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一、代理介紹

農(nóng)桿菌感受態(tài)制備試劑盒代理——北京百奧創(chuàng)新科技有限公司，提供多個(gè)品牌的農(nóng)桿菌感受態(tài)制備試劑盒，更多產(chǎn)品的介紹，歡迎咨詢！

二、產(chǎn)品介紹

1. 農(nóng)桿菌感受態(tài)制備技術(shù)演進(jìn)

技術(shù)代際	方法	轉(zhuǎn)化效率	特點(diǎn)
Di一代（1980s）	氯化鈣化學(xué)法	10?–10? CFU/μg	操作簡(jiǎn)便，效率有限
第二代（1990s）	電穿孔法	10?–10? CFU/μg	需要專用設(shè)備，細(xì)胞損傷大
第三代（2000s）	液氮速凍/凍融法	10?–10? CFU/μg	適合大質(zhì)粒，重復(fù)性挑戰(zhàn)
第四代（2010s+）	優(yōu)化化學(xué)法+凍干保護(hù)	10?–10? CFU/μg	高活性、長(zhǎng)期穩(wěn)定、標(biāo)準(zhǔn)化

2. 核心產(chǎn)品系列詳解

2.1 經(jīng)典化學(xué)法制備試劑盒

產(chǎn)品名稱：AgroCompetent™ Chemically Competent Cell Prep Kit

參數(shù)	規(guī)格
制備原理	低滲CaCl?/MgCl?處理+PEG輔助細(xì)胞膜重塑
適用菌株	GV3101、EHA105、LBA4404、AGL1等常用根癌農(nóng)桿菌
起始材料	新鮮過夜培養(yǎng)物或甘油保藏菌
制備規(guī)模	50 mL培養(yǎng)物→200管（50 μL/管）感受態(tài)
轉(zhuǎn)化效率	≥1×10? CFU/μg pCAMBIA1301質(zhì)粒DNA
有效期	-80°C保存6個(gè)月，轉(zhuǎn)化效率下降<20%

試劑盒組成

組分	規(guī)格	功能
Solution I（洗滌緩沖液）	100 mL	低滲處理，去除培養(yǎng)基殘留
Solution II（感受態(tài)緩沖液）	50 mL	CaCl?/MgCl?/PEG zui-you化配方
Solution III（凍存保護(hù)液）	25 mL	含7.5% DMSO，玻璃化保護(hù)
陽(yáng)性對(duì)照質(zhì)粒	10 μL (50 ng/μL)	pCAMBIA1301（卡那+潮霉素抗性）
使用說明書	1份	詳細(xì)protocol與故障排除

優(yōu)化技術(shù)要點(diǎn)

關(guān)鍵步驟	技術(shù)細(xì)節(jié)	質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)
菌體收集時(shí)機(jī)	OD???=0.4–0.6（對(duì)數(shù)早期）	細(xì)胞活力zui-jia，細(xì)胞壁可塑性強(qiáng)
低溫處理	全程0–4°C操作	抑制代謝，維持膜穩(wěn)定性
滲透壓梯度	逐步降低離子強(qiáng)度	避免滲透休克導(dǎo)致細(xì)胞裂解
DMSO處理	終濃度7.5%，分步加入	平衡細(xì)胞膜流動(dòng)性與毒性
分裝凍存	液氮速凍后-80°C保存	避免冰晶損傷，玻璃態(tài)固化

2.2 高效電轉(zhuǎn)感受態(tài)制備試劑盒

產(chǎn)品名稱：AgroCompetent™ Electrocompetent Cell Prep Kit

參數(shù)	規(guī)格
制備原理	高滲蔗糖/甘油洗滌+超純水電滲透處理
適用菌株	農(nóng)桿菌及難以制備感受態(tài)的革蘭氏陰性菌
轉(zhuǎn)化效率	≥5×10? CFU/μg pCAMBIA1301（電轉(zhuǎn)條件優(yōu)化后）
電轉(zhuǎn)參數(shù)	2.0 kV, 25 μF, 200 Ω（0.2 cm電轉(zhuǎn)杯）
細(xì)胞濃度	1–2×1011 CFU/mL（濃縮10倍）

