StemScale PSC懸浮培養(yǎng)基
產(chǎn)品信息
Gibco StemScale™ PSC懸浮培養(yǎng)基是一種可擴(kuò)展、易于使用的培養(yǎng)基,支持在懸浮培養(yǎng)中大規(guī)模生成人多能干細(xì)胞(PSC)。該款培養(yǎng)基經(jīng)過專門配制,可解決當(dāng)前PSC球 狀體培養(yǎng)系統(tǒng)在聚集方面的技術(shù)挑戰(zhàn)。
擴(kuò)增能力強(qiáng) —每次傳代可實(shí)現(xiàn)5-10倍擴(kuò)增,細(xì)胞擴(kuò)增能力超出其他市售PSC懸浮培養(yǎng)基系統(tǒng)3倍以上
簡(jiǎn)化的工作流程—提供簡(jiǎn)單的培養(yǎng)基更換方案,無(wú)需在培養(yǎng)或傳代過程中使用微載體或細(xì)胞濾網(wǎng)
多種形式的可擴(kuò)展性—支持將PSC培養(yǎng)規(guī)模擴(kuò)大至多種容器形式:多孔板、搖瓶和生物反應(yīng)器
PSC細(xì)胞系間的一致性—在保持多能性和細(xì)胞活力的同時(shí)實(shí)現(xiàn)可靠且一致的球狀體形成
擴(kuò)增能力強(qiáng)
Gibco StemScale PSC懸浮培養(yǎng)基通過球狀體的自聚集進(jìn)而支持懸浮多能干細(xì)胞的生長(zhǎng),非常適合需要大量高質(zhì)量PSC的應(yīng)用。
StemScale培養(yǎng)基每次傳代可實(shí)現(xiàn)5-10倍擴(kuò)增,細(xì)胞擴(kuò)增能力超出其他培養(yǎng)基3倍(圖1)。

圖1.使用StemScale培養(yǎng)基進(jìn)行大規(guī)模擴(kuò)增。在30次傳代和20周培養(yǎng)中,StemScale培養(yǎng)基每次傳代均可實(shí)現(xiàn)10倍以上的細(xì)胞擴(kuò)增(左圖)。與其他供應(yīng)商的培養(yǎng)基“M”相比,StemScale培養(yǎng)基可在同一時(shí)間段內(nèi)實(shí)現(xiàn)高達(dá)3倍的擴(kuò)增(右圖)。

圖2.StemScale培養(yǎng)基有助于維持細(xì)胞活性和多能性。與其他懸浮培養(yǎng)系統(tǒng)相比,StemScale培養(yǎng)基可在傳代3次后提供*的細(xì)胞活性,并且在傳代30次后仍可維持高多能性。
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在更短時(shí)間內(nèi)生成更多細(xì)胞
與貼壁培養(yǎng)相比,在StemScale懸浮培養(yǎng)基中培養(yǎng)PSC球狀體允許用戶在更短的時(shí)間內(nèi)培養(yǎng)更多數(shù)量的細(xì)胞(表1),同時(shí)減少培養(yǎng)基和塑料耗材的消耗量。
從6孔板的單個(gè)孔開始,相比貼壁培養(yǎng),在懸浮培養(yǎng)中生長(zhǎng)的細(xì)胞在時(shí)間和細(xì)胞數(shù)量方面顯示出明顯差異。
| 懸浮大規(guī)模培養(yǎng) | 貼壁大規(guī)模培養(yǎng) | |||||
| 總培養(yǎng)天數(shù) | 培養(yǎng)容器形式 | 平均細(xì)胞產(chǎn)量 | 培養(yǎng)基消耗量 | 培養(yǎng)容器形式 | 平均細(xì)胞產(chǎn)量* | 培養(yǎng)基消耗量 |
|---|---|---|---|---|---|---|
| 3天 | 6孔板(單孔) | 1.5 x 106 個(gè)細(xì)胞 | 6 mL | 6孔板(單孔) | 1.5 x 106 個(gè)細(xì)胞 | 6 mL |
| 7天 | 6孔板(全板) | 18 x 106 個(gè)細(xì)胞 | 30 mL | 100 mm 培養(yǎng)皿 | 9 x 106 個(gè)細(xì)胞 | 48 mL |
| 11天 | 100 mL 生物反應(yīng)器 | 150 x 106 個(gè)細(xì)胞 | 200 mL | 150 mm 培養(yǎng)皿 | 22 x 106 個(gè)細(xì)胞 | 72 mL |
| 15天 | 500 mL 生物反應(yīng)器 | 750 x 106 個(gè)細(xì)胞 | 1,000 mL | 經(jīng)處理的Nunc TripleFlask細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 78 x 106 個(gè)細(xì)胞 | 800 mL |
| 19天 | 3 L 生物反應(yīng)器 | 4.5 x 109 個(gè)細(xì)胞 | 6,000 mL | 2層Nunc Cell Factory系統(tǒng) | 300 x 106 個(gè)細(xì)胞 | 1,200 mL |
| 23天 | – | – | – | 10層Nunc Cell Factory系統(tǒng) | 1.5 x 109 個(gè)細(xì)胞 | 6,000 mL |
| 27天 | – | – | – | 30層Nunc Cell Factory系統(tǒng) | 4.5 x 109 個(gè)細(xì)胞 | 18,000 mL |
| *該值根據(jù)每種培養(yǎng)容器形式的4天擴(kuò)增數(shù)據(jù)估計(jì)得出。3 L生物反應(yīng)器和30層Thermo Scientific Nunc Cell Factory系統(tǒng)的值根據(jù)表中列出的較小生物反應(yīng)器和Nunc Cell Factory系統(tǒng)形式推斷得出。 | ||||||
表1.懸浮培養(yǎng)系統(tǒng)與貼壁培養(yǎng)系統(tǒng)的大規(guī)模培養(yǎng)。懸浮培養(yǎng)系統(tǒng)(使用StemScale PSC懸浮培養(yǎng)基)與貼壁培養(yǎng)系統(tǒng)的大規(guī)模培養(yǎng)。

