實驗室微生物的污染狀況與防控措施！

實驗室微生物的污染狀況與防控措施！

百歐博偉生物：目前, 實驗室微生物的污染情況普遍存在, 主要是細菌、真菌和支原體等, 極易引發(fā)生物安全事件。為了保證實驗的準確性和科學(xué)性, 保證實驗室的生物安全, 控制實驗室微生物污染已經(jīng)成為實驗室重要的安全管理工作。

一、實驗室微生物污染的狀況及危害

實驗室生物安全管理工作困難重重;細胞實驗室培養(yǎng)過程中生物性污染是一個主要問題;在食用菌的菌種培養(yǎng)實驗室, 雜菌的污染是一個比較普遍存在的現(xiàn)象;在高致病性病原微生物實驗活動中, 為了確保實驗結(jié)果的準確性, 消滅雜菌顯得尤為重要, 如結(jié)核病的診治主要依賴于該菌的實驗室分離和培養(yǎng), 同時, 高致病性的病原微生物可能引起實驗室工作人員的感染, 甚至造成社會人群的感染, 嚴重危害環(huán)境安全和公眾健康, 從而造成社會恐慌;在疾控部門的微生物實驗室, 培養(yǎng)基雜菌污染現(xiàn)象極為常見, 而培養(yǎng)基的質(zhì)量關(guān)系到檢驗結(jié)果的可靠性、性;醫(yī)院檢驗科集中了醫(yī)院送檢的人體血液、體液、排泄物、分泌物等各類標本, 這些標本大多帶有致病微生物, 并且在檢驗過程中產(chǎn)生的氣溶膠會污染空氣, 從而影響實驗結(jié)果的準確性。

二、實驗室微生物污染的原因

實驗室培養(yǎng)環(huán)境中的物理化學(xué)以及生物因素都可能是污染的原因, 其中, 以生物性污染常見。并且, 微生物的污染也是難控制的。導(dǎo)致實驗室微生物污染的原因主要有: (1) 培養(yǎng)基滅菌操作不規(guī)范; (2) 在實驗活動中, 微生物隨著實驗操作產(chǎn)生的氣溶膠而擴散, 并污染實驗環(huán)境表面, 尤其是氣溶膠中的霉菌, 在空氣中附著在塵埃上, 形成一定粒徑的生物性粒子而懸浮, 直接污染實驗室環(huán)境; (3) 不同人員在理解與執(zhí)行等方面還存在很大的偏差, 造成理論與實際情況的嚴重脫節(jié), 容易使實驗室管理人員感到困惑; (4) 實驗室進出人員較多, 攜帶的微生物導(dǎo)致空氣污染。

三、控制實驗室微生物污染的措施

根據(jù)實驗室微生物污染的原因, 可以通過以下措施控制污染。

⒈實驗室各項指標應(yīng)符合消毒滅菌的標準

1) 儀器設(shè)備的安全。儀器設(shè)備的正常運行是生物安全的重要保障, 是控制微生物污染的基本要求, 特別是冰箱、超凈工作臺、干烤箱和高壓蒸汽滅菌器等儀器設(shè)備直接影響了實驗室和實驗試劑的無菌程度。

實驗用品如培養(yǎng)皿、試管等, 按照浸泡、刷洗、沖洗、滅菌等步驟嚴格清洗。應(yīng)用高壓蒸汽滅菌的物品不能裝得過滿, 玻璃制品、金屬器械等物品先高壓蒸汽滅菌然后在干烤箱中烘干。實驗用品滅菌后不易存放, 沒有及時使用的, 在下次實驗前仍需重新滅菌。

