導(dǎo)致細(xì)胞損害。對大多數(shù)細(xì)胞來說,每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細(xì)胞先在-20℃1-2個(gè)小時(shí),再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱,可以用干冰替代),再轉(zhuǎn)入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4) 儲存環(huán)境
細(xì)胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間,細(xì)胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中,如果可能最好保存在氣態(tài)層,因?yàn)檫@樣可避免由于有液氮進(jìn)入凍存管而在拿出細(xì)胞時(shí)引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲少量液氮,需要經(jīng)常添加)。細(xì)胞也可以在-80℃冰箱保存幾個(gè)月左右的時(shí)間。

公司正在出售的產(chǎn)品:
human excision repair cross-complementation group 1,ERCC1 ELISA kit 人切除修復(fù)交叉互補(bǔ)基因1Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-PTPN4/MEG1 蛋白酪0酸酶非受體型4抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh GOLPH2/GP73 高爾基體膜蛋白GP73抗體 規(guī)格 0.2ml
Lp- Alpha ELISA Kit 大鼠脂蛋白α 96T
NKAP 英文名稱: NFKB激活蛋白抗體 0.1ml
BEND6 英文名稱: BEND6蛋白抗體 0.2ml
Anti-PTPN4/MEG1 蛋白酪0酸酶非受體型4抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Human chaperonin 10,CPN10 ELISA Kit 人伴侶蛋白10Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Phospho-SMC1 (Ser360) 0酸化染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白質(zhì)1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Goat Anti-rabbit IgG 羊抗兔IgG 規(guī)格 1mg
PL-A2(Mouse Phospholipidase A2) ELISA Kit 小鼠0脂酶A2 96T
Nitrotyrosine 英文名稱: 硝基酪酸抗體 0.2ml
BSPRY 英文名稱: BSPRY蛋白抗體 0.1ml
Anti-Phospho-SMC1 (Ser360) 0酸化染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白質(zhì)1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Human dynamin 2,DNM2 ELISA Kit 人發(fā)動(dòng)蛋白2Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-SP-B 肺表面活性蛋白B抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat Anti-Mouse IgG/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的羊抗小鼠IgG 規(guī)格 0.1ml
Cyt-C ELISA Kit 大鼠 96T
CAL-120人乳腺癌細(xì)胞NIT2 英文名稱: NIT2蛋白抗體 0.2ml
BACE2 英文名稱: β淀粉樣前體蛋白裂解酶2抗體 0.2ml
Anti-SP-B 肺表面活性蛋白B抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Lptn/LTN/XCL1 ELISA Kit 大鼠淋巴細(xì)胞趨化因子Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-Phospho-Tyrosine Hydroxylase (Ser40) 0酸化酪羥化酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh GDF8 生長分化因子8/肌肉抑制素抗體 規(guī)格 0.2ml
INH(Human Inhibin) ELISA Kit 人抑制素 96T
NIT1 英文名稱: 水解酶1抗體 0.2ml
Adenylate cyclase 1 英文名稱: 腺苷酸環(huán)化酶1抗體 0.2ml
Anti-Phospho-Tyrosine Hydroxylase (Ser40) 0酸化酪羥化酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
操作步驟:
(1) 細(xì)胞系培養(yǎng):取6cm細(xì)胞皿,向每孔中加入2mL含1~2×105個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)液,37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%,密度過大,轉(zhuǎn)染后不利篩選細(xì)胞。
(2) 轉(zhuǎn)染液制備:在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個(gè)孔細(xì)胞所用的量)
A液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。
B液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。
分別將A液與B液輕彈混勻,靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中,輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉(zhuǎn)染準(zhǔn)備:用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次,再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
(5) 轉(zhuǎn)染:把A/B復(fù)合物緩緩加入培養(yǎng)液中,搖勻,37℃溫箱置6~24小時(shí),吸除無血清轉(zhuǎn)染液,換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
(6) 瞬時(shí)轉(zhuǎn)染后,可在48h-72h細(xì)胞長滿之后,提取細(xì)胞蛋白或者RNA,驗(yàn)證敲減/過表達(dá)效率。


































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