商品介紹:
產(chǎn)品名稱 | A129L人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 | 貨號 | AXB6114 |
規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | 英文名 | A129L |
分類 | 人細(xì)胞系 | 用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
公司所有產(chǎn)品均不得用于人類或動物之臨床診斷或治療,僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
細(xì)胞凍存注意事項(xiàng):
(1) 細(xì)胞的收獲
用來凍存的細(xì)胞一般選擇在細(xì)胞約鋪滿 90% 的時(shí)候,這時(shí)細(xì)胞生長狀態(tài)好,細(xì)胞數(shù)量也多,并且在收獲細(xì)胞前 24 小時(shí)換一次培養(yǎng)液。收獲用來凍存的細(xì)胞開始時(shí)方法和平時(shí)一樣,用 100xg 離心 5 分鐘收集細(xì)胞再重懸,活細(xì)胞記數(shù)。稀釋或濃縮到細(xì)胞保存的最終細(xì)胞濃度的二倍(一般是 400-1000 萬 細(xì)胞 /ml ),加入已經(jīng)配好的等體積的培養(yǎng)液保護(hù)劑混合溶液中輕輕混勻,分裝到凍存管,冷凍保存。
(2) 保護(hù)劑的使用
細(xì)胞凍存中, 一般使用DMSO 作為保護(hù)劑。在細(xì)胞凍存中, DMSO 使用的最終濃度一般是 5-15% ,某種具體細(xì)胞的凍存液中的DMSO濃度可以從ATCC查到。對特別敏感的細(xì)胞特別是雜交瘤細(xì)胞在凍存時(shí)使用 95% 血清和 5%DMSO 可能會好些。保護(hù)劑在使用時(shí)先用培養(yǎng)液或血清配成最終濃度的2倍,再與等體積的懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)液混合。
(3) 細(xì)胞凍存的速率
細(xì)胞的冷凍速率最適控制在讓細(xì)胞有足夠的時(shí)間脫水而又不被過度脫水導(dǎo)致細(xì)胞損害。對大多數(shù)細(xì)胞來說,每分鐘降 1 至 3 ℃是合適的。通常的操作是把細(xì)胞先在-20℃1-2個(gè)小時(shí),再放入 -80℃冰箱過夜(如果沒有-80℃冰箱,可以用干冰替代),再轉(zhuǎn)入液氮罐或低于 -130℃的冰箱長期保存。
(4) 儲存環(huán)境
細(xì)胞長期保存溫度是 -130 ℃或更低。液氮罐中氣態(tài)層溫度在 -140℃至 -180℃之間,細(xì)胞可保存在氣態(tài)層或浸入液氮中,如果可能最好保存在氣態(tài)層,因?yàn)檫@樣可避免由于有液氮進(jìn)入凍存管而在拿出細(xì)胞時(shí)引起爆炸(但是這樣液氮罐內(nèi)只能存儲少量液氮,需要經(jīng)常添加)。細(xì)胞也可以在-80℃冰箱保存幾個(gè)月左右的時(shí)間。

公司正在出售的產(chǎn)品:
TrxR ELISA Kit 大鼠硫氧還蛋白還原酶Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-GDNF Receptor alpha 2 膠質(zhì)細(xì)胞系源性神經(jīng)營養(yǎng)因子受體alpha 2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh GLUR3/GRIA 3 谷受體3抗體 規(guī)格 0.1ml
Bcl3(human B-cell leukemia/lymphoma 3) ELISA Kit 人B細(xì)胞淋巴瘤因子3 96T
NDUFA1 英文名稱: NADH氧化還原酶輔酶1抗體 0.1ml
ATP5A 英文名稱: ATP5A抗體 0.1ml
Anti-GDNF Receptor alpha 2 膠質(zhì)細(xì)胞系源性神經(jīng)營養(yǎng)因子受體alpha 2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
PY ELISA Kit 大鼠吡啶交聯(lián)物Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-YBX-1 高保留轉(zhuǎn)錄因子抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh G protein beta 3/GNB3 G蛋白β3抗體/鳥核苷酸結(jié)合蛋白β亞基3 規(guī)格 0.2ml
HGF(Human hepatocyte growth factor) ELISA kit 人肝細(xì)胞生長因子 96T
NDST1 英文名稱: NDST1蛋白抗體 0.2ml
ARF5 英文名稱: ADP核糖基化因子5抗體 0.2ml
Anti-YBX-1 高保留轉(zhuǎn)錄因子抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
