人臍帶間充質干細胞誘導分化試劑盒

HyCyteTM 人臍帶間充質干細胞誘導分化試劑盒

Human Umbilical Cord Marrow Mesenchymal Stem Cells Osteogenic Differentiation Kit 

貨號：UCHX-D101 

規(guī)格：200 mL/Kit 

人臍帶間充質干細胞誘導分化試劑盒產品性能穩(wěn)定，可提高臍帶/臍血間充質干細胞成骨/成脂/成軟骨誘導效率；

NOTE：

a. 本產品組分均為無菌分裝，可直接配制成培養(yǎng)基使用；染色液為獨立包裝組分，請勿與培養(yǎng)基混用。

 b. 配制培養(yǎng)基前，請瞬時離心各管小劑量試劑以免損失，配制后請在有效期內使用完畢。

 c. 培養(yǎng)基儲存條件：2~8℃，避光；配制后有效期：3 months。

 d. 本產品僅用于科研實驗，不可用于其他。

成骨誘導步驟

1. 接種誘導細胞：取對數(shù)生長期的細胞，按照2×10^4cells/cm2的細胞密度接種至包被后的培養(yǎng)器皿中，于37℃，5% CO2培養(yǎng)環(huán)境下培養(yǎng)至匯合度60-70%，棄掉上清，加入成骨誘導分化培養(yǎng)基。

2. 細胞分化誘導：每2-3天更換成骨誘導培養(yǎng)基，于37℃，5% CO2培養(yǎng)環(huán)境下培養(yǎng)約14-21天，并注意觀察細胞形態(tài)變化。根據(jù)細胞鈣鹽結晶析出和鈣質結節(jié)形成的情況，決定終止細胞誘導的時間，進行染色鑒定。

3. 細胞固定：吸去培養(yǎng)基使用適量1×PBS清洗一次，棄去后取適量4%中性覆蓋培養(yǎng)器皿底面，室溫固定30-60 min，棄去固定液再使用1×PBS清洗兩次。

4. 茜素紅染色：加入適量茜素紅染液染3~5min，吸去茜素紅染液，用1×PBS清洗兩次，并加入適量1×PBS避免細胞干燥。

5. 誘導評估：顯微鏡下觀察成骨染色效果，并進行圖像采集和誘導評估。誘導成功時，鈣質結節(jié)會與茜素紅染料結合后呈現(xiàn)紅色或橘紅色。