技術(shù)突破

創(chuàng)新點(diǎn)	效果
多步洗滌純化	去除外膜脂多糖，降低電轉(zhuǎn)脈沖阻抗
超純水電滲透	瞬時(shí)水通道形成，DNA高效攝入
高滲恢復(fù)培養(yǎng)	電轉(zhuǎn)后立即SOC-Mg2?高滲恢復(fù)，存活率提升3倍
無抗生素篩選	電轉(zhuǎn)后4小時(shí)表達(dá)窗口，避免質(zhì)粒丟失

2.3 發(fā)根農(nóng)桿菌專用試劑盒

產(chǎn)品名稱：RhizoCompetent™ Hairy Root Transformation Kit

特性	說明
適用菌株	Arqua1、ATCC 15834、K599、MSU440等
特殊優(yōu)化	針對(duì)Ri質(zhì)粒（pRi）的Vir基因誘導(dǎo)優(yōu)化
誘導(dǎo)化合物	含100 μM乙酰丁香酮（AS）預(yù)處理模塊
轉(zhuǎn)化效率	≥5×10? CFU/μg（pCAMBIA2301-GFP）
應(yīng)用方向	藥用植物毛狀根培養(yǎng)、代謝工程、根系發(fā)育研究

發(fā)根農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化特色

對(duì)比項(xiàng)	根癌農(nóng)桿菌	發(fā)根農(nóng)桿菌
致瘤質(zhì)粒	Ti質(zhì)粒（tumor-inducing）	Ri質(zhì)粒（root-inducing）
T-DNA來源	左右邊界（LB/RB）之間	TL-DNA + TR-DNA（雙T-DNA）
植物表型	冠癭瘤（undifferentiated）	毛狀根（hairy root, hormone-free growth）
應(yīng)用優(yōu)勢(shì)	穩(wěn)定轉(zhuǎn)化、可再生植株	快速生長(zhǎng)、高代謝物產(chǎn)量、根系特異性表達(dá)

2.4 即用型感受態(tài)細(xì)胞（Ready-to-Use）

產(chǎn)品系列：AgroInstant™ Pre-made Competent Cells

產(chǎn)品編號(hào)	菌株背景	抗性標(biāo)記	特色應(yīng)用
AI-GV3101	C58C1 Rif?	Rif?, Gent?	擬南芥轉(zhuǎn)化金標(biāo)準(zhǔn)
AI-EHA105	C58C1 Rif?	Rif?	單子葉植物高效轉(zhuǎn)化
AI-LBA4404	Ach5	Rif?, Str?	安全性高（disarmed Ti）
AI-AGL1	C58 Rec?	Rif?, Carb?	大片段（>150 kb）轉(zhuǎn)移
AI-GV3101(pSoup)	含pSoup輔助質(zhì)粒	Rif?, Gent?, Tet?	pGreen/pSoup雙元系統(tǒng)
AI-EHA101	C58C1 Rif?	Rif?, Carb?	超級(jí)Vir突變體

質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

檢測(cè)項(xiàng)目	合格標(biāo)準(zhǔn)	檢測(cè)方法
轉(zhuǎn)化效率	≥1×10? CFU/μg（GV3101/EHA105）	標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)粒轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)
無菌檢測(cè)	無細(xì)菌/真菌污染	LB平板培養(yǎng)48h
質(zhì)粒穩(wěn)定性	無輔助質(zhì)粒丟失	選擇性平板驗(yàn)證
細(xì)胞活力	>90%（臺(tái)盼藍(lán)染色）	顯微鏡計(jì)數(shù)
批次一致性	CV<15%	至少3批次驗(yàn)證

三、代理公司介紹

農(nóng)桿菌感受態(tài)制備試劑盒代理——北京百奧創(chuàng)新科技有限公司，公司產(chǎn)品線涉及細(xì)胞與基因治療、免疫學(xué)、分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)等多個(gè)方向，專注于生命科學(xué)試劑、耗材、細(xì)胞、儀器等產(chǎn)品銷售，經(jīng)營(yíng)的品牌主要有：ThermoFisher、Sigma、Qiagen、EZBioscience、ZYMO Research、MedKoo、Abcam、Elabscience、GeneTex、Gentaur、immunostar、Invitrogen、invivogen、Kerafast、Coriell、ATCC、SSI-DIAGNOSTICA、凱杰、RD systems等等。我們提供質(zhì)優(yōu)價(jià)美的產(chǎn)品、及時(shí)到位的服務(wù)，努力成長(zhǎng)為生命科學(xué)和生物技術(shù)企業(yè)的優(yōu)質(zhì)供應(yīng)商。

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