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酶標(biāo)抗體效價測定程序
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各種HRP酶標(biāo)記成抗體的效價測定程序如下:
如羊抗鼠IgG-HRP的效價測定
抗原包板:15ug/ml 小鼠IgG-pH9.6·CB液 0.1ml/孔
↓
37°C包被60min或4°C過夜
↓
PBST洗板3次,5min/次
↓
加入倍比稀釋的HRP標(biāo)記抗體 0.1ml/孔
↓
37°C 30min
↓
PBST洗板5min/次×3
↓
底物液0.1ml/孔 37°C 5-10min
↓
終止液:2N H2SO4 0.05ml/孔
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450nm 測定OD值
陽性O(shè)D值比對照值大3倍,為判斷效價稀釋度。
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