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貨號(hào)	FS-01S63227

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公司產(chǎn)品僅用于科研提供的生化試劑盒，質(zhì)量信得過(guò)產(chǎn)品，售后*。服務(wù)于高校及免疫學(xué)科研單位，竭誠(chéng)為您提供更周到的服務(wù)更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品。

產(chǎn)品名稱：PDC丙酮酸脫羧酶檢測(cè)試劑盒紫外分光光度法

規(guī)格：50管/48樣

檢測(cè)方法：紫外分光光度法

貨號(hào)：FS-01S63227

商品介紹：

測(cè)定意義

PDC主要存在于酵母中，是乙醇發(fā)酵的關(guān)鍵酶之一，催化丙酮酸脫羧生成乙醛。

測(cè)定原理：

PDC催化丙酮酸脫羧生成乙醛，添加乙醇脫氫酶（ADH）來(lái)進(jìn)一步催化 NADH還原乙醛生成乙醇和NAD+；NADH在340 nm有吸收峰，而NAD+沒(méi)有；通過(guò)測(cè)定340 nm光吸收下降速率，來(lái)計(jì)算PDC活性。

自備儀器和用品：

研缽、冰、臺(tái)式離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)、1ml石英比色皿、可調(diào)式移液槍和雙蒸水。

操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過(guò)高時(shí)，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液（同檢測(cè)A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后立即進(jìn)行檢測(cè)。

粗酶液提?。?/span>

1、細(xì)胞或組織樣品的制備：

培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1ml提取液），超聲波破碎細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。

2、血清（漿）樣品：直接檢測(cè)。

試劑的組成和配制：
提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存；

試劑一：液體 5mL×1 瓶，4℃保存；

試劑二：液體 200μL×1 支，4℃保存；

試劑三：液體 4mL×1 瓶，4℃保存；

試劑四：粉劑×2 瓶，4℃保存。
豬胸腺表達(dá)趨化因子(TECK/CCL25)試劑盒 Human WIPI1 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體RTA蛋白抗體

豬周期D2(CCND2)試劑盒 Human XAB2 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體GPR155蛋白抗體

豬血小板反應(yīng)蛋白1(TSP-1)試劑盒 Human MTX2(Metaxin-2) ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體GPR30蛋白抗體

豬卵泡受體(FSHR)試劑盒 Human WIPI2 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體GPR86蛋白抗體

豬髓鞘少突膠質(zhì)糖蛋白(MOG)試劑盒 Human WIT1 ELISA KitG蛋白偶聯(lián)受體HM74蛋白抗體

豬強(qiáng)啡肽(Dyn)試劑盒 Human WNK4 ELISA Kit樣蛋白1樣蛋白抗體

豬二肽基肽X (DPP10)試劑盒 Human WNT3(Proto-oncogene Wnt-3) ELISA Kit磷化接頭蛋白Gab 2抗體

豬補(bǔ)體因子I(CFI)試劑盒Human WRAP53 ELISA Kit磷化接頭蛋白Gab2抗體

豬叉頭框蛋白P3(FOXP3)試劑盒Human WDR81 ELISA Kit干擾/維甲誘導(dǎo)凋亡相關(guān)基因抗體

豬ras同源物基因家族成員a(RHOA)試劑盒Human WRN ELISA Kit磷化接頭蛋白Gab 2抗體

豬核孔蛋白160kda(NUP160)試劑盒Human WRNIP1 ELISA Kit多肽N-乙?；肴樘寝D(zhuǎn)移13抗體

豬TATA框結(jié)合蛋白相關(guān)因子1(TAF1)試劑盒Human WDR92 ELISA Kit銜接蛋白γ/γ1-Adaptin抗體

豬前列腺內(nèi)過(guò)氧化物合1(PTGS1)試劑盒Human WIT1 ELISA Kit半乳糖瓦爾登轉(zhuǎn)化抗體

豬間隙連接蛋白26(CX26)試劑盒 Human WNK4 ELISA Kit半乳糖凝集10抗體

豬角蛋白17(CK17/KRT17)試劑盒 Human WNT3(Proto-oncogene Wnt-3) ELISA Kit半乳糖激2抗體
PDC丙酮酸脫羧酶檢測(cè)試劑盒紫外分光光度法硝鉍(III) 五水合物 AR ,99.0%BOC-D-2- 98%CAP1/Park7/DJ-1 Park7/DJ-1/CAP1抗原

硝鉍(III) 五水合物 ACS,≥98.0%BOC-D-4-溴 98%CAP2(Adenylyl cyclase-associated protein 2) 環(huán)化相關(guān)蛋白CAP-2抗原

硝鉍 CP,99.0%BOC-L-2-溴 98%TGF- Beta2 (Ttansforming Growth Factor – Beta2) 轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子–β2（抗原）

硝鉍(III) 五水合物 ≥99.99% metals basisBOC-L-3,4-二氯 98%TGF- Beta3 (Ttansforming Growth Factor – Beta3) 轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子–β3（抗原）

硝鉍(III) 五水合物 ≥99.995% metals basisBOC-D-3,4-二氯 98%TGF- Beta R2 peptide 轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子β受體2（多肽抗原）

咖啡 98%BOC-L-2-氯 98%Thymosin Alpha-1 胸 α-1 （胸腺Thymosin alpha-1）

咖啡 99%BOC-D-2-氯 98%Caspase-12 半胱蛋白蛋白-12(多肽)

咖啡分析標(biāo)準(zhǔn)品4-溴-2-甲氧基 98%Caspase-12(hunman) 半胱蛋白蛋白-12抗原(人)