Annexin V-EGFP -碧云天細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒(Annexin V-EGFP Apoptosis Detection Kit)是用EGFP標(biāo)記的重組人Annexin V來(lái)檢測(cè)細(xì)胞凋亡時(shí)出現(xiàn)在細(xì)胞膜表面的磷酯酰的一種細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒?？?/span> 以使用流式細(xì)胞儀、熒光顯微鏡或其它熒光檢測(cè)設(shè)備進(jìn)行檢測(cè)。
Annexin是一類(lèi)廣泛分布于真核細(xì)胞細(xì)胞漿內(nèi)鈣離子依賴的磷酯結(jié)合蛋白，參與細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。但僅Annexin V被報(bào)道可以調(diào)控一些PKC的活性。
Annexin V選擇性結(jié)合磷酯酰(phosphatidylserine，簡(jiǎn)稱PS)。磷酯酰主要分布在細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)，即與細(xì)胞漿相鄰的一側(cè)。在細(xì)胞發(fā)生凋亡的早期，不同類(lèi)型的細(xì)胞都會(huì)把磷酯酰外翻到細(xì)胞表面，即細(xì)胞膜外側(cè)。磷酯酰暴露到細(xì)胞表面后會(huì)促進(jìn)凝血和炎癥反應(yīng)。而Annexin V和外翻到細(xì)胞表面的磷酯酰結(jié)合后可以阻斷磷酯酰的促凝血和促炎癥反應(yīng)活性。
用帶有綠色熒光的熒光探針EGFP標(biāo)記的Annexin V，即Annexin V-EGFP，就可以用流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡非常簡(jiǎn)單而直接地檢測(cè)到磷酯酰的外翻這一細(xì)胞凋亡的重要特征。
本試劑盒還提供了碘化丙啶染色液，碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)可以染色壞死細(xì)胞或凋亡晚期喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，呈現(xiàn)紅色熒光。對(duì)于壞死細(xì)胞，由于細(xì)胞膜的完整性已經(jīng)喪失，Annexin V-EGFP可以進(jìn)入到細(xì)胞漿內(nèi)，與位于細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)的磷酯酰結(jié)合，從而也使壞死細(xì)胞呈現(xiàn)綠色熒光。
綜上所述，用Annexin V-EGFP和碘化丙啶染色后，正常的活細(xì)胞不被Annexin V-EGFP和碘化丙啶染色；凋亡早期的細(xì)胞僅被Annexin V-EGFP染色，碘化丙啶染色呈陰性；壞死細(xì)胞和凋亡晚期的細(xì)胞可以同時(shí)被Annexin V-EGFP和碘化丙啶染色。
一個(gè)包裝的本試劑盒共可以檢測(cè)20個(gè)樣品。

Annexin V-EGFP-碧云天細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒的保存條件：

4℃保存，半年有效。-20℃保存，一年有效。AnnexinV-EGFP和碘化丙啶染色液需要避光保存。為了長(zhǎng)期保存，可以把碘化丙啶染色液適當(dāng)分裝后-20℃保存。