2) 實驗室環(huán)境的無菌化。實驗室環(huán)境微生物污染主要是空氣污染, 空氣消毒的方法很多, 化學(xué)消毒方法效果明顯, 但多數(shù)具有腐蝕性, 可持續(xù)效果差;物理消毒方法往往有其局限性;中草藥殺菌成分的研究仍需加強。因此, 克服單一消毒方法, 采用多方法相結(jié)合對實驗室空氣進行消毒。按時通風(fēng)換氣, 同時通過過濾設(shè)備對進入室內(nèi)空氣中的非生物和生物粒子加以控制, 如體積小、移動方便、操作簡單的空氣凈化器, 可在有人活動的情況下使空氣中的菌量保持較低水平?；瘜W(xué)消毒劑的種類很多, 如甲醛, 可以消滅結(jié)核桿菌、銅綠假單胞菌噬菌體、脊髓灰質(zhì)炎病毒等, 但是對人體有一定的毒性, 使用后要及時通風(fēng);過氧乙酸、乳酸是一種廣譜殺菌劑, 過氧乙酸噴霧消毒效果良好, 但是對粘膜具有刺激性, 對金屬有腐蝕性且穩(wěn)定性不夠好;臭氧具有消毒*、維持時間長等優(yōu)點, 但是對人體同樣有一定危害, 需要充分的通風(fēng)降低其含量;高濃度的消毒靈可以消滅空氣中的霉菌。蒼術(shù)、艾葉、大青葉等中草藥煙熏均有不同程度的空氣滅菌作用, 但是原料價格高和煙熏的二次污染問題還善待解決。對于要求嚴格的實驗室, 如細胞室, 還需要控制實驗室的溫度和濕度, 保持干燥與清潔來切斷微生物傳播途徑。

實驗室通常用1‰的新吉爾滅定期對實驗室桌面消毒, 實驗室空氣用紫外燈消毒, 有研究證明紫外線對表皮葡萄球菌、粘質(zhì)沙雷菌、枯草芽孢桿菌繁殖體和氣溶膠殺滅率可達99。5%以上。培養(yǎng)箱內(nèi)所有可拆卸的配件經(jīng)75%乙醇擦洗后, 高壓蒸汽滅菌, 安裝之前用二次蒸餾水擦洗內(nèi)膽及配件。超凈工作臺使用前后確保紫外線照射60min, 使用時用75%乙醇認真擦拭臺面, 經(jīng)常清掃, 被雜菌污染的培養(yǎng)物要及時運出去處理。實驗室的廢棄物不能視為生活垃圾處理, 如標本、離心管、培養(yǎng)皿等需要高壓蒸汽滅菌, 棉簽、吸水紙等一次性使用的污染材料焚燒后再處理。

⒉培養(yǎng)過程中抑制雜菌生長

準備原料盡量做到?jīng)]有剩余, 每次實驗都使用新的培養(yǎng)液, 如有剩余要妥善保存, 盡快使用。培養(yǎng)細菌的培養(yǎng)液或培養(yǎng)基可以通過加入二性霉素25~50U/mL抑制真菌污染, 培養(yǎng)真菌的培養(yǎng)液可以通過加入硫酸、*、克菌靈等抑制雜菌污染。

⒊保持菌種的優(yōu)良

在實驗用菌種可選的情況下, 用品質(zhì)優(yōu)良、抗污染的菌種, 定期更新菌種。優(yōu)良菌種要用適宜的方法保存, 盡量避免多次傳代導(dǎo)致的菌種退化或者菌種變異。

⒋建立*的實驗室規(guī)章制度

在運行中不斷*實驗室規(guī)章制度, 并在醒目位置懸掛。對本實驗室工作人員及外來人員及時培訓(xùn), 加強管理, 提高其生物安全管理意識, 增強自身操作能力。盡量減少無關(guān)人員進出實驗室, 進入實驗室必須穿滅過菌的工作服, 再用75%乙醇擦拭手部、腕部, 實驗操作時動作輕柔, 避免微生物氣溶膠的產(chǎn)生。對于實驗室的工作人員及日常養(yǎng)護人員采取培訓(xùn)、考核的制度, 組織相關(guān)人員對生物安全管理進行交流及學(xué)習(xí)。根據(jù)需要增加實驗室防護設(shè)備, 如洗眼裝置、消毒器具、生物安全柜等。

總之, 控制實驗室微生物污染的措施很多, 單一方法必然具有局限性, 效果不佳, 尤其是細菌污染, 細菌的細胞壁成分復(fù)雜, 對消毒劑的敏感程度具有選擇性, 可以根據(jù)所操作的病原微生物進行滅菌驗證。不同實驗室由于實驗內(nèi)容和微生物污染的種類不同, 應(yīng)根據(jù)本實驗室的實際情況選擇多種方法結(jié)合的控制措施。

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