反硝化細(xì)菌測試瓶庫號(hào)：M78422

反硝化細(xì)菌測試瓶NRB 500個(gè)一箱

在科研和實(shí)際工作中，傳統(tǒng)的石油烴降解菌等微生物的測定方法繁瑣、費(fèi)時(shí)、工作效率低且不準(zhǔn)確。

本產(chǎn)品操作簡單、使用方便、檢測數(shù)據(jù)準(zhǔn)確、是開展微生物采油研究、監(jiān)測及菌種產(chǎn)品-質(zhì)量檢驗(yàn)的測試工具。此外，根據(jù)用戶需要還可提供其他系列細(xì)-菌測試瓶。這些測試瓶包括：(1)稠油降粘菌測試瓶；(2)鐵細(xì)-菌測試瓶；(3)腐生菌（異養(yǎng)菌）測試瓶；(4)硫（化）細(xì)-菌測試菌；(5).產(chǎn)甲烷菌測試瓶；(6)發(fā)酵菌測試瓶；(7)產(chǎn)乙酸鹽菌測試瓶；(8)產(chǎn)表面活性劑菌測試瓶；(9).糖蜜菌測試瓶；(10)產(chǎn)聚合物菌測試瓶；(11)反硝化菌測試瓶；(12)真-菌測試瓶；(13)酵母菌測試瓶；（14）產(chǎn)H2產(chǎn)乙酸菌測試瓶。這些測試瓶可用于油田污水注水、微生物采油、鉆井液、完井液、壓裂液、修井液及工業(yè)循-環(huán)冷卻水中微生物的快速測定。

一、測試原理

本測定采用絕跡稀釋法，即欲測定的水樣用注射器逐級(jí)注入到測試瓶中進(jìn)行稀釋，直到后一個(gè)測試瓶無菌生長為止，然后根據(jù)稀釋的倍數(shù)計(jì)算出水樣中細(xì)-菌的數(shù)目。

二、測試方法

1.根據(jù)水樣中菌量的大致多少，將數(shù)個(gè)測試瓶排成一組，并依次編上序號(hào)。

2.用注射器把0.5毫升水樣注入1號(hào)瓶內(nèi)，充分振蕩。

3.用新的注射器從1號(hào)瓶內(nèi)取0.5毫升液體注入到2號(hào)瓶內(nèi)，充分振蕩。

4.再用新的注射器從2號(hào)瓶中取0.5毫升液體到3號(hào)瓶中，充分振蕩。

5.重-復(fù)上述操作程序，一直稀釋到后一瓶為止。

三、培養(yǎng)方法及細(xì)-菌生長的鑒別

把上述經(jīng)稀釋后的測試瓶放在30℃（或現(xiàn)場水溫）培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。按下表中列出的培養(yǎng)時(shí)間及生長指示進(jìn)行計(jì)數(shù)。

四、注意事項(xiàng)

1.測試瓶應(yīng)放在陰涼干燥處，本產(chǎn)品可保存一年。一年后測試瓶無異?，F(xiàn)象，仍可繼續(xù)使用。

2.石油烴降解菌測試瓶中有少量沉淀，不影響測試結(jié)果。

3.注射器要經(jīng)過高壓蒸氣消-毒，每稀釋一次，要重新?lián)Q一支。

4.由于1號(hào)測試瓶中所取原水樣為0.5毫升，因此在計(jì)算細(xì)-菌數(shù)時(shí)應(yīng)將查表結(jié)果乘以2，才是1毫升的細(xì)-菌數(shù)量；若在1號(hào)瓶中所取水樣為1毫升，則可直接計(jì)數(shù)（不需乘2）。

