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實驗室器具清洗方法你知道嗎？2021/06/03
面對你天天打交道的實驗器具，他們是你的好伙伴，也是決定準(zhǔn)確性的重要因素，它們的清洗就成為了一件極其重要的事情了。下面就不同器具的清洗方法做出說明：新玻璃儀器的清洗：1.自來水刷洗，除去灰塵。2.烘干、泡鹽酸：烤箱中烘干，然后再浸入5％稀鹽酸中12小時以除去臟物、鉛、砷等物。3.刷洗、烘干：12小時后立即用自來水沖洗，再用洗滌劑刷洗，自來水沖干凈后用烤箱烘干。4.泡酸、清洗：用清潔液（重鉻酸鉀120g：濃硫酸200mL：蒸餾水1000mL）浸泡12小時，然后從酸缸內(nèi)撈出器皿用自來水沖洗15次，后蒸
培養(yǎng)細(xì)胞不貼壁的原因以及解決方法2021/05/28
培養(yǎng)細(xì)胞不貼壁的原因以及解決方法在培養(yǎng)細(xì)胞的時候，有的會出現(xiàn)細(xì)胞不貼壁的，到底是什么原因會出現(xiàn)這種情況呢?下面來講解一下!可能原因如下：1.胰蛋白酶消化過度2.支原體污染3.培養(yǎng)基pH值過堿（NaHCO3分解）4.細(xì)胞老化5.接種細(xì)胞起始濃度太低或太高解決方法：1.縮短胰蛋白酶消化時間或降低胰蛋白酶濃度2.分離培養(yǎng)物，檢測支原體。清潔支架或培養(yǎng)箱。如發(fā)現(xiàn)支原體污染，丟棄培養(yǎng)物3.使用無菌醋酸溶液調(diào)整pH值或充入無菌CO24.啟用新的保種細(xì)胞5.調(diào)節(jié)*接種細(xì)胞濃度
大鼠ELISA試劑盒配制及使用方法2021/05/17
大鼠ELISA試劑盒組成及試劑配制1.酶聯(lián)板（Assayplate）：一塊（96孔）。2.標(biāo)準(zhǔn)品（Standard）：6瓶。3.生物素標(biāo)記抗體稀釋液（Biotin-antibodyDiluent）：1×10ml/瓶。4.辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液（HRP-avidinDiluent）：1×10ml/瓶。5.生物素標(biāo)記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）7.辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）6.底物溶液（TMB
PCR檢測試劑盒技術(shù)原理方法2021/04/28
PCR檢測試劑盒技術(shù)原理：DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動子的參與下，根據(jù)堿基互補配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實驗中發(fā)現(xiàn)，DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈，當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性，并設(shè)計引物做啟動子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。（DNA高溫變性低溫復(fù)性）發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義，該
進(jìn)口elisa試劑盒檢測的方法2021/04/27
進(jìn)口elisa試劑盒原理:所謂實時熒光定量PCR技術(shù)，是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。進(jìn)口elisa試劑盒檢測方法1.SYBRGreenⅠ法：在PCR反應(yīng)體系中，加入過量SYBR熒光染料，SYBR熒光染料特異性地?fù)饺隓NA雙鏈后，發(fā)射熒光信號，而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發(fā)射任何熒光信號，從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步。SYBR定量PCR擴(kuò)增熒光曲線圖PCR產(chǎn)物熔解曲線圖2.TaqMan
熒光探針試劑產(chǎn)品及特點方法2021/04/22
熒光探針試劑產(chǎn)品及特點：本產(chǎn)品是一管式超快植物種子和葉基因組DNA提取試劑，得到的產(chǎn)物可以直接用于PCR。整個過程簡單快速，尤其適合于大規(guī)模的轉(zhuǎn)基因植物篩選時樣品的制備。1.快速，整個過程只需要15分鐘左右，不需要液氮對植物組織進(jìn)行冰凍、機械處理、純化或者DNA的沉淀。運輸及保存2.一管式，在一個試管內(nèi)完成所有操作，不容易交叉污染。常溫運輸及保存，有效期一年。3.裂解液可以直接用于PCR，剩余樣品可以在4℃保存一月以上。4.便于高通量和自動化，適合于海關(guān)和企業(yè)進(jìn)行大規(guī)模的GMOPCR篩選。5.適
ATCC細(xì)胞原代培養(yǎng)方法2021/04/21
ATCC細(xì)胞注意事項：1.收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們。2.仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。3.用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落，將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜，隔天再取出觀察。此時多數(shù)細(xì)胞均會貼壁，若細(xì)胞仍不能貼壁請用臺盼藍(lán)染色測定細(xì)胞活力，如果證實細(xì)胞活力正常，請將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞
