產(chǎn)品介紹:
Torin2是一種mTOR抑制劑,EC50為0.25nM,比作用于PI3K(EC50:200nM)選擇性高800倍。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! 號:1223001-51-1 純度:99.89% 分子量:432.4 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
中文名稱:mTOR抑制劑(Torin 2)
英文名稱:Torin 2
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg
貨號:FS-X10647
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng): 1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小; 2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置; 3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化; 4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng); 5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng); | 二、免疫熒光鑒定: 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; 2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min; 3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min; 4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜; 5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h; 6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。 |
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
培養(yǎng)操作步驟:
1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
糙皮側(cè)耳Alexa Fluor 350標記的兔抗羊IgMAnti-TOP2A Antibody法尼基轉(zhuǎn)移α(FNTα)
運動節(jié)桿菌Alexa Fluor 488標記的兔抗羊IgMAnti- Antibody發(fā)動蛋白3(DNM3)
棲土光黑殼Cy3標記的兔抗羊IgMAnti-TOLLIP Antibody發(fā)動蛋白1(DNM1)
秦氏蜜環(huán)菌Cy5標記的兔抗羊IgMAnti-TOP2A Antibody二?;视?DAG)
短小芽孢桿菌Cy5.5標記的兔抗羊IgMAnti-TOR1A Antibody二酰甘油-O-?;D(zhuǎn)移同源物2(DGAT2)
釀酒酵母Cy7標記的兔抗羊IgMAnti-TP53BP1 Antibody二酰甘油-O-酰基轉(zhuǎn)移同源物1(DGAT1)
灰(色)大孢鏈霉菌PE標記的兔抗羊IgMAnti-TP53 Antibody(PB0076)二羰基/L-木糖還原(DCXR)
變異白蟻菌生物標記的兔抗羊IgMAnti-TP63 Antibody二肽3(DPEP3)
伯克霍爾德菌辣根過氧化物標記的兔抗羊IgMAnti-TP63 Antibody二肽2(DPEP2)
茯苓P0辣根過氧化物標記的兔抗豚鼠IgGAnti-TP73 Antibody二肽基肽Ⅳ(DPP4)
類諾卡氏菌屬膠體金標記的兔抗豚鼠IgGAnti-TPH1 Antibody二肽基肽9(DPP9)
藤黃微球菌生物標記的兔抗豚鼠IgGAnti-TPH1 Antibody二肽基肽8(DPP8)
銹蘑Cy3標記的兔抗豚鼠IgGAnti-TP73 Antibody(PB0232)二肽基肽7(DPP7)
爪甲曲霉Cy5標記的兔抗豚鼠IgGAnti-TP63 Antibody(PB0164)二肽基肽6(DPP6)
茶擬盤多毛孢Cy5.5標記的兔抗豚鼠IgGAnti-TPOR/MPL Antibody二肽基肽3(DPP3)
雙氮纖維單胞菌Cy7標記的兔抗豚鼠IgGAnti-TPO Antibody二肽基肽10(DPP10)
B淋巴細胞誘導成熟蛋白1抗體腸炎沙門氏菌亞利桑那亞種人卵巢組織提取物
成對螺旋細絲蛋白抗體Sphingobiumjaponicum人牙周膜組織提取物
植烷氧化抗體Sphingobiumrhizovicinum人胰腺癌組織提取物
蛋白二硫鍵異構(gòu)P4HB抗體長赤細菌人體直腸癌組織提取物
mTOR抑制劑(Torin 2)新疆黃桿 無水化镥彈性蛋白
紅蠟盤 化鑭,無水膠原蛋白
根瘤 一氧化硅III型膠原蛋白
東方伊薩酵母 水蘇四糖,四水生長;分化因子8
湖沉積物紫色小桿 4-氟-3-低密度脂蛋白
盤多毛孢 苯戊酮高密度脂蛋白
不動桿 基硅烷磺酯乙酰CoA羧化
辣乳菇 (R)-(-)-1-Cbz-3-羥基吡咯烷組織蛋白L
白僵 S-1-芐氧羰基-3-羧基吡咯組織蛋白B
露濕漆斑 9,10-雙苯乙炔基蒽組織蛋白D
子午線假單胞 1,4-二甲氧基萘過氧化物
葡萄牙假絲酵母 嘧啶-5-甲μ-鈣激活
大麗花輪枝孢(棉花黃萎?。?/span> (2--4-吡啶基)甲布魯氏桿IgG抗體
臭曲霉 N-Phenylhydroxylamine相關(guān)糖蛋白
信州靈芝 2'-溴-4'-氟苯乙酮硫雌酮

































芦溪县|
苏尼特左旗|
安化县|
蚌埠市|
吉林市|
宁安市|
靖边县|
正阳县|
揭西县|
侯马市|
伊金霍洛旗|
紫云|
定襄县|
襄汾县|
科技|
锦州市|
大厂|
南陵县|
灵台县|
库尔勒市|
凤台县|
盘山县|
巴楚县|
太白县|
宜宾市|
安图县|
西城区|
合江县|
新建县|
美姑县|
本溪市|
和田市|
汝城县|
文水县|
罗源县|
中宁县|
武平县|
安康市|
清苑县|
宜阳县|
乌鲁木齐县|