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貨號(hào)	FS-X9835

培養(yǎng)操作步驟：

1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；

4．將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。

中文名稱(chēng)：碘化丙啶

英文名稱(chēng)：Propidium Iodide

產(chǎn)品規(guī)格：10mg|50mg|100mg

貨號(hào)：FS-X9835

產(chǎn)品介紹:

Propidium iodide是可用于細(xì)胞染色的紅色熒光染料。

注：本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！

號(hào)：25535-16-4

別名：PI

純度：98.0%

分子量：668.39

儲(chǔ)存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

尼達(dá)明英文名： Carisoprodol緊密連接蛋白8抗體包裝1g

司汀英文名： Carisoprodol磷化半胱蛋白9抗體包裝25g

考酚酯/霉酚酯英文名： Carvedilol磷化分裂周期蛋白25B抗體包裝5g

美登DM1英文名： Carvedilol磷化P27抗體/周期依賴(lài)激抑制劑抗體包裝2g

美英文名： Cediranib磷化P27抗體/周期依賴(lài)激抑制劑抗體包裝25g

立賓英文名： Celecoxib磷化P27抗體/周期依賴(lài)激抑制劑抗體包裝5g

米替福新英文名： Celecoxib磷化p21蛋白抗體包裝1g

蒽醌英文名： Chlortetracycline HCl磷化p21蛋白抗體包裝5g

莫特塞尼英文名： Chlortetracycline HCl8號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框84抗體包裝1g

達(dá)鉑;順糖鉑英文名： Cilostazol磷化p21蛋白抗體包裝5g

奈拉濱英文名： Cilostazol磷化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子CEBP α 抗體包裝100g

尼羅替尼英文名： Cisplatin CLEC2D蛋白抗體包裝1g

帕唑帕尼英文名： Cisplatin 富含半胱與表皮生長(zhǎng)因子樣蛋白2抗體包裝5g

帕唑帕尼鹽鹽英文名： Cisplatin 醌氧化還原樣蛋白1抗體包裝100g

曲塞二鈉英文名： Cladribine銅代謝結(jié)構(gòu)域蛋白9抗體包裝25g

釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR,USP胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1試劑盒鹽羅格列;Rosiglitazone

分枝枝頂孢Acremonium│furcatum 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品胰島樣生長(zhǎng)因子2受體試劑盒鹽吡格列;Pioglitazone

泛菌屬Pantoea│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>850mcg/mg,BR胰島樣生長(zhǎng)因子2試劑盒藥根堿;Jatrorrhizine
碘化丙啶枯草芽孢桿 2,5-二氟-3-血管非炎性蛋白2

新疆糖絲 4-氨基-2--3-氟CD36分子

球孢白僵 3-三氟甲基-1H-5-*脂酰肌1磷

禽腺病四-(4-甲氧基苯)乙烯磷脂酰肌二磷

白布勒擔(dān)孢酵母 (9-苯基-9H-咔唑-2-基)基質(zhì)金屬蛋白抑制因子

粗柄白蘑 6-乙基吡啶-3-基質(zhì)金屬蛋白

球孢白僵 3-溴-4-異硫基苯血清肌肽

巴達(dá)維亞芽孢桿 6-溴-5-甲基-1H-吲唑胱天蛋白12

大腸桿 2-氨基-5-溴吡啶-4-羧鈣調(diào)蛋白激4

鐮刀（三七根際土壤） Meso-四(3,5-二溴-4-羥基苯基)卟啉基質(zhì)金屬蛋白6

魚(yú)肉中磺嘧啶、磺甲惡唑質(zhì)控樣品聚-L-精巨病PP65抗原

Rhizobiales sp. 萘磺鈉載脂蛋白B

尖孢鐮刀亞麻專(zhuān)化型十七烷內(nèi)聚合

植物內(nèi)芽孢桿 DA201大孔樹(shù)脂神經(jīng)生長(zhǎng)因子受體

蘇云金芽胞桿庫(kù)爾斯塔克亞種 N-甲基氧基乙酯HIV (1+2) 抗原抗體
操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)