圖3.在StemScale培養(yǎng)基中生長(zhǎng)的多能干細(xì)胞。在StemScale PSC懸浮培養(yǎng)基中接種的多能干細(xì)胞可在5天內(nèi)維持球狀體大小和活性。
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“StemScale培養(yǎng)基能夠改善干細(xì)胞球狀體形成的效率?!?/b>
—— S. Rieck,ViaCyte
簡(jiǎn)化的工作流程

圖4.簡(jiǎn)化的工作流程(示意圖)。使用StemScale培養(yǎng)基可輕松使貼壁培養(yǎng)適應(yīng)到懸浮培養(yǎng)。StemScale培養(yǎng)基允許用戶采用隔日換液的時(shí)間方案(如需要)。在StemScale培養(yǎng)基中開始培養(yǎng)后,通過更換50%的培養(yǎng)基以定期每天或隔天一次飼養(yǎng)Gibco游離型iPSC。




圖5.隔日飼養(yǎng)的培養(yǎng)物在倍數(shù)變化(A)和多能性(B)方面與每日飼養(yǎng)的培養(yǎng)物相似。
跨細(xì)胞系和不同培養(yǎng)容器形式的擴(kuò)增能力
對(duì)于在StemScale培養(yǎng)基中培養(yǎng)的4種不同的PSC系,每次傳代均可實(shí)現(xiàn)6-11倍擴(kuò)增,且在15天內(nèi)可擴(kuò)增18-28倍。

圖6.懸浮培養(yǎng)系統(tǒng)與貼壁培養(yǎng)系統(tǒng)。懸浮培養(yǎng)系統(tǒng)(使用StemScale PSC懸浮培養(yǎng)基)與貼壁培養(yǎng)系統(tǒng)的大規(guī)模培養(yǎng)。
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PSC球狀體的神經(jīng)和心臟分化
從StemScale PSC懸浮培養(yǎng)基培養(yǎng)的PSC球狀體直接開始神經(jīng)誘導(dǎo)

圖7.球狀體的神經(jīng)誘導(dǎo)。使用PSC神經(jīng)誘導(dǎo)培養(yǎng)基(貨號(hào)A1647801),直接從StemScale培養(yǎng)基培養(yǎng)的PSC球狀體中誘導(dǎo)大量成熟的神經(jīng)干細(xì)胞。
將StemScale培養(yǎng)的球狀體引入DA神經(jīng)元分化工作流程

圖8.直接從StemScale培養(yǎng)基培養(yǎng)的PSC球狀體中誘導(dǎo)多巴胺能神經(jīng)元。與35天的貼壁培養(yǎng)方案相比,在懸浮培養(yǎng)25天時(shí)使用PSC多巴胺能神經(jīng)元(DA)分化試劑盒(貨號(hào)A3147701)從StemScale培養(yǎng)基中分化的DA神經(jīng)元共表達(dá)的FOXA2/Otx2數(shù)量相同(數(shù)據(jù)未顯示)。
PSC球狀體的心臟類器官分化

圖9.在StemScale培養(yǎng)基中生長(zhǎng)的懸浮PSC球狀體分化為心肌細(xì)胞。(A)誘導(dǎo)形成心臟前,在StemScale培養(yǎng)基中生長(zhǎng)的未分化的hPSC球體形態(tài)。(B)心臟誘導(dǎo)開始12天的球狀體。(C)用心臟標(biāo)記物α橫紋肌肌動(dòng)蛋白(綠色)和心肌肌鈣蛋白T(紅色)染色心臟類器官。細(xì)胞核用DAPI(藍(lán)色)復(fù)染。
● 規(guī)格參數(shù) / SPECIFICATION
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