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一、代理介紹
脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑代理——北京百奧創(chuàng)新科技有限公司,提供多個品牌得脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑等產(chǎn)品,更多產(chǎn)品咨詢,歡迎聯(lián)系!
二、產(chǎn)品介紹
Lipofectamine 3000轉(zhuǎn)染試劑采用xian-jin脂質(zhì)體納米顆粒技術(shù),以高效遞送性能與廣泛細(xì)胞兼容性成為核酸轉(zhuǎn)染研究的主流工具,適用于質(zhì)粒DNA、siRNA/miRNA及CRISPR復(fù)合物的細(xì)胞水平導(dǎo)入。
技術(shù)原理與配方優(yōu)化
陽離子脂質(zhì)體與中性輔助脂質(zhì)協(xié)同組裝形成多層囊泡結(jié)構(gòu),核酸通過靜電相互作用壓縮于顆粒核心,粒徑控制在50-150 nm范圍。P3000增強(qiáng)試劑針對難轉(zhuǎn)染細(xì)胞優(yōu)化,通過促進(jìn)核酸釋放與核定位將轉(zhuǎn)染效率提升3-10倍。低毒性配方設(shè)計減少線粒體損傷與膜通透性改變,轉(zhuǎn)染后細(xì)胞存活率較傳統(tǒng)方法提高40%,適用于原代細(xì)胞與干細(xì)胞等敏感體系。
DNA轉(zhuǎn)染性能參數(shù)
貼壁細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率經(jīng)GFP質(zhì)粒驗證,HeLa、HEK293、COS-7等標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞系>90%,原代神經(jīng)元、內(nèi)皮細(xì)胞及免疫細(xì)胞>60%。質(zhì)粒容量范圍0.5-15 μg/孔(24孔板),zui-you-zhi脂比經(jīng)預(yù)實驗確定,推薦起始比例1:2至1:3(μg DNA:μL試劑)。血清兼容配方允許轉(zhuǎn)染復(fù)合物制備與細(xì)胞孵育全程含血清操作,簡化實驗流程并降低細(xì)胞應(yīng)激。
RNA干擾應(yīng)用方案
siRNA轉(zhuǎn)染采用正向轉(zhuǎn)染或反向轉(zhuǎn)染格式,有效敲低濃度低至1 nM,靶基因沉默效率>85%經(jīng)qPCR驗證。miRNA模擬物與抑制劑遞送效率與siRNA相當(dāng),支持功能獲得與功能缺失研究。化學(xué)修飾siRNA與未修飾siRNA均適用,轉(zhuǎn)染后4-6小時即可檢測到ARGO負(fù)載的RISC復(fù)合物形成。
CRISPR基因組編輯
RNP復(fù)合物(Cas9蛋白+sgRNA)直接轉(zhuǎn)染方案避免質(zhì)粒整合風(fēng)險,編輯效率經(jīng)T7E1酶切驗證>50%,部分細(xì)胞系達(dá)>80%。HDR模板共轉(zhuǎn)染時,P3000試劑同步遞送ssODN或dsDNA供體模板,精確編輯效率較單獨電穿孔提升2-3倍。多sgRNA載體轉(zhuǎn)染支持大片段缺失與多重基因編輯,脫靶效應(yīng)經(jīng)GUIDE-seq評估可控。
懸浮與特殊細(xì)胞優(yōu)化
淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞等懸浮細(xì)胞采用離心輔助轉(zhuǎn)染(spinfection)方案,400×g離心30分鐘將效率提升至貼壁細(xì)胞水平。3D培養(yǎng)體系(類器官、球狀體)經(jīng)優(yōu)化試劑穿透深度,核心區(qū)域轉(zhuǎn)染效率>70%。昆蟲細(xì)胞(Sf9、High Five)適配配方支持桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)構(gòu)建,轉(zhuǎn)染后72小時蛋白表達(dá)量經(jīng)Western blot定量。
三、代理公司介紹
脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑代理——北京百奧創(chuàng)新科技有限公司,提供OriGene蛋白等產(chǎn)品,更多產(chǎn)品咨詢,歡迎聯(lián)系!代理——北京百奧創(chuàng)新科技有限公司,公司產(chǎn)品線涉及細(xì)胞與基因治療、免疫學(xué)、分子生物學(xué)、 細(xì)胞生物學(xué)等多個方向,專注于生命科學(xué)試劑、耗材、細(xì)胞、儀器等產(chǎn)品銷售,經(jīng)營的品牌主要有:ThermoFisher、Sigma、Qiagen、EZBioscience、ZYMO Research、MedKoo、Abcam、Elabscience、GeneTex、Gentaur、immunostar、Invitrogen、invivogen、Kerafast、Coriell、ATCC、SSI-DIAGNOSTICA、凱杰、RD systems、GoldBio等等。我們提供質(zhì)優(yōu)價美的產(chǎn)品、及時到位的服務(wù),努力成長為生命科學(xué)和生物技術(shù)企業(yè)的優(yōu)質(zhì)供應(yīng)商。
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