TSGF ELISA Kit 大鼠特異生長因子/相關(guān)因子Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-TSARG4 生精細(xì)胞凋亡相關(guān)基因4抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh GHDC GHDC蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
TSGF(Mouse Tumor Specific Growth Facter/tumor supplied group of factor) ELISA KIT 小鼠特異生長因子/相關(guān)因子 96T
NDRG4 英文名稱: 抑癌基因NDRG4抗體 0.2ml
ATPase Na+/ K+ beta 2 英文名稱: ATP酶通道蛋白抗體 0.1ml
Anti-TSARG4 生精細(xì)胞凋亡相關(guān)基因4抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
RBC(Rat anti-red cell antibody )ELISA Kit 大鼠抗紅細(xì)胞抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-phospho-STAT6(Tyr641) 0酸化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子6抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Goat Anti-human IgG/Cy5 Cy5標(biāo)記的羊抗人IgG 規(guī)格 0.1ml
A129L人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞SAA ELISA Kit 大鼠血清淀粉樣蛋白A 96T
NDRG3 英文名稱: 抑癌基因NDRG3抗體 0.1ml
phospho-BACH1 (Ser990) 英文名稱: 0酸化癌易感基因相互作用蛋白1抗體 0.1ml
Anti-phospho-STAT6(Tyr641) 0酸化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子6抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
LF/LTF ELISA Kit 大鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-CIDEB CIDEB抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh GGT1/CD224 γ谷氨酰轉(zhuǎn)移酶抗體 規(guī)格 0.1ml
NF(Human neurofilament protein) ELISA Kit 人神經(jīng)絲蛋白 96T
NDRG2 英文名稱: 抑癌基因NDRG2抗體 0.2ml
ASB7 英文名稱: 含錨蛋白重復(fù)序列-細(xì)胞因子信號抑制物盒蛋白家族7抗體 0.2ml
Anti-CIDEB CIDEB抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
操作步驟:
(1) 細(xì)胞系培養(yǎng):取6cm細(xì)胞皿,向每孔中加入2mL含1~2×105個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)液,37℃ CO2培養(yǎng)密度至40%~60%,密度過大,轉(zhuǎn)染后不利篩選細(xì)胞。
(2) 轉(zhuǎn)染液制備:在EP管中制備以下兩液(為轉(zhuǎn)染每一個(gè)孔細(xì)胞所用的量)
A液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋1ug 質(zhì)粒DNA。
B液:用不含血清培養(yǎng)基稀釋2ul脂質(zhì)體。
分別將A液與B液輕彈混勻,靜置5分鐘。
(3) 吸取B液加入至A液中,輕彈混勻。室溫中置10-15分鐘。
(4) 轉(zhuǎn)染準(zhǔn)備:用1mL不含血清培養(yǎng)液漂洗兩次,再加入4mL不含血清培養(yǎng)液。
(5) 轉(zhuǎn)染:把A/B復(fù)合物緩緩加入培養(yǎng)液中,搖勻,37℃溫箱置6~24小時(shí),吸除無血清轉(zhuǎn)染液,換入正常培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
(6) 瞬時(shí)轉(zhuǎn)染后,可在48h-72h細(xì)胞長滿之后,提取細(xì)胞蛋白或者RNA,驗(yàn)證敲減/過表達(dá)效率。






























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