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上海撫生實業(yè)有限公司
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綠色標本保色液(慢速)

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產品型號

品       牌其他品牌

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-05-16 16:45:33瀏覽次數:222次

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貨號 FS-X10205
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產品介紹:

用途:

利用硫酸銅、等藥液慢理

注意事項:

處理時間長,經此法處理后用液可以長期保存。在制作保色浸制標本后,瓶口要用石蠟或者凡士林密封嚴實,并避免陽光直射。

儲存條件:室溫,12個月

中文名稱:綠色標本保色液(慢速)

英文名稱:

產品規(guī)格:100ml|500ml

貨號:FS-X10205

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

培養(yǎng)操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

暗蓋淡鵝膏菌GA結合蛋白轉錄因子α/GABP-α抗體Human TMEM16A/DOG1 大鼠皮質(Cortisol)免疫試劑盒

巨大芽胞桿菌GA結合蛋白轉錄因子β/GABP-β1/GABP-β2抗體Human TMEM175 大鼠牛血清白蛋白(BSA)抗體(IgG)免疫試劑盒

耐久腸球菌谷脫羧65+谷脫羧67抗體Human TMEM173(Transmembrane protein 173) 大鼠XIV(FXIV/protein C)免疫試劑盒

塔賓曲霉谷脫羧樣蛋白1抗體Human TMEM176A 大鼠IX(FIX)免疫試劑盒

分枝節(jié)桿菌葡萄糖-6-磷3/G6Pase-β抗體Human TMEM102 大鼠Ⅻ(FⅫ)免疫試劑盒

淺天青鏈霉菌α葡萄糖/溶體α-葡糖抗體Human TMEM176B 大鼠ⅩⅢ(FⅩⅢ)免疫試劑盒

Sporosarcina生長因子受體結合蛋白2相關蛋白3抗體Human TMEM108 大鼠Ⅹ(FⅩ)免疫試劑盒

盤長孢狀盤孢生長因子受體結合蛋白2相關蛋白4抗體Human TMEM161A 大鼠Ⅱ(FⅡ)免疫試劑盒

淺白隱球酵母G基丁受體pi/GABAA Rπ抗體Human TMEM168 大鼠凝血原片段F1+2(F1+2)免疫試劑盒

豌豆根瘤菌磷化G基丁B型受體2抗體Human TMEM165 大鼠凝血受體(TR)免疫試劑盒

棉阿舒囊霉G蛋白偶聯(lián)受體結合蛋白α11/Gα 11 抗體Human TMEM16A/DOG1 大鼠凝血抗凝血復合物(TAT)免疫試劑盒

Lactobacillus brevisG3BP2蛋白抗體Human TLE1 大鼠凝血抗凝血Ⅲ復合物(TAT-III)免疫試劑盒

檸檬色短小桿菌γ基丁運載蛋白2抗體Human TMEM173(Transmembrane protein 173) 大鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)免疫試劑盒

游動放線菌*β1-6 N-乙?;咸烟寝D移3抗體Human ITIH1(Inter-alpha-trypsin inhibitor heavy chain H1) 大鼠凝聚(CLU)免疫試劑盒

格氏嗜鹽堿桿菌β1-6 N-乙?;咸烟寝D移7抗體Human TM7SF3 大鼠檸檬合(CS)免疫試劑盒

大腸埃希菌γ-微管蛋白GCP4抗體Human TM9SF4 大鼠尿液三葉因子3(TFF-3)免疫試劑盒

棲珊瑚假交替單胞菌Pseudoalteromonas│paragorgicola 質量規(guī)格:分析標準品基蓮心堿

貝倫格葡萄座腔菌Botryosphaeria│berengeriana De Not. 質量規(guī)格:分析標準品基酞

灰葡萄孢Botrytis│cinerea 質量規(guī)格:分析標準品桑皮C
綠色標本保色液(慢速)天藍色鏈霉* 硝鉻(III)九水合物胸腺β10

草鹽貪銅 鉬鋇幽門螺旋桿

梭 3,5-二甲基-4-羥基苯甲多囊腎蛋白1

生金鏈霉 N-(4-苯甲?;?-酪可溶性彈性蛋白片段

硝孢鏈霉 L-蘇糖鎂肌球蛋白重鏈

雜色曲霉原變種 4-二苯基苯甲葡萄糖

釀酒酵母 惕各香葉酯1,25二羥基維生D

多根硬皮馬勃 亞硫烯酯維生B12

氏假單胞 2,5-二溴噻唑甜菜堿

大豆慢生根瘤 亞硝銀磷甘油酯

德爾布有孢酵母 丁二二酰肼粘蛋白5AC

大西洋交替紅色桿 氟化錫(II)S-腺蛋

釀酒酵母 苯草酮s腺同型半胱

白側耳 鄰羥基對氨基甲酯

平菇 2-氨基-3-甲酯球蛋白G抗體

 


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