大鼠elisa試劑盒檢測方法與特點2021/04/16
大鼠elisa試劑盒原理:所謂實時熒光定量PCR技術(shù)，是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。大鼠elisa試劑盒檢測方法1.SYBRGreenⅠ法：在PCR反應(yīng)體系中，加入過量SYBR熒光染料，SYBR熒光染料特異性地?fù)饺隓NA雙鏈后，發(fā)射熒光信號，而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發(fā)射任何熒光信號，從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步。SYBR定量PCR擴(kuò)增熒光曲線圖PCR產(chǎn)物熔解曲線圖2.TaqMan
其它elisa試劑盒樣品的處理方法2021/04/14
其它elisa試劑盒特點：1、高效、靈敏、特異的抗體；2、重復(fù)性和可靠性高；3、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體；4、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型；5、可檢測指標(biāo)齊全：細(xì)胞因子檢測、心肌梗塞檢測、內(nèi)分泌檢測、肝纖維化檢測、自身免疫檢測、腫瘤標(biāo)志物檢測、傳染病檢測、特種蛋白檢測、優(yōu)生優(yōu)育檢測等等；6、*，質(zhì)量保證，大限度的節(jié)省實驗經(jīng)費。其它elisa試劑盒樣品的處理1．細(xì)胞培養(yǎng)物上清：細(xì)胞培養(yǎng)物于室溫1000g，離心10分鐘后收集上清，并將標(biāo)本保存于
轉(zhuǎn)化細(xì)胞的原代培養(yǎng)方法2021/04/02
轉(zhuǎn)化細(xì)胞原代培養(yǎng)：1.取出小鼠后瀝干酒精，放入超凈臺內(nèi)，固定在泡沫板上。2.用鑷子提起皮膚，用解剖剪剪開皮膚一個橫切口，將皮膚向上撕開，然后剪開肌肉等，暴露出腹腔，在左側(cè)找到脾臟，用彎頭眼科鑷取出脾臟，置于無菌培養(yǎng)皿中。3.用生理鹽水將取出的脾臟清洗多次，并剔除多余無用的組織。4.將篩網(wǎng)置于平皿中，脾臟置于篩網(wǎng)上，用彎頭鑷鑷住，輕輕在篩網(wǎng)上進(jìn)行碾磨，同時不停滴加不含血清的培養(yǎng)液沖洗。5.將碾磨好的細(xì)胞懸液吸入至離心管中，離心(1000rpm,5min)，吸去上清（去除血液等）。6.加入10ml培
白介素小鼠elisa試劑盒的主要性能指標(biāo)2021/03/31
白介素小鼠elisa試劑盒主要性能指標(biāo)：1.穩(wěn)定性：指在規(guī)定條件下經(jīng)過一段時間的保存，仍能達(dá)到相應(yīng)的性能指標(biāo)，如試劑空白吸光度、線性范圍、靈敏度等。2.反應(yīng)靈敏度：指單位濃度(或活性)的測定物反應(yīng)所產(chǎn)生的反應(yīng)度，反應(yīng)度越高，靈敏度越大。3.精密度：結(jié)果間相互符合的*程度。4.準(zhǔn)確度：與參考測定程序結(jié)果的*性。5.線性范圍：在規(guī)定的重復(fù)性和線性偏差下，測得的濃度或活性值與設(shè)定的濃度或活性值之間的比例關(guān)系的范圍。6.基質(zhì)效應(yīng)：基質(zhì)指的是樣品中被分析物以外的組分。基質(zhì)常常對分析物的分析過程有顯著的干擾
其它細(xì)胞的原代培養(yǎng)方法2021/03/26
其它細(xì)胞原代培養(yǎng)：1.取出小鼠后瀝干酒精，放入超凈臺內(nèi)，固定在泡沫板上。2.用鑷子提起皮膚，用解剖剪剪開皮膚一個橫切口，將皮膚向上撕開，然后剪開肌肉等，暴露出腹腔，在左側(cè)找到脾臟，用彎頭眼科鑷取出脾臟，置于無菌培養(yǎng)皿中。3.用生理鹽水將取出的脾臟清洗多次，并剔除多余無用的組織。4.將篩網(wǎng)置于平皿中，脾臟置于篩網(wǎng)上，用彎頭鑷鑷住，輕輕在篩網(wǎng)上進(jìn)行碾磨，同時不停滴加不含血清的培養(yǎng)液沖洗。5.將碾磨好的細(xì)胞懸液吸入至離心管中，離心(1000rpm,5min)，吸去上清（去除血液等）。6.加入10ml培
PCR檢測試劑盒使用說明以及注意事項2021/03/23
PCR檢測試劑盒使用說明1：樣品準(zhǔn)備：取1毫升細(xì)胞培養(yǎng)上清(貼壁和懸浮細(xì)胞都可以，已培養(yǎng)48小時以上)，在16000g離心5分鐘，小心棄去上清，避免丟失沉淀(沉淀量有可能很少，目視看不到)。將沉淀用無菌PBS重懸，在16000g離心5分鐘，同樣小心棄去上清，如此反復(fù)用無菌PBS洗三次。后將獲得的沉淀用100微升超純水重懸，置于100℃水浴中孵育5分鐘。如此制備好的樣品可在4℃保存1到2個月。2：PCR反應(yīng)的準(zhǔn)備：待各組份融化后先瞬時離心，然后輕彈混勻。按下表在已滅菌的PCR管中配制反應(yīng)體系，每次
BCRC中國臺灣生物資源保存及研究中心（食品工業(yè)發(fā)展研究所）2021/03/18
