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其它elisa免疫檢測(cè)試劑盒在優(yōu)化免疫學(xué)反應(yīng)前提后,建立了克百威間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA法和直接競(jìng)爭(zhēng)ELISA法,檢測(cè)限分別為0.005mg/L和0.01mg/L,檢測(cè)線性范圍分別為0.005~10mg/L和0.01~10mg/L,并在此基礎(chǔ)上研制了兩種用于檢測(cè)水、泥土、蔬菜、中毒樣品的酶聯(lián)免疫試劑盒,其ELISA試劑盒的重現(xiàn)性好,批內(nèi)批間及整體變異系數(shù)均低于8.0%,試劑盒檢測(cè)的正確度高,除嘔吐物樣品外,其余樣品的回收率均在89.62%以上。
本研究以2,3-二氫-2,2-二甲基-7-苯并呋喃氯甲酸酯為基礎(chǔ)合成了克百威的兩種半抗原,6—[[(2,3-二氫-2,2-二甲基-7-苯并呋喃基氧)羰基]氨基]已酸(BFNH)和4—[[(2,3-二氫-2,2-二甲基-7-苯并呋喃基氧)羰基]氨基]丁酸(BFNB)。 用合成的克百威免疫原免疫兔子后獲得價(jià)、高特異性的抗克百威多克隆抗血清,用間接ELISA測(cè)定效價(jià)為1:16000~1:128000,純化抗體效價(jià)為1:500000~1:4000000。并選擇由BFNB-BSA免疫兔子所得的一種純化抗體與辣根過氧化物酶偶聯(lián)制備成酶標(biāo)抗體,盒同時(shí)了測(cè)定了酶標(biāo)抗體的活性,效價(jià)為1:4000。所得克百威多抗血清與丁硫克百威的交叉反應(yīng)率6.19%,與呋喃酚的交叉反應(yīng)率為4.00%,其它elisa免疫檢測(cè)試劑盒與供試的其它5種氨基甲酸酯類的交叉反應(yīng)率均小于0.44%,對(duì)于三種有機(jī)磷的交叉反應(yīng)率均低于0.12%。 同時(shí),根據(jù)抗體抗原的特異性結(jié)合反應(yīng)的原理,進(jìn)一步研究了抗克百威抗體對(duì)小鼠克百威中毒后的解毒作用,試驗(yàn)結(jié)果表明,抗體可以較好地緩解克百威對(duì)乙酰*酯酶按捺作用的癥狀,使中毒小鼠逐漸恢復(fù)正常。同時(shí)將這兩種半抗原與載體蛋白牛血清蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶聯(lián)合成克百威免疫原和包被抗原,并用紫外光譜法測(cè)定克百威與載體蛋白結(jié)合物結(jié)合比。
100394 122-80-5 棕櫚酸異丙酯 946578-00-3
100395 Phenyl acetate 142-91-6 946670-72-0
100396 乙酸苯酯 dodecyl methacrylate 946779-35-7
100398 122-79-2 甲基丙烯酸月桂酯 948549-81-3
100399 Phenylacetaldehyde 142-90-5 948550-81-0
100400 苯乙醛 Piperazine adipate 948595-01-5
100407 N,N'-Dibenzylethylenediamine diacetate 142-88-1 949922-52-5
100408 N,N'-二芐基乙二胺二乙酸 Decyl sodium sulfate 949922-61-6
100410 122-75-8 十烷基* 950227-44-8
其它elisa免疫檢測(cè)試劑盒
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