液相色譜儀是屬于易學(xué)難用的儀器，特別講究“正確使用"和經(jīng)驗(yàn)。液相工作者接觸最多的是流動(dòng)相，也就是流動(dòng)相，是造成液相色譜各種問題的最主要源頭。
液相色譜儀見的故障一是堵，二是漏。下面就這兩點(diǎn)分別展開討論。（注：流動(dòng)相以甲醇為例，色譜柱以C18為例）
“堵"的表現(xiàn)現(xiàn)象就是柱壓異常升高，直接原因就是流路不暢。堵塞的主要位置就是在色譜柱的前端，最主要原因就是流動(dòng)相里有雜質(zhì)，雜質(zhì)的主要來源就是細(xì)菌。

水中的細(xì)菌污染

一般的國產(chǎn)甲醇其實(shí)不需要額外過濾處理，直接使用沒有問題。即使是有些固態(tài)微粒雜質(zhì)，也能在液相流路系統(tǒng)最前端的過濾頭上排除。而真正容易引起問題的，是水中的細(xì)菌。新制備的純水在室內(nèi)放置幾天就會長菌，而這些細(xì)菌雖然肉眼不可見，卻足以堵塞柱填料顆粒的空隙，造成柱子很快報(bào)廢，所以更為重要的就是確保水的可靠性。

當(dāng)然解決方法也比較簡單，的方式當(dāng)然是購買實(shí)驗(yàn)室專用純水機(jī)，既方便又可靠，質(zhì)量也放心。的缺點(diǎn)就是價(jià)格不菲?；蛘?/span>成箱購買市售品牌純凈水，如500ml 一支的娃哈哈。

從使用的實(shí)際情況來看有幾點(diǎn)需要注意:
（1）流動(dòng)相過濾實(shí)際操作時(shí)由于不可能做到專瓶專用，容易造成的交叉污染，對于配比復(fù)雜的流動(dòng)相影響更大。所以用完后一定要沖洗干凈。用前不放心的話也可以沖洗下。（2）流動(dòng)相過濾經(jīng)濟(jì)成本比較高。買一套過濾裝置要3000多元，且過濾器是比較容易損壞的設(shè)備。過濾片成本高，有些進(jìn)口的一片就要幾十元。按一般液相柱的正常使用壽命計(jì)算，過濾片的成本會遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于色譜柱的成本。并且在使用過濾片時(shí)，有些會造成流動(dòng)相的二次污染，原因在于不合格的過濾片。
（3）流動(dòng)相過濾耗費(fèi)時(shí)間長。使用溶劑過濾器有一個(gè)預(yù)清洗、裝備、使用、用后清洗，晾干的過程，至少也有一個(gè)小時(shí)的時(shí)間。這個(gè)成本也不能忽視。

流動(dòng)相細(xì)菌污染

流動(dòng)相剛開始沒有長菌，在使用時(shí)卻產(chǎn)生了細(xì)菌污染。這主要是在使用多元液相色譜儀時(shí)的一種不良使用習(xí)慣造成的。

舉個(gè)例子：50％的甲醇水流動(dòng)相，有兩種使用方式。一種方式是在上機(jī)前就配好混合在一起，另一種方式是在流路A放純甲醇，流路B放純水。從單純實(shí)驗(yàn)效果來說，后一種有明顯的優(yōu)點(diǎn)：首先是簡單，不需要實(shí)驗(yàn)者另個(gè)計(jì)算配比混合，其次就是比例準(zhǔn)確，能得到保留時(shí)間重復(fù)性的實(shí)驗(yàn)效果。
但是，它有一個(gè)致命的缺陷，就是純水在流動(dòng)相瓶中幾天時(shí)間就會長細(xì)菌（很多情況下不僅僅用純水作流動(dòng)相，而是用緩沖鹽溶液，本身就是優(yōu)質(zhì)肥料，細(xì)菌長得更迅速），一旦有細(xì)菌柱子就壞得很快。所以這種方式要操作人員每次實(shí)驗(yàn)都要用新制備的純水，更要求在每次實(shí)驗(yàn)后把水相換掉，換成甲醇沖洗干凈，這一點(diǎn)在實(shí)際工作中很多人意識不強(qiáng)，就是意識到了但多次使用中總有一兩次會遺漏，但是往往這一兩次就足以產(chǎn)生致命的影響。因?yàn)橐合嗌V柱的堵塞是不可逆的。