BCRC主要從事農(nóng)業(yè)、應(yīng)用微生物、細(xì)胞生物技術(shù)、基因工程、菌種保藏方法、工業(yè)微生物、食品科學(xué)、發(fā)酵、分子生物學(xué)等方面的研究。該保藏中心保存有細(xì)菌4541株，真菌3069株，酵母1564株，質(zhì)粒451株，動物細(xì)胞356株，植物細(xì)胞20株，細(xì)菌病毒180株，重組DNA宿主217株。菌種保藏方法主要采用冷凍干燥保藏、冷凍保藏、液氮保藏、移接保藏、硅膠保藏等。該中心保藏的菌種可出售。樣本處理及要求1.血清：全血標(biāo)本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000g離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)?biāo)本放于-20
人elisa試劑盒收集血樣方法2021/03/12
人elisa試劑盒收集血樣：1.收集標(biāo)本：血清、血漿（EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝）、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測，2-8℃保存48小時；更長時間須冷凍（-20℃或-70℃）保存，避免反復(fù)凍融。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制：使用前加入0.5ml蒸餾水混勻，配成1200ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管，管加標(biāo)本稀釋液900ul，第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在管中加入1200ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul，移至第二管。如此反復(fù)作對倍稀釋，從第七管中吸出500ul棄去。
人正常組織細(xì)胞復(fù)蘇的原則2021/03/10
人正常組織細(xì)胞細(xì)胞凍存：人正常組織細(xì)胞待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行293/HEK-293細(xì)胞|細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走)，加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。人正常組織細(xì)胞復(fù)蘇的原則：快速融化：必須將凍存在-196℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃，使細(xì)胞
生物菌種保藏方法2021/03/05
生物菌種保藏方法：1.傳代培養(yǎng)保藏法又有斜面培養(yǎng)、穿刺培養(yǎng)、皰肉培養(yǎng)基培養(yǎng)等（后者作保藏厭氧細(xì)菌用），培養(yǎng)后于4-6℃冰箱內(nèi)保存。2.液體石蠟覆蓋保藏法是傳代培養(yǎng)的變相方法，能夠適當(dāng)延長保藏時間，它是在斜面培養(yǎng)物和穿刺培養(yǎng)物上面覆蓋滅菌的液體石蠟，一方面可防止因培養(yǎng)基水分蒸發(fā)而引起菌種死亡，另一方面可阻止氧氣進(jìn)入，以減弱代謝作用。3.載體保藏法是將微生物吸附在適當(dāng)?shù)妮d體，如土壤、沙子、硅膠、濾紙上，而后進(jìn)行干燥的保藏法，例如沙土保藏法和濾紙保藏法應(yīng)用相當(dāng)廣泛。4.寄主保藏法用于目前尚不能在人工培
其它elisa試劑盒原理及事項2021/03/02
其它elisa試劑盒試驗原理試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。先將生物素標(biāo)記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中的濃度呈比例關(guān)系。其它elisa試劑盒特點：一、高效、靈敏、特異的抗體;二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;三、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體;四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清
小鼠源細(xì)胞使用步驟方法2021/02/26
小鼠源細(xì)胞使用方法:、樣品DNA的制備用自選方法提取CpsDNA。注意：DNA純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品DNA，后面的PCR再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。二、制備Cps標(biāo)準(zhǔn)曲線（以10-10E6這6個10倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作定要在獨立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的DN**段作為陽性對照。1.標(biāo)記6個離心管，分別為
大鼠源細(xì)胞操作流程與注意事項2021/02/24
大鼠源細(xì)胞操作流程：1.整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實驗服、儀器、耗材應(yīng)獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。2.為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。3.每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時離心。
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