5.測試瓶的鋁皮蓋很薄很軟，使用時(shí)可用注射器針直接刺入進(jìn)行接種或取樣，操作方便，不需揭開鋁皮蓋。

表：各種測試瓶外觀、培養(yǎng)時(shí)間及生長指示一覽表

序號(hào) 細(xì)-菌外觀 培養(yǎng)時(shí)間（天） 生長指示

1石油烴降解菌 培養(yǎng)液呈紅色，且上層有油狀物 7培養(yǎng)液由紅變黃并渾濁

2鐵細(xì)-菌 培養(yǎng)液呈棕色 14 培養(yǎng)液出現(xiàn)沉淀，并伴有上層變清

3稠油降粘菌 培養(yǎng)液上層有稠油 7 稠油分散乳化、輕搖后培養(yǎng)液變黑

4腐生菌(異養(yǎng)菌) 培養(yǎng)液呈紅色 5 培養(yǎng)液由紅變黃，并渾濁

5硫（化）細(xì)-菌 培養(yǎng)液無色透明 14 用1%BaCl2溶液滴加3-5滴，培養(yǎng)液中出現(xiàn)BaSO4白色渾濁或沉淀

6產(chǎn)甲烷菌 培養(yǎng)液無色透明 14-28 有氣泡產(chǎn)生，用氣相色譜檢測CH4的存在

7發(fā)酵菌 培養(yǎng)液呈紅色 5 培養(yǎng)液由紅變黃

8產(chǎn)乙酸鹽菌 培養(yǎng)液呈紅色 7 培養(yǎng)液由紅變黃

9產(chǎn)表面活性劑菌 培養(yǎng)液上層有原油 7 培養(yǎng)液中原油分散乳化、輕搖后培養(yǎng)液變黑

10糖蜜菌 培養(yǎng)液呈紅色 5 培養(yǎng)液由紅變黃

11產(chǎn)聚合物菌 培養(yǎng)液上層有原油 14 培養(yǎng)液變稠變粘

12反硝化菌 培養(yǎng)液無色透明 7 渾濁，產(chǎn)生氣泡，或用格里斯試劑*檢測呈陽性反應(yīng)

13真-菌 培養(yǎng)液淺黃色透明 5 培養(yǎng)液變渾變濁，或出現(xiàn)明顯沉淀，或培養(yǎng)液表層出現(xiàn)明顯菌膜

14酵母菌 培養(yǎng)液呈淺褐色 5 培養(yǎng)液出現(xiàn)渾濁、形成表面菌膜或產(chǎn)生沉淀

15產(chǎn)H2產(chǎn)乙酸菌 培養(yǎng)液呈紅色且上層有油狀物 14 培養(yǎng)液由紅變黃，并有小氣泡產(chǎn)生

*格里斯試劑由A液和B液組成，A液為雙氨基苯磺酸溶液；B液為α-萘胺溶液。取經(jīng)培養(yǎng)后的反硝化細(xì)-菌培養(yǎng)液加于白瓷比色板上，滴加格里斯試劑，如顯紅色，證明有反硝化細(xì)-菌生長。（A液的配制：溶解0.6g對氨基苯磺酸于70ml沸蒸餾水中，冷卻后加入20ml濃鹽酸，然后稀釋成100ml，貯于棕色瓶中保存于冷處備用；B液的配制：溶解0.6gα-萘胺于1ml濃鹽酸的蒸餾水中，然后稀釋至100ml，貯于棕色瓶中，保存于冷處備用。）

五、計(jì)數(shù)

可根據(jù)下列表進(jìn)行計(jì)數(shù)：

出現(xiàn)細(xì)-菌生長的測試瓶 菌量（個(gè)/ml）

1 1-10

2 10-100

3 100-1000

4 1000-10000

若要準(zhǔn)確地測定出細(xì)-菌數(shù)量，可采取二、三、四、五管平行管測定方法，并根據(jù)生長指標(biāo)查表（分別查二、三、四、五次重復(fù)測數(shù)統(tǒng)計(jì)表）即可得到準(zhǔn)確細(xì)-菌數(shù)量。

注：參考圖片 以實(shí)物為主 試劑瓶每箱數(shù)量大小一樣，不同試劑顏色會(huì)有不同

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