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貨號	FS-X9843

產(chǎn)品介紹:

通過結晶紫初染和碘液媒染后，在細胞壁內(nèi)形成了不溶于水的結晶紫與碘的復合物，革蘭氏陽性菌由于其細胞壁較厚、肽聚糖網(wǎng)層次較多且交聯(lián)致密，故遇乙醇或脫色處理時，因失水反而使網(wǎng)孔縮小，再加上它不含類脂，故乙醇處理不會出現(xiàn)縫隙，因此能把結晶紫與碘復合物牢牢留在壁內(nèi)，使其仍呈紫色；而革蘭氏陰性菌因其細胞壁薄、外膜層類脂含量高、肽聚糖層薄且交聯(lián)度差，在遇脫色劑后，以類脂為主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖網(wǎng)不能阻擋結晶紫與碘復合物的溶出，因此通過乙醇脫色后仍呈無色，再經(jīng)沙黃等紅色染料復染，就使革蘭氏陰性菌呈紅色。

儲存條件：室溫密封保存。

有效期：一年。

中文名稱：革蘭氏染色試劑盒

英文名稱：

產(chǎn)品規(guī)格：200ml

貨號：FS-X9843

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結果分析

a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

培養(yǎng)操作步驟：

1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

索地平英文名： Imiquimod間粘附分子-1抗體包裝5g

哚普利英文名： Imiquimod間粘附分子-1抗體包裝25g

英文名： Irinotecan間粘附分子-1抗體包裝5g

匹莫丹英文名： Irinotecan親環(huán)蛋白（親環(huán)）PPIF抗體包裝1g

普伐他丁鈉英文名： Irinotecan HCl Trihydrate*抗體包裝1g

普拉格雷英文名： Irinotecan HCl Trihydrate內(nèi)離子通道蛋白4抗體包裝5g

羅布考英文名： Isoconazole Nitrate生長調(diào)控蛋白19/環(huán)指蛋白197抗體包裝25g

氫噻英文名： Isoconazole Nitrate卷曲螺旋結構域蛋白139抗體包裝5g

匹地爾英文名： Isotretinoin染色體修飾蛋白1抗體（金屬蛋白1）包裝1g

群多普利英文名： Isotretinoin鈣依賴分泌激活蛋白1抗體包裝250mg

舒伐他汀鈣/羅蘇伐他汀鈣英文名： Meropenem trihydrate小腦肽1抗體包裝1g

嘧達莫英文名： Meropenem trihydrate小腦肽2抗體包裝250mg

替卡格雷英文名： Kanamycin mono sulfate小腦肽4抗體包裝100g

米沙坦英文名： Kanamycin mono sulfate腦海綿狀血管畸形蛋白2抗體包裝25g

舍林鹽英文名： Ketanserin Tartrate表皮生長因子樣蛋白2抗體包裝1g

焦曲霉Aspergillus│ustus 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標準品氧化低密度脂蛋白試劑盒柚皮;Naringenin

石油棲熱腔菌Thermosipho│geolei 質(zhì)量規(guī)格：>99%延伸蛋白A試劑盒楊梅;Myricetin

索馬里鏈霉菌Streptomyces│somaliensis 質(zhì)量規(guī)格：>99%煙酰腺二核磷試劑盒異皮啶;Isofraxidin
革蘭氏染色試劑盒太平洋大洋桿狀分散橙37亮氨肽3

堅脆嗜熱子囊 2-氨基-6-苯并噻唑可溶性CD44分子

環(huán)狀芽胞桿鄰苯二甲單丁酯趨化因子配體2

德氏乳桿保加利亞亞種馬波沙星嗜性粒主要堿性蛋白

鮮綠青霉芥細小病B19-IgG抗體

金龜子綠僵* 5-氨基苯并咪唑酮JOE因子

平菇十一CD47蛋白

假單胞屬丁基三化錫帶3蛋白

腐皮鐮孢 2,5-己二酮抗角蛋白抗體

黑曲霉苯己烷促泌

毛韌革乙二硫代S-甲基轉移

莫哈韋芽孢桿氟菊酯早期分泌抗原靶6

枯草芽孢桿苯靈血管性血友病因子裂解

盤孢屬 4-羥基-4'-異氧基二苯砜絨毛膜促性腺α

黃孢平革沙拉沙星乙型肝炎病19

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