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大鼠elisa免疫檢測試劑盒不顯色成白板怎么辦?

來源:上海莼試生物技術(shù)有限公司   2018年05月22日 11:04  

在做大鼠elisa免疫檢測試劑盒實驗中,相信大家或多或少難免會出現(xiàn)一些狀況,就在上周五,小編就在貼吧看到有個吧友發(fā)帖問在做ELISA實驗,到顯色步驟結(jié)束后,酶標(biāo)板所有孔均無顏色。陽性對照不顯色。那么今天上海勁馬請咱技術(shù)人員給大家分析分析
原因分析:試劑已過有效期,或不同試劑盒組分混用,檢查試劑的組分及批號,確認未過期以及所有組分均屬對應(yīng)的試劑盒。
對策:不同試劑盒或不同批號的試劑不能混用。
整板的黃板現(xiàn)象可能是由于錯加其他試劑造成,如同時操作兩對半試劑時,測HbsAb板用于測HBsAg等;實驗前檢查試劑的組分及批號,確認所有組分均屬于對應(yīng)的試劑盒。如盛標(biāo)本的試管四周常有血痂,易脫落,應(yīng)遠離酶標(biāo)板。
      elisa試劑盒超過有效期的產(chǎn)品可能會產(chǎn)生很弱的信號;試劑盒沒有按規(guī)定進行留存,受高溫影響;實驗前檢查試劑的組分及批號,確認試劑未過期。孵育溫度應(yīng)控制在37-38℃,孵育時間嚴(yán)格按照說明書操作,保溫期內(nèi)不宜多開門,以免影響保溫。花板,一般是由于臨床標(biāo)本的收集、處理和留存方法不當(dāng)造成,放置時間(自然放置1~2h)及離心轉(zhuǎn)(3000r/min)、離心時間(15min)應(yīng)引起注意。
    試劑、樣品用前未平衡至室溫從低溫冰箱中取出的試劑及樣品應(yīng)置室溫平衡,20分鐘左右。錯加、漏加試劑底物、顯色劑A或B嚴(yán)格按說明書的步驟操作,加完試劑后可觀察一下液面高度是否一致,以減少漏加現(xiàn)象。實驗結(jié)束后,陰陽性對照正常,質(zhì)控正常,但臨床標(biāo)本感覺顯色較弱,待測標(biāo)本中可能不含強陽性標(biāo)本,故結(jié)果可能是正常的,如有懷疑,可復(fù)檢標(biāo)本加入疊氮鈉作為防腐劑,酶免實驗中的標(biāo)本禁用疊氮鈉作為防腐劑,可選用 proclin、硫柳汞等其他防腐劑,陰陽性對照正常,但質(zhì)控、參考品或個別弱陽性標(biāo)本未能檢出。
大鼠elisa免疫檢測試劑盒洗板及加樣過程中,酶標(biāo)受污染失活失去催化顯色劑顯色的能力,確認盛酶標(biāo)的容器不含酶抑制劑如疊氮鈉等,確認配制洗液的容器已洗干凈。加樣時交叉污染;加標(biāo)本時盡量 避免交叉污染。 

 辣根過氧化物酶標(biāo)記β-肌動蛋白() 人內(nèi)*肽-2(EM-2)

 辣根過氧化物酶標(biāo)記白介素6(人)IgG 人內(nèi)分泌腺來源的血管內(nèi)皮生長因子(EG-VEGF)

 辣根過氧化物酶標(biāo)記肝細胞生長因子受體(原癌基因蛋白)IgG 人內(nèi)毒素(ET)

 辣根過氧化物酶標(biāo)記聚*/抗His tag標(biāo)簽(C端)IgG 人末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(TdT) 

 辣根過氧化物酶標(biāo)記抗DH5α大腸桿菌菌體蛋白IgG 人末端補體復(fù)合物C5b-9(TCC C5b-9) 

 辣根過氧化物酶標(biāo)記抗布魯氏菌IgG 人膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ) 

 辣根過氧化物酶標(biāo)記抗腸致病性大腸桿菌IgG 人膜攻擊復(fù)合物(MAC) 

 辣根過氧化物酶標(biāo)記抗大腸埃希桿菌O6IgG 人膜輔蛋白(MCP/CD46) 

 辣根過氧化物酶標(biāo)記抗大腸埃希氏菌O157IgG 人膜表面免疫球蛋白(SmIg) 
大鼠elisa免疫檢測試劑盒

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