進口elisa檢測試劑盒檢測的函數(shù)曲線在實際操作過程中描述的是劑量濃度的抗體和信號之間的相關(guān)關(guān)系，而其實質(zhì)是為了描述劑量濃度的抗體和對應(yīng)抗原-抗體偶聯(lián)物之間的相關(guān)關(guān)系?？乖?抗體偶聯(lián)物經(jīng)過了酶聯(lián)抗體反應(yīng)和酶催化放大反應(yīng)，催化產(chǎn)物檢測后轉(zhuǎn)換成信號。該信號間接的代表了抗原-抗體偶聯(lián)物。這種間接的轉(zhuǎn)化過程經(jīng)歷了三重信號的傳遞過程，而只有在三重傳遞保證線性的情況，抗體濃度-信號劑量曲線才能等同于抗體濃度-抗體抗原偶聯(lián)物濃度劑量曲線，如果進行了非線性傳遞將會影響到整個檢測方法的真實性和準確性，下面小編將從微觀角度簡單介紹下信號傳遞過程中可能存在的偏差。

1.信號檢測偏差：酶催化產(chǎn)物轉(zhuǎn)換成信號時有可能會產(chǎn)生的偏差，這個偏差在一些文獻中也稱之為儀器的非線性檢測區(qū)域，即當酶催化產(chǎn)物濃度過高時，催化產(chǎn)物濃度和信號值之間不*呈線性關(guān)系，這個現(xiàn)象是普遍存在的，某品牌酶標儀的參數(shù)性能，注意該儀器的測量范圍是0-4 OD，而該儀器確保的檢測線性范圍是0-3 OD。一般來講在進行吸光度法讀數(shù)時，檢測的信號值gao值控制在3左右。如果兩個相鄰的抗體濃度點對應(yīng)的信號值在OD值3.5及以上時都會特別接近，這兩個信號值很有可能是有信號傳遞偏差的。這個可以通過高濃度的酶催化產(chǎn)物梯度稀釋查看信號的線性范圍確認。

2.酶催化反應(yīng)傳遞偏差：該偏差是由酶催化顯色液引起的，其實質(zhì)是酶聯(lián)抗體的濃度和其對應(yīng)催化產(chǎn)物的濃度是否線性相關(guān)。由于酶催化反應(yīng)在未終止前是一個持續(xù)反應(yīng)的信號放大過程，信號的產(chǎn)生是時間的累積量，在反應(yīng)過程中酶活可能會喪失顯色液的有效成分在不斷的減少時，梯度濃度的酶催化反應(yīng)在反應(yīng)時間內(nèi)的可能不會是勻速反應(yīng)狀態(tài)。

      這個可以通過動力學讀數(shù)進行確認。目前市面上有多種顯色液可供選擇，顯色能力qiang和弱的產(chǎn)品信號差異可能達到20-50倍，需要根據(jù)實驗的目的正確的選擇顯色液并確認酶催化過程的線性傳遞。