不適當(dāng)操作造成

（1）在更換零件時(shí)選擇的型號有誤，接口不是很匹配，在擰緊的時(shí)候產(chǎn)生變形而使得管路堵塞。
（2）樣品處理液凈化得不干凈，長期會在六通閥和柱之間形成阻塞不暢。
（3）在使用手動(dòng)六通閥時(shí)，有些人可能由于手勁小的原因，轉(zhuǎn)動(dòng)的不到位，于是造成流路形成了死堵，壓力快速升高超過警戒值。
（4）在使用金屬管路作出廢液管時(shí)，應(yīng)當(dāng)注意廢液瓶中先放一些水，并把廢液管的出口端放在液面下。如果位于在液相上且實(shí)驗(yàn)使用較高濃度的緩沖鹽溶液，在停機(jī)時(shí)可能在出口端結(jié)晶成塊并造成堵塞。這種情況不常見，但卻的確發(fā)生過。

查找堵塞原因

絕大多數(shù)情況下，整個(gè)系統(tǒng)只會有一個(gè)地方發(fā)生堵塞。查堵的方法是從尾向前逆向分段拆開，仔細(xì)觀察壓力數(shù)值，如果某一個(gè)部件（柱子除外）裝上和拆下時(shí)的壓力差別很大，可根據(jù)變化判斷。至于柱的堵塞，可以通過換同樣規(guī)格的柱的壓力是否一致來判斷。

漏液與漏氣

 一、漏液

（1）接頭處漏液

  一般是色譜柱接頭處漏液，可能是由于接頭損壞、松動(dòng)、接口不匹配等情況而造成漏液。這時(shí)只要檢查接頭是什么問題，就差不多了。接口損壞可以替換新的，松動(dòng)就擰緊，如果是不匹配的問題，是用色譜柱配套的接頭或者選用peek接頭，適配性高。恒譜生PEEK螺紋色譜柱堵頭接頭通用且可重復(fù)使用、幾乎兼容所有品牌色譜柱，低死體積連接，耐化學(xué)性不能與溶劑發(fā)生反應(yīng)。恒譜生色譜柱接頭系列有：PEEK 1/16“、1/8“、1/4“ 螺紋連接頭，零死體積PEEK內(nèi)/外螺紋連接兩通；不銹鋼1/16“、1/8“、1/4“ 螺紋連接頭，不銹鋼無死體積內(nèi)/外螺紋連接兩通；PEEK / 不銹鋼壓環(huán)。

（2）泵漏液

   泵頭漏液一般都是由于密封不好引起的，首先要排查單向閥和接頭是不是松動(dòng)了，但是調(diào)整時(shí)也不能擰太緊，避免相互磨損造成損壞。

（3）進(jìn)樣閥漏液

  轉(zhuǎn)子密封圈磨損太厲害或者已經(jīng)損壞了而造成密封不嚴(yán)。這樣的情況只能重新安裝或更換進(jìn)樣閥。還有因?yàn)閺U液管產(chǎn)生虹吸或者堵塞，造成廢液逆流的情況。此時(shí)需要保持廢液管高于廢液液面，或者更換、疏通廢液管，保證廢液排放正常。

二、漏氣

（1）過濾頭

抽液時(shí)，在流路管中有不規(guī)則但持續(xù)的小氣泡產(chǎn)生，這時(shí)考慮的是流動(dòng)相有沒有脫氣（需要特別提醒即使是有了真空脫氣機(jī)也是要先超聲脫氣的，起碼可以減少脫氣機(jī)的工作壓力并提高工作效率），如果已經(jīng)脫了氣，則要注意過濾頭的污染也會造成這種現(xiàn)象。處理方法比較簡單，擰下過濾頭在稀硝酸中浸泡，超聲半小時(shí)，洗凈后裝回去即可。

（2）透明流路管

指的是在過濾頭和輸送泵之間的那一段管路。這一個(gè)部分往往不是有點(diǎn)氣泡，而經(jīng)常是整個(gè)管中全是空氣而操作人員卻渾然不知，以致輸送泵工作了半天才發(fā)現(xiàn)流動(dòng)相瓶里的液體一點(diǎn)也沒少。這也是我們常說的液相色譜儀至少一周要開機(jī)一次的原因（我們做液相一定要有“微滲"的概論）。如果長時(shí)間不用，這一段管路的液體會干掉，而充滿空氣的管路和充滿液體的管路不仔細(xì)看是分辨不出來的。這種情況對于輸送泵很危險(xiǎn)，因?yàn)楸脧脑O(shè)計(jì)來說是輸送液體而不是輸送氣體，內(nèi)部的液體對于活塞來說起到了機(jī)油的作用，如果活塞桿還殘存了一些緩沖鹽，則極易拉傷，造成不可逆轉(zhuǎn)的影響。

對于這種情況，要以預(yù)防為主，每臺機(jī)一周擊至少作一次實(shí)驗(yàn)，如長期不用起碼每周要沖流動(dòng)相2 小時(shí)。養(yǎng)成良好的工作習(xí)慣很重要。