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當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒>>輔酶Ⅰ系列>> FAS脂肪酸合成酶檢測(cè)試劑盒微量法
| 貨號(hào) | FS-01S63254 |
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商品介紹:
測(cè)定意義 細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)的積累是脂質(zhì)合成與分解失衡的結(jié)果。脂肪酸合成增多,而氧化分解降低,會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)積累。FAS是脂肪酸合成關(guān)鍵酶,催化乙酰輔酶和丙二酰輔酶而生成長(zhǎng)鏈脂肪酸。FAS普遍表達(dá)于各種組織細(xì)胞中,在哺乳動(dòng)物肝、腎、腦、肺和乳腺以及脂肪組織中表達(dá)豐富。 測(cè)定原理 以NADPH為還原力,F(xiàn)AS催化乙酰CoA和丙二酰CoA生成長(zhǎng)鏈脂肪酸;通過測(cè)定NADPH的減少量,即可推算出FAS活性。 實(shí)驗(yàn)中所需儀器和用品 研缽、冰、臺(tái)式離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)、1mL石英比色皿、可調(diào)式移液槍和雙蒸水。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
公司產(chǎn)品僅用于科研提供的生化試劑盒,質(zhì)量信得過產(chǎn)品,售后*。服務(wù)于高校及免疫學(xué)科研單位,竭誠為您提供更周到的服務(wù)更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品。
產(chǎn)品名稱:FAS脂肪酸合成酶檢測(cè)試劑盒微量法
規(guī)格:100管/96樣
檢測(cè)方法:微量法
貨號(hào):FS-01S63254
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。 1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。 2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。 3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。 5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。 7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。 8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進(jìn)行檢測(cè)。 |
粗酶液提?。?/span>
1、細(xì)胞或組織樣品的制備: 培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)胞加入1ml提取液),超聲波破碎細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 2、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。 |
脂肪合成(FAS)測(cè)試盒50管/48樣規(guī)格野油菜黃單胞(甘藍(lán)黑腐病黃單胞,野油菜桿)Porcine Bcl2L11 (Bcl-2 Like Protein 11) ELISA Kit
硬脂(C18:0)含量測(cè)試盒100T價(jià)格香菇Porcine ADRA1A (Adrenergic Receptor alpha-1A ) ELISA Kit
GAD培養(yǎng)基圖片亞洲盤孢Porcine Aβ1-40 (Amyloid Beta Peptide 1-40) ELISA Kit
酪蛋白葡萄糖瓊脂圖片孟氏假單胞Porcine AMH (Anti-Mullerian Hormone) ELISA Kit
亞硫鹽瓊脂現(xiàn)貨彩色豆馬勃Porcine CCP (Complement Control Protein) ELISA Kit
狂犬?。?/span>RV)核檢測(cè)試劑盒(RT-PCR法)價(jià)格雜色曲霉Porcine CYTIP (Cytohesin Interacting Protein) ELISA Kit
狂犬病核檢測(cè)試劑盒(熒PCR法)色褐鏈霉Porcine PCDH1 (Protocadherin 1) ELISA Kit
去氧紫草43043-74-9梭Porcine PARP4 (Poly ADP Ribose Polymerase 4) ELISA Kit
新蓮內(nèi)酯27215-14-1Enterobacter Porcine DEFα1 (Defensin Alpha 1, Neutrophil) ELISA Kit
小鼠B-細(xì)胞κ-輕肽基因增強(qiáng)子抑制因子激β(IκBKβ)elisa試劑盒售后服務(wù)枯草芽胞桿Porcine SAG (S Antigen) ELISA Kit
小鼠β細(xì)胞(βTC)elisa試劑盒售后服務(wù)普通變形桿*Porcine ACO1 (Aconitase 1) ELISA Kit
小鼠抗線粒體抗體(AMA)elisa試劑盒價(jià)格不等彎孢Porcine CENPH (Centromere Protein H) ELISA Kit
小鼠球蛋白G1(IgG1)elisa試劑盒價(jià)格大腸埃希氏Porcine BSP (Bone Sialoprotein) ELISA Kit
小鼠蛋白磷(PP)elisa試劑盒圖片短小芽孢桿Porcine ACAT2 (Acetyl Coenzyme A Acetyltransferase 2) ELISA Kit
小鼠白介12(IL-12/P70)elisa試劑盒價(jià)格腐皮殼Porcine CMR (Costimulatory Molecules Receptor) ELISA Kit
FAS脂肪酸合成酶檢測(cè)試劑盒微量法質(zhì)磷1抗體Anti-CD2 Antibody玉米35S/MSRT-PCR檢測(cè)試劑盒多少錢
D低磷性佝僂病蛋白Anti-Cd2 Antibody豬腦心肌炎病PCR檢測(cè)試劑盒說明書
多通道膜蛋白PTCHD2抗體Anti-CD22 Antibody人Her2/neu基因PCR檢測(cè)試劑盒說明書
修補(bǔ)相關(guān)蛋白PTCHD3抗體Anti-CD209 Antibody人白血病融合基因PCR檢測(cè)試劑盒多少錢
髓鞘轉(zhuǎn)錄因子1激抗體Anti-CD200 Antibody小腸結(jié)腸耶爾森PCR檢測(cè)試劑盒說明書
磷化髓鞘轉(zhuǎn)錄因子1激抗體Anti-CD22 Antibody(原貨號(hào)PB0731)豬圓環(huán)?、裥蚉CR檢測(cè)試劑盒多少錢
磷化血小板源性生長(zhǎng)因子受體αAnti-CD209 Antibody犬瘟熱病PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格
磷化血小板源性生長(zhǎng)因子受體αAnti-CD22 Antibody人色P450基因PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格
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