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上海撫生實業(yè)有限公司
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精子核DNA染色液(AO法)

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產(chǎn)品型號

品       牌其他品牌

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所  在  地上海市

更新時間:2022-05-16 14:16:12瀏覽次數(shù):251次

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貨號 FS-X9943
精子核DNA染色液(AO法)正在熱銷的產(chǎn)品:Phospho-NMDAR2B (Tyr1070) 化谷氨受體2B抗體二溴化鈀 Pd 40 %
Phospho-NMDAR2B (Tyr1472) 化谷氨受體2B抗體鈀 Pd 26.2%
NR2C/NMDAR2C 谷氨受體2C抗體化鈀 Pd 59-60%
NR2D/NMDAR2D 谷氨受體2D抗體鉑 98%
N-Ras 原癌因抗體硝鈀 Pd

產(chǎn)品介紹:

用途:

用于精子頭部DNA檢測,評估精子受精能力。

注意事項:

含有雙鏈DNA的精子才有受精能力。熒光染料橙與雙鏈DNA結(jié)合后發(fā)出綠色熒光,與單鏈DNA結(jié)合則發(fā)出紅色或黃色熒光。

儲存條件:4℃,避光,12個月

中文名稱:精子核DNA染色液(AO法)

英文名稱:

產(chǎn)品規(guī)格:20T

貨號:FS-X9943

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

培養(yǎng)操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。

白色勞瑟爾氏菌色b5還原3抗體Human FHL1 豚鼠25羥基維生D3(25 HVD3)免疫試劑盒

果生鏈核盤菌CWC22蛋白抗體Human FGFR1OP2 兔ELSIA試劑盒

三峽1號(平菇類)9號染色體開放閱讀框95抗體Human FHL3 兔組織因子途徑抑制物(TFPI)免疫試劑盒

綿皮臥孔菌(可訂購)19號染色體開放閱讀框67抗體Human FEV 兔子組織因子(TF)免疫試劑盒

葡萄座腔菌磷化酪蛋白激1γ1+γ2+γ3抗體Human FGF13 兔子組織型纖溶原激活劑(t-PA)免疫試劑盒

鹽單胞菌原卟啉氧化3抗體Human FHL2 兔子組織多肽抗原(TPA)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌間隙連接蛋白43抗體Human FGF18 兔子組(HIS)免疫試劑盒

綠色木霉緊密連接蛋白25抗體Human FBXO3 兔子總堿性磷(TALP)免疫試劑盒

榛黃假單胞菌中心體蛋白78抗體Human FGF16 兔子轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)免疫試劑盒

大腸桿菌6號染色體開放閱讀框146抗體Human FGF17 兔子腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體受體3(TRAIL-R3)免疫試劑盒

釀酒酵母6號染色體開放閱讀框154抗體Human FDFT1 兔子腫瘤壞死因子α(TNF-α)免疫試劑盒

大腸埃希氏菌9號染色體開放閱讀框16抗體Human FBXO41 兔子中性粒彈性蛋白(NE)免疫試劑盒

鏈霉菌屬9號染色體開放閱讀框78抗體Human FBXO43 兔子脂聯(lián)(ADP)免疫試劑盒

長枝木霉9號染色體開放閱讀框79抗體Human FBXO6 兔子脂多糖/內(nèi)(LPS)免疫試劑盒

植物乳桿菌植物亞種9號染色體開放閱讀框84抗體Human FBXW2 兔子脂蛋白磷脂A2(Lp-PLA2)免疫試劑盒

美澳型核果褐腐病菌9號染色體開放閱讀框85抗體Human FBXO2 兔子粘蛋白1(MUC1)免疫試劑盒

金黃色亞種Staphylococcus│aureus subsp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%α/β干擾受體試劑盒羥基檸檬

: Bt0249資源名稱: 蘇云金芽胞桿菌 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BRZ-DNA結(jié)合蛋白1試劑盒

白僵菌Beauveria│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRWnt-3a蛋白試劑盒派利文堿
精子核DNA染色液(AO法)類干酪乳桿 2,6-二氟-3-甲基芐網(wǎng)鈣蛋白2

灰黃青霉 2,3-二氟-4-甲基芐鱗狀上皮癌抗原2

谷棒桿 1-(2,6-二氟-3-基)乙酮砷劑3-氧化位甲基轉(zhuǎn)移

釀酒酵母 3--4-氟-DL-苯基甘Trim29分子

香菇屬 6--2-氟-3-乙粒鈣蛋白

少孢酵母 3-氨基噠鹽鹽纖維蛋白肽B

*雞油都不能訂購 6--2-氟-3-甲基芐鈉膽汁協(xié)同轉(zhuǎn)運蛋白

突臍蠕孢 3--2,6-二氟苯鈉膽汁協(xié)同轉(zhuǎn)運蛋白

雀黃鏈霉 4-溴-2--6-氟苯甲E3泛連接

鏈格孢 (3--2-氟苯基)甲上皮類癌相關(guān)抗原

克魯斯假絲酵母 (S)-(+)-alpha-甲氧基巨噬移動抑制因子抗體

楊齒白木層孔 9-氧雜-1-氮雜-蒽環(huán)氧合2抗體

大腸桿 (R)-3-氨基-氮雜庚烷-2-酮鹽鹽二?;视?/span>

淡紫擬青霉 2--6-甲氧基苯并噻唑葡萄糖6磷異構(gòu)

菜豆間座殼 5-溴-2--1,3-二谷半胱連接

 


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