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Hoechst33258染色液(1mg/ml)

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產(chǎn)品型號

品       牌其他品牌

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所  在  地上海市

更新時間:2022-05-11 16:29:51瀏覽次數(shù):228次

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貨號 FS-X9880
Hoechst33258染色液(1mg/ml)正在熱銷的產(chǎn)品:IL-1R II 白介1受體Ⅱ抗體四丁溴化 98%
IRF4 干擾調(diào)節(jié)因子4抗體四正辛溴化 for ion pair chromatography,≥99.0% (AT)
ILT2/CD85j 表面免疫球蛋白樣轉(zhuǎn)錄因子2抗體四丁 97%
IRF7 干擾調(diào)節(jié)因子7抗體四化 AR
Phospho-IRF7 (Ser471/472)

產(chǎn)品介紹:

用途:

細(xì)胞凋亡檢測、普通細(xì)胞核染色、常規(guī)的DNA染色。

注意事項(xiàng):

Hoechst33258染色中l(wèi)eagene公司推薦采用該試劑。Hoechst33258是一種熒光染料,可以穿透細(xì)胞膜的藍(lán)色熒光染料,對細(xì)胞的毒性較低。染色染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細(xì)胞儀檢測??芍苯佑糜诠潭?xì)胞或組織的細(xì)胞核染色,也可直接用于活細(xì)胞或組織的細(xì)胞核染色。

儲存條件:-20℃,避光,12個月

中文名稱:Hoechst33258染色液(1mg/ml)

英文名稱:Hoechst33258 Staining Solution(1mg/ml)

產(chǎn)品規(guī)格:1ml|5×1ml

貨號:FS-X9880

實(shí)驗(yàn)報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

培養(yǎng)操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。

巨大芽胞桿菌自噬相關(guān)蛋白18抗體Human MARVELD3 豬白介22(IL-22)免疫試劑盒

杏鮑菇自噬相關(guān)蛋白4A抗體Human MAS1L 豬白介2(IL-2)免疫試劑盒

鮮綠青霉載脂蛋白A4抗體Human MAST1 豬白介1受體拮抗劑(IL1Ra)免疫試劑盒

芽孢桿菌12脂氧合抗體Human MAST3 豬白介1β (IL-1β)免疫試劑盒

血紅紅曲菌血管緊張III抗體Human C10orf58(Redox-regulatory protein FAM213A) 豬白介1α(IL-1α)免疫試劑盒

乳桿菌屬腺環(huán)化3抗體Human NY-ESO-1(Cancer/testis antigen 1) 豬白介18(IL-18)免疫試劑盒

蘇云金芽孢桿菌肯尼亞亞種血管動蛋白抗體Human Caspase 12 豬白介17(IL-17)免疫試劑盒

水稻漢納酵母腺病早期E1A蛋白抗體Human CD320 豬白介15(IL-15)免疫試劑盒

球形賴芽孢桿菌磷化活化復(fù)制因子2抗體Human C1orf31(Cytochrome c oxidase assembly factor 6 homolog) 豬白介13(IL-13)免疫試劑盒

Aureimonas pseudogalii磷化活化復(fù)制因子2抗體Human TMPRSS15(Enteropeptidase) 豬白介12(IL-12/P70)免疫試劑盒

大腸埃希氏菌磷化失調(diào)癥蛋白1抗體Human SPAST(Spastin) 豬白介12(IL-12/P40)免疫試劑盒

香菇錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白17抗體Human MLKL(mixed lineage kinase domain-like) 豬白介10(IL-10)免疫試劑盒

果生假絲酵母胞質(zhì)乙脫氫1抗體Human TOM20(translocase of outer mitochondrial membrane 20 homolog) 豬白介1(IL-1)免疫試劑盒

天藍(lán)色鏈霉菌ADP核糖基化樣因子ARL3抗體Human HSD3B7(3 beta-hydroxysteroid dehydrogenase type 7) 豬白蛋白免疫試劑盒

三葉草根瘤菌花生四烯15脂氧合1抗體Human MVK(Mevalonate kinase) 豬γ干擾(IFN-γ)免疫試劑盒

解幾丁質(zhì)纖維單胞菌癌增強(qiáng)蛋白2抗體Human CD97(CD97 antigen) 豬γ淀粉(AMY)免疫試劑盒

羅伊赫海源菌Idiomarina│loihiensis 質(zhì)量規(guī)格:比活度:>5000 U/mg,BC烯試劑盒鹽

硫色曲霉Aspergillus│sulphureus 質(zhì)量規(guī)格:>98%,植物激級脫氫E1試劑盒乙氧基血根堿

青霉屬Penicillium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%,BR激R型同工試劑盒遠(yuǎn)華蟾蜍精
Hoechst33258染色液(1mg/ml)嗜熱鏈球 己-3-甲基丁酯釀酒酵母IgA抗體

瑟氏泰勒蟲(清水株) 2,5-二溴-4-甲基咪唑8-羥基鳥DNA糖

釀酒酵母 4-基-2-甲氧基苯甲大腸

粘狀曲霉 N-乙?;?3,5-二-L-酪乙酯白介20

白僵 1H-吡唑-1-羧叔丁酯T復(fù)合體相關(guān)表達(dá)3

玫瑰考克氏 Boc-胍動力蛋白1重鏈7

棲熱屬 2-甲硫基吡Wnt-10b蛋白

紫紅曲霉 2-氨基-5-氟吡啶胞脫氨

枯草芽孢桿 N-苯基-N-甲基甘鹽鹽流感病A IgG抗體

短裙竹蓀1-2 2-溴苯酮血管非炎性蛋白1

麗齒屬 2-羥基-5-硝基3-脂肪

多主葡萄殼 2-羥基-3-硝基-4-卵巢癌抗原X1

喜鹽裸囊 2-甲基-4-甲氧基苯梅

沙鏈霉 3-羥基-5-三氟甲基噻吩沙眼衣原體IgG抗體

葡萄座腔 2-三氟c-Jun氨基末端激

 


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