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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
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TrxR硫氧還蛋白氧化還原酶檢測試劑盒微量法

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2022-04-11 11:07:32瀏覽次數(shù):166次

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貨號(hào) FS-01S63258
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產(chǎn)品名稱:TrxR硫氧還蛋白氧化還原酶檢測試劑盒微量法

規(guī)格:100管/96樣

檢測方法:微量法

貨號(hào):FS-01S63258
商品介紹:

測定意義

TrxR是一種NADPH依賴的包含F(xiàn)AD結(jié)構(gòu)域的二聚體硒酶,屬于吡啶核苷酸-二硫化物氧化還原酶家族成員,與硫氧還蛋白以及NADPH共同構(gòu)成了硫氧還蛋白系統(tǒng)。TrxR與GR活性類似,催化GSSG還原生成GSH,是谷胱甘氧化還原循環(huán)關(guān)鍵酶之一。

測定原理:

TrxR催化NADPH還原DTNB生成TNB和NADP+,TNB在412 nm有特征吸收峰,通過測定412nm波長處TNB的增加速率,即可計(jì)算TrxR活性。

自備儀器和用品:

低溫離心機(jī)、可調(diào)節(jié)移液器、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔板、和蒸餾水。

試劑的組成和配制:

提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;

試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;

試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;

試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;

試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
QQ截圖20220307153604.png

粗酶液提?。?/span>

1、細(xì)胞或組織樣品的制備:

培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)胞加入1ml提取液),超聲波破碎細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

2、血清(漿)樣品:直接檢測。

操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。

4.        每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。

7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進(jìn)行檢測。

粘蛋白5AC(MUC5AC)檢測試劑盒紅菇屬*Guinea pig TFF2 (Trefoil Factor 2) ELISA Kit

8-羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)檢測試劑盒黃色籃狀Guinea pig GCP-2 (Granulocyte Chemotactic Protein 2) ELISA Kit

胞漿型磷脂A2(cPLA2)檢測試劑盒微紫青霉Guinea pig LN (Laminin) ELISA Kit

褪黑(MT)檢測試劑盒枯草芽孢桿Guinea pig TXLNb (Taxilin Beta) ELISA Kit

Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基端肽(CTXⅠ)檢測試劑盒擬青霉Guinea pig CLA/CTAGE (Cutaneous Lymphocyte Associated Antigen) ELISA Kit

葡萄糖激(GCK)檢測試劑盒硬水土地桿Guinea pig gp130 (Glucoprotein 130) ELISA Kit

歸巢關(guān)聯(lián)黏附分子(HCAM)檢測試劑盒枯草芽孢桿Guinea pig TPPP (Tubulin Polymerization Promoting Protein) ELISA Kit

淀粉樣蛋白β1-42(Aβ1-42)檢測試劑盒大腸埃希氏Guinea pig DPP10 (Dipeptidyl Peptidase X) ELISA Kit

淀粉樣蛋白β1-42(Aβ1-42)檢測試劑盒宋氏志賀氏Guinea pig IGFBP-4 (Insulin Like Growth Factor Binding Protein 4) ELISA Kit

淀粉樣蛋白β1-42(Aβ1-42)檢測試劑盒泡囊側(cè)耳(鮑魚菇)Guinea pig AP 13 (Apelin 13) ELISA Kit

胸腺嘧核苷磷化(TP)檢測試劑盒白阿魏菇Guinea pig S100B (S100 Calcium Binding Protein B) ELISA Kit

Slit同源物2(Slit2)檢測試劑盒大腸埃希氏Guinea pig GATA3 (GATA Binding Protein 3) ELISA Kit

Slit同源物2(Slit2)檢測試劑盒土曲霉原變種Guinea pig TIMP-3 (Tissue Inhibitors of Metalloproteinase 3) ELISA Kit

粘蛋白5AC(MUC5AC)檢測試劑盒鏈格孢Guinea pig PTH (Parathyroid Hormone) ELISA Kit

載脂蛋白A2(APOA2)檢測試劑盒金針菇Guinea pig SEP1 (Selenoprotein 1) ELISA Kit
TrxR硫氧還蛋白氧化還原酶檢測試劑盒微量法小鼠抗血管內(nèi)皮生長因子A抗體Anti-MAOA Antibody(原貨號(hào)PB0704)考馬斯亮藍(lán) R-250 染液250mL規(guī)格

粘著斑蛋白抗體Anti-MAP2 Antibody支氣管上皮生長因子5mL價(jià)格

嗜鉻顆粒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白VAT1抗體Anti-MAOB Antibody(原貨號(hào)PB0705)間充質(zhì)干生長因子 - 無血淸5mL規(guī)格

D結(jié)合蛋白抗體Anti-MAP1LC3A Antibody親和層析柱3 mL規(guī)格

血管非炎癥分子1抗體Anti-MAP2K2 AntibodyCHAPS5g規(guī)格

血管假性血友病因子/血管性血友病因子抗體Anti-MAP2K1 Antibody長效期 SDS-PAGE 配膠液200mL圖片

血管內(nèi)皮生長因子C型抗體Anti-MAP2K3 Antibody肝生長因子5mL價(jià)格

囊泡相關(guān)膜蛋白3抗體Anti-MAP2K3 Antibody平滑肌生長因子 ( 不含血清 )5mL規(guī)格

 


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